[發明專利]一種護肝益脾的藥物組合物及其制備方法

有效

• 申請號: 201110107534.0
• 申請日: 2011-04-27
• 公開（公告）號: CN102178937A
• 公開（公告）日: 2011-09-14
• 發明（設計）人: 蘇保榮;徐鳳彩;程京燕;胡永剛
• 申請（專利權）人: 珠海市御品堂生物科技有限公司
• 主分類號: A61K38/44
• 分類號: A61K38/44;A61K38/48;C12N9/04;A61P1/16;A61P25/32;A61K36/752
• 代理公司: 廣東秉德律師事務所 44291
• 代理人: 楊煥軍;田學東

1.一種護肝益脾的藥物組合物，其特征在于，包括基質、ADH酶粉和ALDH酶粉，所述基質主要是由下列按重量份的原料制成：葛花或葛根200～260份、枳椇子100～140份、納豆干粉20～30份。

2.根據權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，所述基質主要是由下列按重量份的原料制成：葛花或葛根240份、枳椇子120份、納豆干粉25份。

3.根據權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于，按重量份比，基質70～90份、ADH酶粉5～15份、ALDH酶粉5～15份。

4.根據權利要求3所述的藥物組合物，其特征在于，ADH酶粉與ALDH酶粉的重量比為1∶1。

5.根據權利要求3所述的藥物組合物，其特征在于，基質80份、ADH酶粉10份、ALDH酶粉10份。

6.根據權利要求1至5任一所述的藥物組合物，其特征在于，和藥學上可接受的載體制成膠囊劑或片劑或顆粒劑。

7.一種制備權利要求1所述的藥物組合物的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)制備基質：

101)稱取葛花或葛根、枳椇子和納豆干粉，備用；

102)將葛花或葛根、枳椇子分別洗凈、烘干、粉碎，混合得混合粉，加入乙醇水溶液，于85℃～95℃回流提取4～6h，濾出提取液，殘渣重新提取一次，合并濾液；濾液于85℃以下真空濃縮成浸膏；

103)將納豆干粉加入所述浸膏，混勻，55℃以下烘干，粉碎過篩，滅菌，無菌保貯，得基質備用；

2)將基質和ADH酶粉、ALDH酶粉混合制得所述藥物組合物。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于：步驟102)中，乙醇水溶液的濃度為50％～70％，乙醇水溶液的體積與混合粉的體積的比值為7。

9.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述ADH酶粉通過以下步驟制備：

201)馬鈴薯浸汁制備：取去皮馬鈴薯A克，切成小塊加水5A毫升，80℃浸泡1h后，用紗布過濾，取濾出液并用水定量至5A毫升，121℃滅菌20min，即得馬鈴薯浸汁備用，A＞0；

202)釀酒酵母斜面培養：采用斜面培養，取100B毫升上述馬鈴薯浸汁，加入2B克葡萄糖，煮沸后加入2B克瓊脂，繼續加熱使瓊脂熔化后，用水定量至100B毫升，分裝入試管，制成斜面；加塞，包扎，121℃滅菌20min，冷卻至室溫后，于無菌條件下，將菌種釀酒酵母接種在斜面上，30℃恒溫培養24h；B＞0；

203)種子菌培養：取上述馬鈴薯浸汁，然后按每100毫升馬鈴薯浸汁加入2克葡萄糖，再分裝至錐形瓶，加塞，包扎，121℃滅菌20min，冷卻至室溫后，于無菌條件下，各接一接種環步驟202)所得的斜面培養菌種，30℃恒溫120r/min搖瓶培養12h；

204)液體發酵：于錐形瓶中，加入上述馬鈴薯浸汁，然后按每100毫升馬鈴薯浸汁加入2克葡萄糖，121℃滅菌20min，冷卻至室溫后，于無菌條件下接種10ml的種子菌培養液，30℃恒溫120r/min搖瓶發酵17h；

205)發酵液經4000r/min?15min、室溫的離心收集細胞或過濾收集細胞，并用蒸餾水洗凈，得酵母物；

206)稱取酵母物，加入0.01mol/L、pH7.0的磷酸鉀緩沖液，所述磷酸鉀緩沖液內含0.01mol/L巰基乙醇和1mmol/L?ZnCl₂，磷酸鉀緩沖液的體積與酵母物的質量的比值為5～10，攪拌提取3h～5h，4000r/min-8000r/min、室溫離心10min，取上清液；殘渣重復提取一次，合并上清液；

207)采用雙水相萃取純化酶液：于合并上清液中加入相對分子質量17000-24000的聚乙二醇和磷酸氫二鉀萃取，聚乙二醇的質量與上清液的體積的比值為6-12％，磷酸氫二鉀的質量與上清液的體積的比值為8～16％；分層后，取上層酶液，對上述緩沖液透析24h以上，其間更換緩沖液3～4次；用聚乙二醇吸水濃縮或超過濾濃縮至原體的1/3左右，得酶的濃縮液，凍干，即得ADH酶粉。

10.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述ALDH酶粉通過以下方法制備：將綠豆洗凈，包于紗布內，投入沸水中3～5min，取出，攤涼，轉入搪瓷盆內攤平，加少量水，置培養箱內37～40℃催芽1～2d；待綠豆芽長至1～2cm長后，取出并用蒸餾水洗凈；將綠豆芽置勻漿機中，加入預冷至5～10℃的0.01mol/LpH7.3～7.8磷酸鉀緩沖液，所述磷酸鉀緩沖液內含8mmol/L?EDTA、0.01mol/L巰基乙醇和0.01mol/L?KCl，所述磷酸鉀緩沖液的體積與綠豆芽的質量的比值為5～10，勻漿，60目尼龍布過濾，濾液以4000r/min進行離心10～15min，收集上清液；于上清液中加固體硫酸銨至45％飽和度，于5～8℃低溫置3～5h，離心，收集上清液；上清液對所述緩沖液透析12～24h，其間更換緩沖液2～3次；然后用聚乙二醇吸水濃縮或超過濾濃縮至原體積的1/3；凍干，得ALDH酶粉備用。