[發明專利]一種快速判斷白芍是否經過硫磺熏蒸的鑒定方法

無效

• 申請號: 201110215076.2
• 申請日: 2011-07-29
• 公開（公告）號: CN102288713A
• 公開（公告）日: 2011-12-21
• 發明（設計）人: 李松林;武潔;沈紅;朱玲英;蔡皓;賈曉斌
• 申請（專利權）人: 江蘇省中醫藥研究院
• 主分類號: G01N30/60
• 分類號: G01N30/60;G01N30/72
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

【技術領域】

本發明屬于中藥材及飲片真偽優劣鑒定領域，尤其是使用特定技術檢測特征化學成分判定中藥材及飲片質量優劣的鑒別方法。

【背景技術】

硫磺熏蒸作為一種傳統的中藥材養護方法，具有增白、防蟲、防腐和防霉變等作用，在中藥材及飲片的加工貯藏過程中應用普遍。然而近年來的研究發現，中藥材及飲片經硫磺熏蒸后會殘留毒性二氧化硫，且固有生物活性成分會發生量或質的改變，造成藥材和飲片質量改變，藥理功效下降，甚至毒性增大。國家食品藥品監督管理局在2004年已將硫磺熏蒸后的藥材視為劣藥。2005年版《中國藥典》(一部)取消了山藥、葛根等中藥材的硫熏工藝。在2010版《中國藥典》附錄中增加了二氧化硫殘留量的檢測方法。這表明，國家對于中藥材及飲片的加工貯藏已不再允許使用硫磺熏蒸的方法。

白芍是一種臨床常用中藥材，部分不法商販為降低生產成本，達到增白、防蟲、防腐和防霉變的目的，在白芍藥材初加工時，仍會采用硫磺熏蒸的方法。因此，建立白芍是否為硫磺熏蒸品的檢測方法不但是確保白芍療效和臨床用藥安全的需要，也是打擊不法商販的重要技術手段。

目前人們判斷白芍是否經過硫磺熏蒸的方法主要靠觀察外觀顏色，品嘗氣味，主觀性強，缺乏客觀依據。2010版《中國藥典》附錄IXU二氧化硫殘留量測定法中采用滴定法測定，靈敏度低，樣品取樣數量也較大(10克)。另外，白芍藥材經硫磺熏蒸后，隨著存放時間的延長，氣體揮散后有可能檢測不到二氧化硫成分，出現假陰性結果。有人發現白芍經硫磺熏蒸后，其主要成分之一芍藥苷會部分轉化為芍藥苷硫化物，因此應用芍藥苷硫化物做對照品，建立色譜分析方法判斷白芍是否經過硫磺熏蒸。曾有文獻報導用液相色譜-質譜聯用技術檢測到硫磺熏蒸白芍中芍藥苷硫化物，但在沒有芍藥苷硫化物做對照品的情況下，方法的專屬性不強。

【發明內容】

本發明所要解決的技術問題是運用現代分析檢測技術，使用特定的檢測方法，判斷白芍是否經過硫磺熏蒸。

本發明基本原理：

我們對經硫磺熏蒸前后的白芍樣品進行對比研究發現，白芍經硫磺熏蒸后，其主要成分之一芍藥苷會部分轉化為芍藥苷硫化物。對芍藥苷和芍藥苷硫化物兩個化合物進行質譜研究發現，芍藥苷會產生兩個特征碎片離子m/z449.4和m/z327.2，而芍藥苷硫化物除產生分子離子m/z543.3外，還有特征碎片離子m/z259.3，見圖1。

利用液相色譜-三重四極桿質譜聯用的多反應離子檢測模式掃描兩組多反應離子m/z449.4→m/z327.2和m/z543.3→m/z259.3，不但可從非硫熏白芍樣品中快速檢測芍藥苷，而且可以在硫熏白芍樣品中快速檢測芍藥苷和芍藥苷硫化物，且靈敏度高。另外，芍藥苷硫化物在反相液相色譜上表現出比芍藥苷更短的保留時間，見圖2。

本發明即是通過測定兩組多反應離子m/z449.4→m/z327.2和m/z543.3→m/z259.3色譜峰的存在及順序，判定白芍是否經過硫磺熏蒸。

本發明技術方案：

采用50％甲醇超聲波提取白芍樣品，提取液用聚四氟乙烯微孔濾膜過濾，濾液采用反相液相色譜-三重四極桿質譜聯用分析技術測定，記錄色譜圖和質譜圖，其特征為：通過觀察白芍樣品色譜圖中是否按順序存在兩組多反應離子m/z449.4→m/z327.2和m/z543.3→m/z259.3的色譜峰來判斷白芍是否采用硫磺熏蒸。如按如下順序存在反應離子為m/z543.3→m/z259.3和m/z449.4→m/z327.2的色譜峰，說明該白芍樣品已經硫磺熏蒸；如僅出現離子反應為m/z449.4→m/z327.2的色譜峰，未出現離子反應為m/z543.3→m/z259.3的色譜峰，則可判斷該白芍未經硫磺熏蒸。

本發明與現有的判斷白芍藥材是否經過硫磺熏蒸的二氧化硫殘留檢測方法相比較，具有取樣量小(可小至2mg)、樣品處理簡單和結果準確度高等優點。亦有文獻報道的色譜法檢測芍藥苷硫化物相比，利用多反應離子檢測掃描模式m/z449.4→m/z327.2和m/z543.3→m/z259.3同時檢測芍藥苷和芍藥苷硫化物，結合出峰順序，不但方法的靈敏度高，而且專屬性強，無需不易得到的芍藥苷硫化物對照品即可進行分析判斷。

【附圖說明】

圖1芍藥苷及芍藥苷硫化物質譜圖其中A為芍藥苷；B為芍藥苷硫化物

圖2硫磺熏蒸前后白芍樣品HPLC-ESI(-)-MS色譜圖其中A為未經硫磺熏蒸白芍樣品；B為硫磺熏蒸白芍樣品，1為芍藥苷硫化物色譜峰，2為芍藥苷色譜峰