[發明專利]桑白皮藥材或桑白皮提取物的總生物堿類成分指紋圖譜的構建方法及其質量檢測方法

有效

• 申請號: 201110204130.3
• 申請日: 2011-07-20
• 公開（公告）號: CN102890125A
• 公開（公告）日: 2013-01-23
• 發明（設計）人: 段震文;郭樹仁;薛嵐
• 申請（專利權）人: 北京北大維信生物科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/36
• 代理公司: 北京康信知識產權代理有限責任公司 11240
• 代理人: 吳貴明

1.一種桑白皮藥材或桑白皮提取物的總生物堿類成分指紋圖譜的構建方法，其特征在于，所述構建方法包括以下步驟：

(a)桑白皮藥材溶液或桑白皮提取物溶液的制備

所述桑白皮藥材溶液的制備：以0.02mol/L的鹽酸溶液或水為溶劑，將所述桑白皮藥材的粉末配制成所述桑白皮藥材溶液；

所述桑白皮提取物溶液的制備：以水作為溶劑，將所述桑白皮提取物的粉末配制成所述桑白皮提取物溶液；

(b)利用高效液相色譜法測得所述桑白皮藥材總生物堿類成分指紋圖譜或所述桑白皮提取物總生物堿類成分指紋圖譜，其中，包括：

分別將硼酸鹽緩沖液和芴甲氧酰氯乙腈溶液加入所述桑白皮藥材溶液或桑白皮提取物溶液，水浴下進行反應；再依次將甘氨酸溶液、醋酸水溶液加入到所述桑白皮藥材溶液或所述桑白皮提取物溶液，過濾后取續濾液注入高效液相色譜儀，其中，

所述高效液相色譜儀中的色譜柱以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈為流動相A，0.1％醋酸為流動相B進行梯度洗脫，熒光檢測器激發波長為254nm，發射波長為309nm，柱溫在20-40℃的范圍內，所述梯度洗脫的程序如下：

0～50分鐘，所述流動相A體積比由30％上升到35％，所述流動相B體積比由70％下降到65％；

50～60分鐘，所述流動相A體積比保持為35％，所述流動相B體積比保持為65％；

60～61分鐘，所述流動相A體積比由35％上升到100％，所述流動相B體積比由65％下降到0％；

61～70分鐘，所述流動相A體積比保持為100％，所述流動相B體積比保持為0％；

70～71分鐘，所述流動相A體積比由100％下降到30％，所述流動相B體積比由0％上升到70％；

得到所述桑白皮藥材總生物堿類成分指紋圖譜或所述桑白皮提取物總生物堿類成分指紋圖譜。

2.根據權利要求1所述的構建方法，其特征在于，進一步包括參照物溶液的制備，所述參照物溶液可通過將1-脫氧野尻霉素鹽酸鹽加入水中制備而成；制得的所述參照物溶液與所述桑白皮藥材溶液或桑白皮提取物溶液同時注入所述高效液相色譜儀。

3.根據權利要求1所述的構建方法，其特征在于，所述桑白皮藥材溶液的制備進一步包括：

將過50目篩的所述桑白皮藥材的粉末0.2g，置于250ml容量瓶中，加0.02mol/L鹽酸溶液200-240ml，超聲處理，放冷，再加0.02mol/L鹽酸溶液至刻度，搖勻得到所述桑白皮藥材溶液。

4.根據權利要求1所述的構建方法，其特征在于，所述桑白皮提取物溶液的制備進一步包括：

將所述桑白皮提取物的粉末0.05g，置100ml容器中，加入50ml水，稱定重量，超聲處理；放冷，再稱定重量，用水補足減失的重量，搖勻；從所述容器中精密吸取0.5ml加入容量瓶中，用水稀釋至10ml，搖勻得到所述桑白皮提取物溶液。

5.根據權利要求1-3中任一項所述的構建方法，其特征在于，所述桑白皮藥材總生物堿類成分的對照指紋圖譜中具有11個特征指紋峰，所述特征指紋峰的保留時間為：

1號峰為0.537±0.038min，2號峰為1.000±0.000min，3號峰為1.400±0.010min，4號峰為1.429±0.004min，5號峰為1.470±0.017min，6號峰為1.906±0.016min，7號峰為2.028±0.013min，8號峰為2.203±0.022，9號峰為2.314±0.034min，10號峰為3.633±0.019min，11號峰為3.735±0.022min。

6.根據權利要求1、2或4所述的構建方法，其特征在于，所述桑白皮提取物總生物堿類成分的對照指紋圖譜中具有13個特征指紋峰，所述特征指紋峰的保留時間為：

1號峰為0.530±0.029min，2號峰為S峰，為1.000±0.000min，3號峰為1.401±0.009min，4號峰為1.428±0.005min，5號峰為1.471±0.019min，6號峰為1.517±0.017min，7號峰為1.908±0.019min，8號峰為2.027±0.014min，9號峰為2.206±0.031min，10號峰為2.312±0.038min，11號峰為2.583±0.038min，12號峰為3.625±0.036min，13號峰為3.730±0.033min。

7.一種桑白皮藥材或桑白皮提取物的質量檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

待測桑白皮藥材或桑白皮提取物溶液的制備：按照權利要求1所述的構建方法中的步驟(a)制備所述待測桑白皮藥材溶液或所述待測桑白皮提取物溶液；

所述待測桑白皮藥材或待測桑白皮提取物的指紋圖譜測定：按照權利要求1所述的構建方法中的步驟(b)測得所述待測桑白皮藥材指紋圖譜或所述待測桑白皮提取物的指紋圖譜；以及

將所述待測桑白皮藥材指紋圖譜與權利要求5所述構建方法中的所述桑白皮藥材總生物堿類成分對照指紋圖譜進行比較；或者將所述待測桑白皮提取物指紋圖譜與權利要求6所述構建方法中的所述桑白皮提取物總生物堿類成分對照指紋圖譜進行比較。