[實用新型]雌二醇、雌三醇和己烯雌酚三聯(lián)檢測卡

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201020612944.1
• 申請日: 2010-11-18
• 公開（公告）號: CN201876459U
• 公開（公告）日: 2011-06-22
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 周堅;熊曉芳;吳文曄
• 申請（專利權(quán)）人: 無錫安迪生物工程有限公司
• 主分類號: G01N33/74
• 分類號: G01N33/74;G01N33/558;G01N1/28
• 代理公司: 無錫市大為專利商標(biāo)事務(wù)所 32104
• 代理人: 時旭丹;劉品超

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種檢測雌激素類獸藥的器具，特別是涉及一種雌二醇、雌三醇和己烯雌酚三聯(lián)檢測卡及其檢測樣品的處理方法，屬于雌激素類獸藥殘留檢測技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

人類對動物內(nèi)分泌干擾物所造成的環(huán)境污染和危害的普遍認(rèn)知和系統(tǒng)研究還不到十年的歷史，但越來越多的研究表明，具有內(nèi)分泌干擾性的污染物不斷富集所造成的污染正通過各種途徑給人類和野生動物帶來危害，且其已在世界范圍內(nèi)的自然水體，城市污水處理系統(tǒng)及供水系統(tǒng)中被廣泛檢出。

其中尤以雌性激素污染更為嚴(yán)重，目前應(yīng)用最廣的主要有天然激素中的雌二醇、雌三醇及人工合成的己烯雌酚。

雌二醇是天然雌激素的主要成分，因其可以促進(jìn)動物生長和提高畜禽瘦肉比，而在畜牧業(yè)中有應(yīng)用。它可在動物體內(nèi)殘留，通過食物鏈危害人體健康，使女性兒童提前發(fā)育，男性兒童乳腺組織發(fā)育女性化，男性生殖系統(tǒng)異常化，引起病變，并導(dǎo)致女性乳腺癌和子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生率上升，且存在明顯致癌性，歐美等發(fā)達(dá)國家相繼禁止使用雌二醇作為飼料添加劑。

雌三醇是廣泛存在于人和動物體內(nèi)的一種類固醇激素，在檢測食品特別是動物食品中這種激素的含量，保障食品衛(wèi)生與人類健康方面有重要的意義和作用。

己烯雌酚是第一個口服有活性的人工合成雌激素。但由于其具有促進(jìn)動物生長，增加蛋白質(zhì)沉積和提高飼料轉(zhuǎn)化率的作用，也被作為促生長劑，廣泛應(yīng)用于畜牧養(yǎng)殖業(yè)。己烯雌酚殘留會使正常人的生理功能發(fā)生紊亂，更嚴(yán)重的是影響兒童正常的生長發(fā)育。近期研究發(fā)現(xiàn)，己烯雌酚能引發(fā)動物和人的癌癥和致畸毒性，且妊娠期間使用還會引起后代生殖系統(tǒng)疾病。因此，世界許多國家禁止在飼料中使用己烯雌酚來促進(jìn)動物生長。

這三類激素大都可以促進(jìn)少女早熟，因此，對食品中尤其是對畜禽產(chǎn)品進(jìn)行這幾類雌激素檢測是很有必要的。

目前，現(xiàn)有技術(shù)對于這三類雌激素類飼料添加劑的檢測主要依賴化學(xué)儀器分析、放射免疫檢測試劑盒及酶免疫檢測試劑盒，這些方法操作過程繁瑣、時間長，操作人員須具有一定的專業(yè)技術(shù)知識才能操作，因此應(yīng)用范圍受限。也有單獨檢測雌二醇、雌三醇及己烯雌酚的檢測試紙條，但到目前為止，沒有同時檢測這三種物質(zhì)的檢測器具。

發(fā)明內(nèi)容

本實用新型的目的在于提供一種操作簡便快捷、成本低、攜帶方便、非專業(yè)人員也能操作及可進(jìn)行現(xiàn)場檢測的膠體金試紙，且能同時檢測三類雌性激素，克服現(xiàn)有技術(shù)操作繁瑣、專業(yè)要求高及只能逐一單項檢測的缺陷。

本實用新型的技術(shù)方案：一種雌二醇、雌三醇和己烯雌酚三聯(lián)檢測卡：它在長條扁平薄殼狀的檢測卡外殼1中設(shè)置測試條2，檢測卡外殼表面有檢測窗孔3和加樣孔4，測試條2是由支承背板5上通過不干膠在其上依次粘貼樣品墊8、含抗雌二醇抗體膠體金標(biāo)記物的玻璃纖維膜11、含抗雌三醇抗體膠體金標(biāo)記物的玻璃纖維膜10、含抗己烯雌酚抗體膠體金標(biāo)記物的玻璃纖維膜7、硝酸纖維素膜6和吸水膜9所組成；支承背板中部疊置粘貼硝酸纖維素膜6，支承背板一端疊置粘貼吸水膜9，另一端疊置粘貼樣品墊8，吸水膜內(nèi)端與樣品墊內(nèi)端各自分別與硝酸纖維素膜搭接，在樣品墊與硝酸纖維素膜的搭接部，兩者之間夾置粘貼粘貼三段膠體金膜11、10、7；膠體金膜11、10、7依次是含抗雌二醇抗體膠體金標(biāo)記物的玻璃纖維膜、抗雌三醇抗體膠體金標(biāo)記物的玻璃纖維膜、及抗己烯雌酚抗體膠體金標(biāo)記物的玻璃纖維膜，硝酸纖維素膜上有三條檢測帶和一條質(zhì)控帶，依次是：含雌二醇蛋白質(zhì)偶聯(lián)物檢測帶12，含雌三醇蛋白質(zhì)偶聯(lián)物檢測帶13，含己烯雌酚蛋白質(zhì)偶聯(lián)物檢測帶14，質(zhì)控帶15，質(zhì)控帶為抗兔抗體或抗鼠抗體，測試條置入檢測卡外殼內(nèi)，樣品墊正對加樣孔，硝酸纖維素膜正對檢測窗孔。

所述的雌二醇、雌三醇和己烯雌酚三聯(lián)檢測卡檢測樣品的處理方法，檢測樣品為尿液樣品、飼料樣品或動物組織、肉、肝臟樣品，對于各種不同的檢測樣品有不同的處理方法；

尿液樣品的處理方法：尿液直接用作檢測樣品，渾濁狀態(tài)的尿液用濾紙過濾，取清亮上清液作測試樣品樣品，澄清的尿液直接作測試樣品；測試樣品滴入加樣孔后用于檢測。

飼料樣品的處理方法：稱取0.5克飼料樣品，加入1mL樣品抽提液，在試管中攪拌1分鐘，靜置10分鐘后，取清亮上清液作測試樣品滴入加樣孔后用于檢測。

動物組織、肉、肝臟樣品的處理方法：取1g剪碎或勻漿過的動物組織、肉、肝臟樣品，加入含1mL樣品抽提液的試管中，扭緊管蓋，振搖樣品1分鐘后，經(jīng)100℃水浴加熱5分鐘，冷卻至室溫，取清亮的中間部分作測試樣品滴入加樣孔后用于檢測。

所述樣品抽提液為pH?7.0、濃度50mmol/L?Tris-HCL緩沖液。