[發明專利]一株生產莽草酸的重組大腸桿菌及其構建方法無效
| 申請號: | 201110163364.8 | 申請日: | 2011-06-17 |
| 公開(公告)號: | CN102250874A | 公開(公告)日: | 2011-11-23 |
| 發明(設計)人: | 方宏清;鄒永康;陳凱;孫旭;蔡釩;戴紅梅;李樹龍;周長林 | 申請(專利權)人: | 中國人民解放軍軍事醫學科學院生物工程研究所;中國藥科大學 |
| 主分類號: | C12N15/09 | 分類號: | C12N15/09;C12N15/63;C12N1/21;C12P7/42;C12R1/19 |
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| 地址: | 100071 北*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 生產 莽草 重組 大腸桿菌 及其 構建 方法 | ||
1.一種生產莽草酸的重組大腸桿菌的構建方法,其特征首先在于敲除了ydiB基因。
2.如權利要求1所述,此種生產莽草酸重組大腸桿菌的構建方法,其特征還在于敲除了ptsHIcrr操縱子。
3.如權利要求1-2所述,此種生產莽草酸重組大腸桿菌的構建方法,其特征還在于敲除aroL基因。
4.如權利要求1-3所述,此種生產莽草酸重組大腸桿菌的構建方法,其特征還在于敲除aroK基因。
5.如權利要求1-4所述,此種生產莽草酸重組大腸桿菌的構建方法,其特征還在于敲除shiA基因。
6.如權利要求1-5所述,此種生產莽草酸重組大腸桿菌的構建方法,其特征還在于其染色體上整合了由L-阿拉伯糖調控表達的T7RNA聚合酶基因。
7.如權利要求1-6所述,此種生產莽草酸重組大腸桿菌的構建方法,其特征還在于其菌體內轉化了重組表達低拷貝質粒pAOC-TGEFB。
8.如權利要求7所述,重組表達質粒pAOC-TGEFB包含有莽草酸代謝途徑中的關鍵基因tktA、glk、aroE、aroF以及aroB。
9.如權利要求8所述,其特征在于,所述重組表達低拷貝質粒pAOC-TGEFB所含的tktA、glk、aroE、aroF以及aroB基因均帶有T7啟動子。
10.如權利要求1-7所述,以此方法構建獲得生產莽草酸的重組大腸桿菌菌株,其特征在于,其在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏的保藏號為:CGMCC?No.4631。
11.如權利要求10所述重組工程菌,其特征在于該工程菌為大腸桿菌DH5α。
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