[發明專利]復合微生物酶制劑及其制備方法

有效

• 申請號: 201110173000.8
• 申請日: 2011-06-24
• 公開（公告）號: CN102286322A
• 公開（公告）日: 2011-12-21
• 發明（設計）人: 張宿義;方軍;易彬;盧中明;敖宗華
• 申請（專利權）人: 瀘州品創科技有限公司
• 主分類號: C12G3/02
• 分類號: C12G3/02;C12R1/01;C12R1/865
• 代理公司: 成都虹橋專利事務所 51124
• 代理人: 柯海軍;武森濤

1.生產復合微生物酶制劑的方法，其特征在于包括如下步驟：

a、己酸菌液的制備：己酸菌菌種經過復壯、擴大培養，得到己酸菌液；

b、窖泥富集菌液的制備：取窖泥中的菌種進行培養，得到窖泥富集菌液；

c、窖泥功能菌的制備：己酸菌液與窖泥富集菌液混合，接種于窖泥功能菌培養基中，32～36℃下培養22～27d，得到窖泥功能菌液，干燥，得到干制窖泥功能菌；

其中，己酸菌液與窖泥富集菌液中的菌種干重重量之比為1∶1～5；所述窖泥功能菌培養基為：窖皮泥100～150重量份，糟醅700～800重量份，中溫大曲100～200重量份，乙醇7.2～13.8重量份，硫酸銨0.27～0.69重量份，培養基含水量為30～60wt％，pH4～7；

d、干制窖泥功能菌以菌干重計、生香酵母、B類酶促物質、紅曲酯化酶按重量配比1∶0.25～0.35∶1～2∶0.30～0.45混合，得到復合微生物酶制劑；

其中，所述的紅曲酯化酶由產酯紅曲霉經發酵培養而制得；

所述的B類酶促物質采用下述方法制備而成：以濃香型白酒生產的丟糟為基質，加入對丟糟質量5～15％的高溫大曲，和丟糟質量5～15％的黃水過濾后所得的濾渣，發酵5～15天，然后干燥、粉碎，制得水分≤15wt％的粗酶制劑。

2.根據權利要求1所述的生產復合微生物酶制劑的方法，其特征在于：a步驟中的己酸菌菌種采用下述方法進行復壯、擴大培養：

將己酸菌菌種接入無菌水中，于經過75～85℃保溫8～10min，然后接種于己酸菌種子培養基中32～36℃下培養7～8d，再于己酸菌擴大培養基中30～35℃下擴大培養5～7d；

其中，己酸菌種子培養基為：以蒸餾水1000mL計，乙酸鈉0.5％，酵母膏0.1％，磷酸氫二鉀0.04％，硫酸銨0.05％，硫酸鎂0.02％，碳酸鈣1％，乙醇2％，121℃滅菌20min，pH6.5～7；

己酸菌擴大培養基為：以蒸餾水1000mL計，硫酸銨0.04％，糟醅浸提液40％，乙酸鈉0.7％，碳酸鈣0.8％，乙醇0.5％，121℃滅菌20min，pH6-6.5。

3.根據權利要求1或2所述的生產復合微生物酶制劑的方法，其特征在于：b步驟中窖泥富集菌液采用下述方法制備得到：

以窖泥1g計，用無菌水稀釋約100倍，于75～85℃回流熱處理25～35min后，取10mL窖泥菌液接種入1000mL窖泥富集液培養基中，32～37℃恒溫培養3～5d，培養結束后選擇發酵旺盛的菌種作為原始菌種再進行擴大培養；

所述窖泥富集液培養基為：以蒸餾水1000mL計，葡萄糖3％，蛋白胨2％，牛肉膏1.5％，磷酸氫二鉀0.05％，碳酸鈣2％，乙酸鈉0.5％，121℃滅菌20min，pH6～6.5。

4.根據權利要求1～3任一項所述的生產復合微生物酶制劑的方法，其特征在于：c步驟中的pH值采用黃水進行調節。

5.根據權利要求1～4任一項所述的生產復合微生物酶制劑的方法，其特征在于：c步驟中，接種時，己酸菌液與窖泥富集菌液中的菌種總量為培養基質量的2～6％，己酸菌液與窖泥富集菌液中的菌種干重重量之比為1∶3～4；所述窖泥功能菌培養基為：窖皮泥120～130重量份，糟醅730～750重量份，中溫大曲140～160重量份，乙醇9.9～11.44重量份，硫酸銨0.396～0.52重量份，培養基含水量為40～50wt％，pH5～6。

6.根據權利要求1～5任一項所述的生產復合微生物酶制劑的方法，其特征在于：c步驟所得窖泥功能菌液于40～60℃下干燥至含水量為5～25wt％，得到干制窖泥功能菌。

7.根據權利要求6所述的生產復合微生物酶制劑的方法，其特征在于：c步驟所得窖泥功能菌液于45～50℃下干燥至含水量為10～15wt％。

8.根據權利要求1～7任一項所述的生產復合微生物酶制劑的方法，其特征在于：d步驟中所述的干制窖泥功能菌以菌干重計、生香酵母、B類酶促物質、紅曲酯化酶的重量配比為1∶0.25～0.30∶1.5～1.7∶0.35～0.40。

9.由權利要求1～8任一項的方法生產的復合微生物酶制劑。