[發明專利]檢測硫醇的方法和試劑盒無效
| 申請號: | 201110008841.3 | 申請日: | 2011-01-11 |
| 公開(公告)號: | CN102183471A | 公開(公告)日: | 2011-09-14 |
| 發明(設計)人: | 霍方俊;陰彩霞;孫遠強;張建剛 | 申請(專利權)人: | 山西大學 |
| 主分類號: | G01N21/27 | 分類號: | G01N21/27;G01N21/29 |
| 代理公司: | 山西五維專利事務所(有限公司) 14105 | 代理人: | 楊耀田 |
| 地址: | 030006 山*** | 國省代碼: | 山西;14 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 檢測 硫醇 方法 試劑盒 | ||
1.一種檢測硫醇的方法,其特征在于,包括如下步驟:
(1)、配制pH=7.0-10.0、濃度為1-100mM的HEPES緩沖溶液,配制濃度為2mM的NPC乙醇溶液;
所述的NPC代表7-nitro-2,3-dihydro-1H-cyclopenta[b]chromen-1-one;
(2)、把2ml的HEPES緩沖溶液和25μl的NPC乙醇溶液加到干凈的紫外比色皿中,在紫外可見分光光度儀上檢測,隨著待測樣的加入,最大吸收峰由292nm逐漸變為405nm,當405nm吸收峰達到最大值時,停止加待測樣,此時加入待測樣的體積計為V待測樣μl;
(4)、按25×2×10-3/V待測樣計算出待測樣中硫醇的含量。
2.一種檢測硫醇的方法,其特征在于,包括如下步驟:
(1)、配制pH=7.0、濃度為10mM的HEPES緩沖溶液,標記為R1,配制濃度為2mM的NPC乙醇溶液,標記為R2;
(2)、按照R1、R2體積比為100∶1,加入比色管中,此時溶液為無色;
(3)、取R2體積1/5的待測樣,用進樣器加到上述比色管中,搖振20-30s后,與標準色階進行對照,得出待測樣中硫醇濃度;
所述的標準色階,即從左到右的顏色依次為:無色、淡黃色、淺黃色、黃色、亮黃色、深黃,代表相應的硫醇濃度為:0、15、30、50、80、100μM。
3.一種檢測硫醇的試劑盒,其特征在于,包括試劑瓶1、試劑瓶2、比色管、標準色階;
所述的試劑瓶1裝有100mL濃度為10mM的HEPES緩沖溶液,標記為試劑R1;
所述的試劑瓶2裝有5mL濃度為2mM的NPC乙醇溶液,標記為試劑R2;
所述的標準的色階從左到右的顏色依次為:無色、淡黃色、淺黃色、黃色、亮黃色、深黃,代表相應的硫醇濃度依次為:0、15、30、50、80、100μM。
4.如權利要求1或2所述的檢測硫醇的方法,其特征在于,所述的HEPES緩沖溶液用醋酸-醋酸鈉緩沖溶液、Tris-HCl、檸檬酸、磷酸緩沖溶液代替。
5.如權利要求1或2所述的檢測硫醇的方法,其特征在于,所述的硫醇為半光氨酸、同型半胱氨酸或谷胱甘肽。
6.如權利要求3所述的檢測硫醇的試劑盒,其特征在于,所述的HEPES緩沖溶液用醋酸-醋酸鈉緩沖溶液、Tris-HCl、檸檬酸、磷酸緩沖溶液代替。
7.如權利要求3所述的檢測硫醇的試劑盒,其特征在于,所述的硫醇為半光氨酸、同型半胱氨酸或谷胱甘肽。
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