[發明專利]一種人類DNA STR檢測用標準物質的制備方法

有效

• 申請號: 201110185834.0
• 申請日: 2011-07-01
• 公開（公告）號: CN102251032A
• 公開（公告）日: 2011-11-23
• 發明（設計）人: 畢萬里;何召明;葉健;趙興春
• 申請（專利權）人: 公安部物證鑒定中心;蘇州新海生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/63;C12N15/66;C12R1/19
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 馮瓊;李玉秋

1.一種制備人類DNA?STR檢測用標準物質的方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1、以人類基因組作為模板，人工合成或PCR擴增獲得含有人類DNA短串聯重復序列基因座的目的基因片段；

步驟2、將步驟1的目的基因片段與質粒載體重組，重組質粒轉入到細胞中，篩選出含有目的基因片段的陽性克隆并進行測序鑒定；

步驟3、提取步驟2鑒定的陽性克隆中的重組質粒，將含有不同基因型的重組質粒等比例混合，配置成人類基因組的DNA?STR檢測用標準物質。

2.根據權利要求1所述的方法，所述目的基因片段為5～200種，每種目的基因片段含有至少一個基因型。

3.根據權利要求1所述的方法，所述目的基因片段為10～50種，每種目的基因片段含有至少一個基因型。

4.根據權利要求1中所述的方法，所述目的基因片段分別含有STR基因座CSFlPO、D2S1338、D3S1358、D5S818、D6S1043、D7S820、D8S1179、D12S391、D13S317、D16S539、D18S51、D19S433、D21S11、FGA、Penta?D、Penta?E、Th01、Tpox、vWA和性別標記位點Amelogenin的片段，用SEQ?ID?No.1-SEQ?ID?No.42所示引物序列分別進行PCR擴增。

5.根據權利要求1所述的方法，步驟2所述細胞是大腸桿菌細胞，所述質粒載體為大腸桿菌相應的質粒。

6.根據權利要求1所述的方法，步驟3所述重組質粒為線性質粒。

7.含有權利要求1制備的DNA?STR標準物質的試劑盒。