[發(fā)明專利]地喹氯銨-聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺共軛化合物及其修飾的白藜蘆醇脂質(zhì)體

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201110123878.0
• 申請(qǐng)日: 2011-05-13
• 公開（公告）號(hào): CN102757555A
• 公開（公告）日: 2012-10-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 呂萬良;王小星;李陽冰;姚紅娟;居瑞軍;張燕;李若婧;于洋;張亮
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京大學(xué)
• 主分類號(hào): C08G65/48
• 分類號(hào): C08G65/48;A61K31/475;A61K31/05;A61K9/127;A61P35/00;A61P11/00
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種地喹氯銨-聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺共軛化合物及其制備方法，以及以該共軛化合物修飾的白藜蘆醇脂質(zhì)體

背景技術(shù)

腫瘤的多藥耐藥性是化療失敗的主要原因，可導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞對(duì)治療的耐藥、復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移，尤其是內(nèi)源性的多藥耐藥。腫瘤細(xì)胞可通過改變前凋亡及凋亡基因編碼的蛋白質(zhì)(如Bcl-2家族蛋白、凋亡信號(hào)通路中的Caspase蛋白等)的功能來引起遺傳及表觀遺傳的改變，從而造成內(nèi)源性的多藥耐藥。

癌癥的化療主要采取兩種基本方式來消除腫瘤細(xì)胞：一是通過將化療藥直接作用于腫瘤細(xì)胞將其殺死，二是通過激活腫瘤細(xì)胞的凋亡基因，從而展開程序化殺傷腫瘤細(xì)胞。

線粒體是一種絕大多數(shù)真核細(xì)胞中都存在的膜封閉的細(xì)胞器，是細(xì)胞的能量工廠。線粒體除了可以供應(yīng)細(xì)胞能量，也是細(xì)胞命運(yùn)的調(diào)控中心，參與著細(xì)胞分化、細(xì)胞死亡，控制著細(xì)胞的周期和生長。腫瘤細(xì)胞的線粒體在結(jié)構(gòu)和功能上都與正常細(xì)胞有所不同，其表現(xiàn)出更廣泛的代謝能力，對(duì)作用于線粒體的藥物也更加敏感。

抗癌藥物誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡效應(yīng)主要包括兩種獨(dú)立的上游起始通路：一，通過與死亡受體的配體交聯(lián)，從而激活上游的Caspase；二，通過觸發(fā)各種形式的細(xì)胞應(yīng)激，釋放凋亡因子。這兩種通路都集中于在線粒體水平，繼而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。因此，直接作用于腫瘤細(xì)胞的線粒體并誘導(dǎo)其凋亡為克服化療中的內(nèi)源性耐藥問題提供了策略。綜上，線粒體靶向性治療是一種選擇性消除腫瘤細(xì)胞的有效手段。

越來越多的線粒體作用的藥物被開發(fā)用來誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡，例如葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑、線粒體通透性轉(zhuǎn)換調(diào)節(jié)劑、線粒體外膜滲透性調(diào)節(jié)劑等。但是這些藥物常因不利的藥動(dòng)學(xué)性質(zhì)不能達(dá)到預(yù)期的治療效果，增大了藥物的毒性。人們已經(jīng)開發(fā)了許多線粒體藥物遞送系統(tǒng)來解決這一問題，如將線粒體靶向性分子磷酸三甲苯酯(TPP)、地喹氯銨(DQA)或線粒體靶向性信號(hào)蛋白(MTSs)修飾到脂質(zhì)載體上，從而達(dá)到將藥物靶向線粒體的目的。

白藜蘆醇是一種多酚化合物，在植物類食物中普遍存在。白藜蘆醇是一種很有潛力的抗癌劑，可抑制癌變的三個(gè)主要階段：啟動(dòng)、促進(jìn)和演進(jìn)，并啟動(dòng)線粒體凋亡通路，誘導(dǎo)多種癌癥細(xì)胞凋亡。但是，由于白藜蘆醇的水溶性低、穩(wěn)定性差及治療指數(shù)差，在臨床中的應(yīng)用十分有限。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種地喹氯銨-聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(DQA-PEG₂₀₀₀-DSPE)共軛化合物及其制備方法。

本發(fā)明所提供的DQA-PEG₂₀₀₀-DSPE共軛化合物的結(jié)構(gòu)式如式I所示：

(式I)

式I所示的化合物的制備方法，包括下述步驟：使式II所示的地喹氯銨與式III所示的羧基聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺進(jìn)行酰胺縮合反應(yīng)，得到式I所示化合物；

(式II)

(式III)。

所述酰胺縮合反應(yīng)中所用的反應(yīng)縮合劑為二環(huán)己基碳二亞胺和1-羥基苯并三唑；所述酰胺縮合反應(yīng)中所用的催化劑為4-二甲氨基吡啶。所述酰胺縮合反應(yīng)在乙腈與水的混合溶劑中進(jìn)行，兩者的體積比可為1∶1。

所述酰胺縮合反應(yīng)中地喹氯銨∶4-二甲氨基吡啶∶二環(huán)己基碳二亞胺∶1-羥基苯并三唑∶羧基聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺＝5∶24.6∶10∶10∶1(摩爾比)。

所述方法還包括將含式I所示化合物的反應(yīng)液在水中進(jìn)行透析純化，并將透析后的液體凍干的步驟。

所述透析中使用的是截留分子量為2000Da的透析袋。

本發(fā)明的再一個(gè)目的是提供一種線粒體靶向性白藜蘆醇脂質(zhì)體及其制備方法。

本發(fā)明所提供的線粒體靶向性白藜蘆醇脂質(zhì)體，其組成包括：白藜蘆醇和脂材，所述白藜蘆醇和脂材的質(zhì)量比為1∶20至1∶40，優(yōu)選為1∶20；所述脂材由蛋黃卵磷脂、膽固醇和式I所示的化合物組成，三者的摩爾比依次為(63-67)∶(18-22)∶(2-4.35)，優(yōu)選為65∶20∶4.35。

所述線粒體靶向性白藜蘆醇脂質(zhì)體的制備方法，包括下述步驟：

將組成脂質(zhì)體的白藜蘆醇和脂材溶于有機(jī)溶劑中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去所述有機(jī)溶劑，得到脂膜；將所述脂膜用甘露醇溶液水化，再將得到的懸液用超聲或高壓勻質(zhì)處理，最后用微孔濾膜過濾，即得到所述線粒體靶向性白藜蘆醇脂質(zhì)體。

所述甘露醇溶液具體可為質(zhì)量濃度為5％的甘露醇水溶液。

本發(fā)明另一個(gè)目的是提供上述線粒體靶向性白藜蘆醇脂質(zhì)體的應(yīng)用。