[發(fā)明專利]用于MTT比色實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞混勻裝置

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201110099004.6
• 申請日: 2011-04-20
• 公開（公告）號: CN102247772A
• 公開（公告）日: 2011-11-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 曲萍;于軍;趙海康;張學(xué)策;南海燕;顏林楓;仝黎;趙玉峰;劉芳娥;田菲;劉楠楠;梁向艷;黃小軍;鐵茹
• 申請（專利權(quán)）人: 中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)
• 主分類號: B01F7/00
• 分類號: B01F7/00;B01F3/08;G01N1/38;G01N21/31
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責(zé)任公司 61200
• 代理人: 朱海臨

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種在醫(yī)學(xué)教學(xué)及科研中用于MTT(噻唑藍(lán))比色實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞混勻裝置。

背景技術(shù)

近年來，隨著醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的不斷深入和發(fā)展，細(xì)胞學(xué)研究是醫(yī)學(xué)領(lǐng)域研究的重要環(huán)節(jié)之一，其原因在于細(xì)胞是生命有機(jī)體的結(jié)構(gòu)和生命活動的最基本單位。MTT比色實(shí)驗(yàn)是一種通過測定細(xì)胞能量代謝水平用以間接反映細(xì)胞增殖情況的檢測方法。檢測原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚(Formazan)并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無此功能。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細(xì)胞中的甲瓚，用酶標(biāo)儀在相應(yīng)波長處測定其光吸收值，在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi)，MTT結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比。根據(jù)測得的吸光度值(OD值)，來判斷活細(xì)胞數(shù)量，OD值越大，細(xì)胞活性越強(qiáng)(如果是測藥物毒性，則表示藥物毒性越小)。以往的實(shí)驗(yàn)方法是將細(xì)胞稀釋到所需濃度時(shí)，用混勻器不斷的混勻細(xì)胞或用排槍不斷的吹打細(xì)胞，然后，再用排槍將細(xì)胞加入96孔板。在此過程中，由于吹打的力度或次數(shù)的不同，導(dǎo)致細(xì)胞濃度產(chǎn)生差異，造成各孔細(xì)胞分布不均勻而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，此問題長期以來使大部分實(shí)驗(yàn)者受到困擾。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明針對背景技術(shù)所存在的問題，提供了一種方便、快速的細(xì)胞混勻裝置，可有效減少實(shí)驗(yàn)過程中的操作誤差、節(jié)省時(shí)間、避免交叉污染。

為達(dá)到以上目的，本發(fā)明是采取如下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)的：

一種用于MTT比色實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞混勻裝置，其特征在于，包括一個恒流泵、一個帶攪拌器的金屬容器和一個設(shè)有進(jìn)、出液口的取液槽，金屬容器和恒流泵并列緊固于一個綜合固定架內(nèi)，取液槽緊固于綜合固定架內(nèi)的金屬容器與恒流泵箱之間的上方；所述金屬容器底部設(shè)有一個下彎管連接導(dǎo)液管，導(dǎo)液管通過恒流泵后與取液槽的進(jìn)液口相連接；金屬容器頂部設(shè)有一個可拆卸的端蓋，端蓋中心設(shè)有一個從動輪連接伸入容器內(nèi)的攪拌器，端蓋上距中心大于從動輪半徑處設(shè)有一帶孔蓋的加液孔，在加液孔所在端蓋直徑的相對位置設(shè)有一上彎管，其通過軟管與取液槽的出液口連接，恒流泵中心軸設(shè)有上、下兩個主動輪，其中上方的主動輪與金屬容器端蓋上的從動輪通過傳送帶連接。

上述方案中，所述的取液槽為一個V型金屬槽，其進(jìn)液口位于長度方向一端的上部，出液口位于長度方向另一端的下部。所述取液槽上設(shè)有槽蓋。所述下彎管和上彎管上設(shè)置有用于對進(jìn)出金屬容器的細(xì)胞液體進(jìn)行流量控制的閥門。

本發(fā)明裝置的優(yōu)點(diǎn)是，恒流泵、金屬容器、取液槽三者之間通過管道連接構(gòu)成細(xì)胞液半封閉的循環(huán)系統(tǒng)，在細(xì)胞液循環(huán)過程中通過攪拌器可同步實(shí)現(xiàn)對金屬容器內(nèi)細(xì)胞液的自動攪拌，防止細(xì)胞的聚集，使細(xì)胞液混合更加均勻；并且通過取液槽取液，防止交叉污染，取液快速、方便。

附圖說明

圖1為本發(fā)明結(jié)構(gòu)示意圖。圖中：1、恒流泵；2、主動輪；3、取液槽；4、槽蓋；5、閥門；6、上彎管；7、加液孔(帶蓋)；8、箍；9、金屬容器；10、下彎管；11、攪拌葉片；12、導(dǎo)液管；13、從動輪；14、綜合固定架。

具體實(shí)施方式

如圖1所示，一種用于MTT比色實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞混勻裝置，包括一個金屬容器9、一個恒流泵1；一個綜合固定架14、一個設(shè)有進(jìn)、出液口的取液槽3。恒流泵1、金屬容器9和取液槽3三者之間通過管道連接構(gòu)成細(xì)胞液循環(huán)系統(tǒng)。

金屬容器9為耐氧化、耐腐蝕的圓柱形容器，其圓周上設(shè)有兩個箍8，用于將其固定在綜合固定架14內(nèi)。金屬容器9底部設(shè)有一個L形金屬下彎管10，管口伸出容器底部1cm，連接導(dǎo)液管12，導(dǎo)液管12通過恒流泵1后與取液槽3的進(jìn)液口相連接。金屬容器9頂部設(shè)有一個可拆卸的端蓋，端蓋中央鑲嵌一個轉(zhuǎn)子伸入容器內(nèi)，轉(zhuǎn)子上端帶有一個從動輪13，下端帶有攪拌葉片11，攪拌葉片距容器底部為0.5cm，在容器端蓋上距離端蓋中心大于從動輪半徑處設(shè)有一加液孔7，加液孔7上設(shè)有孔蓋。端蓋直徑方向相對加液孔7的位置鑲嵌有一上彎管6，經(jīng)軟管與取液槽3的出液口相連接。下彎管10、上彎管6上可設(shè)置閥門5用于對進(jìn)出金屬容器的細(xì)胞液體進(jìn)行流量控制。

取液槽3為一個耐氧化、耐腐蝕的V型金屬槽，其進(jìn)液口位于V型金屬槽長度方向一端的上部，出液口位于V型金屬槽長度方向另一端下部，取液槽3采用V型結(jié)構(gòu)可使流經(jīng)槽內(nèi)的液體容積小、液面高，有利于混勻細(xì)胞液的吸??；取液槽上可設(shè)有槽蓋4，在不進(jìn)行取液操作時(shí)可將取液槽的槽口蓋住，防止槽內(nèi)液體的污染。

恒流泵1中心軸設(shè)有上下兩個主動輪，下方主動輪帶動恒流泵完成恒流功能。上方的主動輪2通過皮帶傳動帶動金屬容器端蓋上的從動輪13驅(qū)動轉(zhuǎn)子完成金屬容器9中細(xì)胞液的混勻過程。