[發明專利]一種制備7-氨基頭孢烷酸的方法

無效

• 申請號: 201110194225.1
• 申請日: 2011-07-12
• 公開（公告）號: CN102286597A
• 公開（公告）日: 2011-12-21
• 發明（設計）人: 趙松
• 申請（專利權）人: 福建省?？顾帢I股份有限公司
• 主分類號: C12P35/02
• 分類號: C12P35/02
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

技術領域

?本發明涉及藥物合成領域，具體涉及一種采用微生物方法來制備7-氨基頭孢烷酸。?

背景技術

7-氨基頭孢烷酸，分子量為272.27，是頭孢菌素（β內酰胺類）抗生素關健中間體。生產過程是通過生物發酵、化學提煉制取頭孢菌C，再由頭孢菌C化學裂解或酶解成7-氨基頭孢烷酸。7-氨基頭孢烷酸有兩個活性基團，3-位的乙酰氧基和7-位的氨基，在這兩個活性基團上連接不同的側鏈，就構成不同性質的頭孢類抗生素，可以生成80余種下游頭孢抗生素產品，如頭孢噻肟鈉、頭孢曲松鈉、頭孢美唑鈉、頭孢呋辛鈉、頭孢哌酮鈉等，因此已成為當今國際抗生素市場的主角。目前國際上生產國家主要集中在意大利、奧地利和西班牙，由于他們大多采用酶法工藝生產，因而7-氨基頭孢烷酸產品的化學溶媒殘留少、純度高，一直牢牢占據歐美高端法規市場。國內生產企業主要是采取化學裂解法工藝生產，在生產工藝和質量控制上與國外先進的生產企業還有一定的差距。?

現有技術主要是采用化學裂解法來生產7-氨基頭孢烷酸，其主要不足有A．防火防爆要求高。化學法所使用的原材料包括大量的溶媒，這些溶媒在生產過程以及回收過程中具有很強的揮發性以及易燃易爆，其對防火防爆要求等級很高。B．環境污染大。化學法在反應過程中使用大量的二氯甲烷、苯胺和氯硅烷等均為有毒有害的強烈污染源，這些污染源在生產過程中產生的大量高COD、難生化的廢水、有害的廢氣等的治理成本很高。C．生產成本高。化學法生產7-氨基頭孢烷酸的通常步驟為：酯化、氯化、醚化、水解、結晶等5個步驟，在生產過程中的使用的溶媒還需專門的回收車間建立回收工序進行回收，同時化學法在生產過程中使用了多種有機溶劑以及蒸汽，承擔著較重的能耗成本以及治污成本。D．反應條件苛刻生產過程不易控制。化學法必須在無水條件下反應，所以必須使用頭孢菌素C鈉鹽固體投料，頭孢菌素C必須通過結晶干燥除去水分后才能用于7-氨基頭孢烷酸的生產。E.?7-氨基頭孢烷酸結晶液中雜質多，容易對其結晶過程產生不利影響，造成產品晶型不好，含量低，色級高，穩定性差并且殘留溶媒多。另一方面，由于7-氨基頭孢烷酸分子內含有比較活潑的β-內酰胺環和游離的伯氨基，穩定性相對較差。在長途運輸以及室溫放置時間較長時，內酰胺環可能開環，產生的雜質包括去乙酰7-氨基頭孢烷酸及去乙酰氧基7-氨基頭孢烷酸等，并會進一步形成高分子聚合物.?

發明內容

針對以上問題，本發明提出了一種酶法裂解法制備7-氨基頭孢烷酸的方法，使生產過程大大簡化，發酵得到的頭孢菌素C不需結晶就可用于酶解，生產過程中沒有用到有毒溶劑，省掉加保護劑和去保護劑等步驟，產品能夠達到高收率、高質量，同時降低成本和減少污染。?

具體的實施步驟如下：在酶反應器中加入頭孢菌素C鈉鹽溶液，再加入D-氨基酸氧化酶氧化，經雙氧水中轉后，加GL-7氨基頭孢烷酸?；噶呀猓俳浗Y晶，離心過濾，洗滌，干燥，檢驗即得7-氨基頭孢烷酸，純度在96%以上。?

所述的頭孢菌素C鈉鹽溶液的濃度是4%，其配制步驟：稱取48克頭孢菌素C鈉鹽于1200ml燒杯中，加入適量蒸餾水，充分溶解后，用3N氨水調節PH至7.0左右，真空抽濾除去不溶物，加蒸餾水至1200ml，20℃恒溫水浴備用，取樣HPLC分析。?

所述的氧化酶的投入量為每升頭孢菌素C鈉鹽溶液投入2500u氧化酶。?

所述的?；傅耐度肓繛槊可^孢菌素C鈉鹽溶液投入5000u酰化酶。?

氧化過程中酶反應器的溫度控制在20℃，氧氣的流量保持100L/h，反應器罐上壓力0.1±0.01MPa，滴加1.5N?氨水控制反應pH7.2~7.25，每10分鐘記錄一次pH，當pH上升至7.6-7.8時結束反應，取樣HPLC分析。?

中轉加雙氧水過程是將過氧化氫電極插入氧化反應液中，滴加3ml?過氧化氫的質量分數是10%的雙氧水，控制過氧化氫讀數10~40ppm，取樣HPLC分析。?

?；^程中酶反應器的溫度控制在20℃，在氧化中轉溶液中滴加3N氨水控制反應pH8.3~8.4，控制反應溫度20℃，每10分鐘記錄一次pH值，當PH值能維持3-5min不變時，停止反應，取樣HPLC分析。?