[發明專利]新的潛在抑癌基因CMTM7及其編碼蛋白的新應用

無效

• 申請號: 201110003808.1
• 申請日: 2011-01-10
• 公開（公告）號: CN102580114A
• 公開（公告）日: 2012-07-18
• 發明（設計）人: 韓文玲;馬大龍;李荷楠;郭曉歡;莫小寧;張穎妹;蘇玉;劉凱
• 申請（專利權）人: 北京大學
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;A61K38/19;C12Q1/68;G01N33/574;A61P35/00;A61P35/04
• 代理公司: 北京三友知識產權代理有限公司 11127
• 代理人: 韓蕾

技術領域

本發明涉及一個新的潛在抑癌基因及其編碼蛋白的新應用，具體地說，本發明涉及CMTM7作為一個新的潛在抑癌基因及其編碼蛋白的應用。

背景技術

CMTM(CKLF-like?MARVEL?transmembrane?domain-containing?family)，原名CKLFSF(chemokine-like?factor?super?family)基因家族包括9個成員，即CKLF(Chemokine-likefactor，趨化素樣因子)和CMTM1-8(CKLF-like?MARVEL?transmembrane?domain-containingmember?1-8)(原名CKLFSF1-8)。該家族是本發明人在國際上首次報道的一個新基因家族并申請了專利(中國專利申請號：02122266.5)。其編碼產物的結構和功能特點介于經典的趨化因子(Chemokine)和四次跨膜蛋白家族(Transmembrane?4?Super?Family，TM4SF)之間，在免疫、男性生殖等系統發揮重要作用，并參與腫瘤的發生和發展。

在CMTM家族成員中，人類CMTM7基因定位于第3號染色體3p22.3，有2個可變剪切體：CMTM7-v1和CMTM7-v2，其中CMTM7-v1是主要表達形式。CMTM7進化保守，在人體正常組織中廣泛表達，尤其在免疫細胞中表達水平較高。目前，CMTM7的具體功能尚不清楚。

發明內容

本發明的一個目的在于研究CMTM7在腫瘤中的表達特點，研究CMTM7的新功能，提供CMTM7的新應用。

CMTM7有2個可變剪切體：CMTM7-v1和CMTM7-v2，其中CMTM7-v1是主要表達形式。在本發明中，所述CMTM7的核酸和蛋白質包括CMTM7-v1、CMTM7-v2兩種形式。所述的CMTM7-v1和CMTM7-v2在GenBank的登記號分別為NM?138410和NM?181472。所述CMTM7蛋白為CMTM7基因所編碼的蛋白。CMTM7定位于3p22.3，該區域在多種腫瘤中存在缺失；另外，CMTM7具有一個典型的CpG島。

本發明研究了CMTM7在人多種正常組織以及在腫瘤組織中的表達特點，發現CMTM7在食管癌、乳腺癌、宮頸癌等部分腫瘤來源的細胞系中表達下調或缺失，在大部分表達下調或缺失的細胞系中其啟動子區CpG島存在甲基化修飾，而去甲基化藥物5-氮-2-脫氧胞苷(5-AZA-CdR)或聯合曲古抑菌素A(trichostatin?A)可恢復CMTM7的表達，證明其表達沉默與CpG島的甲基化密切相關。更為重要的是，CMTM7在原發食管癌組織中也有較高頻率的甲基化。

本發明的實驗研究發現，在食管癌、乳腺癌、宮頸癌等來源的部分細胞系中，CMTM7表達下調或缺失，但其啟動子區沒有甲基化修飾，這提示除了啟動子甲基化，其他因素也可能導致CMTM7表達下調或缺失。在原發食管癌組織中，分析發現在CMTM7所在染色體位點存在較高頻率的雜合性缺失。

本發明還進一步進行免疫組化實驗，初步結果提示CMTM7在食管癌、胃癌、肝癌和胰腺癌組織中表達下調。

本發明還通過實驗證實在CMTM7表達下調或缺失的食管癌細胞系(KYSE410，KYSE180)、乳腺癌細胞系(MDA-MB-231)或宮頸癌細胞系(HeLa)中恢復CMTM7的表達，可抑制細胞增殖和細胞遷移。另外，在食管癌細胞系中恢復CMTM7的表達，可誘導細胞發生G1期阻滯。

因此，CMTM7可能是一個新的潛在抑癌基因，可能作為癌癥的臨床診斷和/或預后判斷的輔助指標，另外CMTM7腺病毒或蛋白在治療和/或抑制腫瘤中具有重要應用價值。

根據本發明的實驗研究發現，本發明提供了CMTM7基因或其編碼的蛋白在制備治療癌癥的藥物中的應用。具體的，所述癌癥為食管癌、鼻咽癌、乳腺癌、宮頸癌、肝癌或胰腺癌。

本發明還提供了CMTM7基因或其編碼的蛋白在抑制腫瘤細胞的生長和/或細胞遷移中的應用。本發明通過實驗證實，CMTM7基因或其編碼的蛋白能夠抑制腫瘤細胞的生長和增殖，并能抑制細胞遷移。具體的，所述腫瘤細胞為食管癌細胞、乳腺癌細胞或宮頸癌細胞。在本發明的一具體實施方案中，所述細胞遷移為EGF誘導的細胞遷移。

本發明還提供了CMTM7基因或其編碼的蛋白在抑制腫瘤細胞的成瘤性中的應用。