[發明專利]餌料用高SOD活性海洋酵母的篩選方法

無效

• 申請號: 201110093079.3
• 申請日: 2011-04-01
• 公開（公告）號: CN102220250A
• 公開（公告）日: 2011-10-19
• 發明（設計）人: 關洪斌;王曉蘭;王洛洋;紀政;胡宗仁;王璐思
• 申請（專利權）人: 山東大學威海分校
• 主分類號: C12N1/16
• 分類號: C12N1/16;A23K1/16;C12R1/645
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.本發明涉及餌料用高SOD活性海洋酵母的篩選，其特征在于其篩選的方法包括以下過程：

步驟(一)：菌種：自己分離或向菌種保臧單位及生物技術公司等索要或采購；

步驟(二)：培養基：葡萄糖20g，蛋白胨10g，酵母膏5g，瓊脂20g，鏈霉素300U/mL，陳海水1000ml。調PH值4.5-5.0，高壓滅菌20min。冷卻至室溫制成固體培養基；

步驟(三)：菌種活化和篩選：將海洋紅酵母菌接種于培養基上，20℃培養。挑取菌種于斜面上28℃活化三代后(每代24h)，挑取兩環培養物接種于裝有40mL液體培養基的150mL錐形瓶中，28℃搖床擴培24h；

步驟(四)：將擴培后活化菌種以10％接種量接種至百草枯濃度為0.25mmol/L的裝有40mL液體培養基的150mL錐形瓶中。28℃、150r/min搖床培養3d；

步驟(五)：重復步驟四將培養集中百草枯濃度由0.25mmol/L依次提高至0.3、0.35、0.4，0.45mmol/L，呂氏美藍染色進行死活鑒定，最終經涂布分離得單菌株；

步驟(六)：菌種保藏：將分離得到的單菌落劃線接種至固體斜面培養，分別編號后，-20℃冰箱保臧；

2.根據權利要求1所述的步驟，其特征是：通過在培養基中添加百草枯并逐級提高百草枯濃度的方法以淘汰大部分的抗氧化能力較低的海洋紅酵母菌株從而篩選出SOD活性較高的菌株，最終實現快速高效地定向篩選獲得高SOD活性的洋紅酵母以作為鉺料用于養殖業的目的。

3.根據權利要求1所述的步驟，其特征是通過外加百草枯脅迫以定向篩選高SOD活性的海洋紅酵母菌株。