[發明專利]一種輔酶Q10工業化生產方法

無效

• 申請號: 201010601223.5
• 申請日: 2010-12-23
• 公開（公告）號: CN102168115A
• 公開（公告）日: 2011-08-31
• 發明（設計）人: 吳軼;陳必欽;詹光煌;朱友跑
• 申請（專利權）人: 內蒙古金達威藥業有限公司;廈門金達威集團股份有限公司
• 主分類號: C12P7/66
• 分類號: C12P7/66;C12R1/01
• 代理公司: 呼和浩特北方科力專利代理有限公司 15100
• 代理人: 王社

1.一種輔酶Q10工業化生產方法，其特征在于包括如下步驟：

突變株Rhodobacter?sphaeroides?Nr-F?17經斜面傳代及母瓶培養后按2～5‰接種量接入已滅菌的一級種子罐中培養，控制攪拌轉速250～500rpm、空氣流量20～80m³/h、罐溫28～32℃、罐壓0.02～0.05Mpa，培養時間30～60h；

將培養好的一級種子液按5～15％接種量移入已滅菌的二級種子罐中培養，控制攪拌轉速100～200rpm、空氣流量100～300m³/h、罐溫28～32℃、罐壓0.02～0.05Mpa，培養時間10～20h，一級、二級種子罐培養基配方為：葡萄糖3～10g，酵母粉1～5g，硫酸銨2～6g，味精0.5～2g，玉米漿粉0.3～2g，硫酸鎂1～4g，磷酸二氫鉀0.3～2g，氯化鈉1～4g，硫酸亞鐵0.2～1g，硫酸錳0.03～0.1g，硫酸鋅0.001～0.01g，輕質碳酸鈣5～10g，水1000ml，pH?6.5～7.0，121℃下滅菌25min；母瓶及一級、二級種子罐接種前均按配料體積的2～5％移入已滅菌的關鍵促進因子至培養基中；

在無菌條件下，將培養好的二級種子液按10～20％接種量移入發酵罐，發酵基礎料配方為：葡萄糖10～20g，硫酸銨3～10g，味精2～8g，玉米漿粉4～9g，硫酸鎂5～10g，磷酸二氫鉀0.1～0.5g，氯化鈉1～5g，硫酸亞鐵1～3g，硫酸錳0.1～0.4g，氯化鈷0.005～0.01g，水1000ml，pH?6.5～7.0，121℃下滅菌25min；

控制攪拌轉速80～130rpm、空氣流量1000～2500m³/h、罐溫30～35℃、罐壓0.03～0.06Mpa，當溶氧值急劇上升時開始流加葡萄糖，保持培養過程中5％的溶解氧，在發酵對數期，通過提高攪拌速度、空氣流量及葡萄糖的流加速率，使菌體終濃度達90g/L以上，總培養時間為70～100h，發酵至30～60h，采用逐步增加流速的方法補加營養源料，補料體積為發酵液體積的3～8％，發酵過程流加磷酸二氫鉀溶液，發酵前期和中后期分別控制溶磷水平在0.14～0.18g/L和0.08～0.12g/L，補入氨水調節發酵液pH值在6.5～7.0之間，氨基氮含量控制在0.8～1.5g/L，當菌體染色變淺，部分菌絲自溶，效價增長緩慢時，終止發酵；

上述關鍵促進因子的優選組合為：茄尼醇0.3～0.8g，β-胡蘿卜素0.2～1g，L-酪氨酸0.2～1g，L-苯丙氨酸0.2～0.9g，麥角固醇0.15～0.3g，硫胺素15～25g，核黃素15～25g，泛酸鈣1～5g，煙酸10～20g，水1000ml，121℃下滅菌20min；

上述營養源料配方為：3倍濃縮的發酵基礎料，并含3～7％(v/v)的關鍵促進因子，121℃下滅菌25min。