[發明專利]一種山羊雄性生殖干細胞的體外分離及培養方法

無效

• 申請號: 201010600520.8
• 申請日: 2009-09-04
• 公開（公告）號: CN102154195A
• 公開（公告）日: 2011-08-17
• 發明（設計）人: 華進聯;朱海鯨
• 申請（專利權）人: 西北農林科技大學
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責任公司 61200
• 代理人: 陸萬壽

技術領域

本發明屬于生物技術領域，涉及動物干細胞的體外增殖、分化、分離，特別涉及一種山羊雄性生殖干細胞的體外分離及培養方法。

背景技術

生殖細胞的發生、增殖、分化的研究是生命科學研究的重要課題之一。在動物繁殖育種中，高產、優質的遺傳資源完全依賴于生殖細胞來完成遺傳；在人類，由于精子細胞的發生、成熟障礙等引起的不育癥更是困擾眾多患者的一個現實問題；在基礎研究中，精子更是發育生物學研究的最重要研究對象之一；因此生殖細胞的發生、分化的研究，在畜牧業生產和生物醫學研究中具有重要的意義。然而高等哺乳動物生殖細胞的發生、轉移、分化完全在體內完成，因此很難動態實時地檢測和研究其中的分子事件(Hua等，Recent?advances?in?the?derivation?of?germ?cells?from?the?embryonic?stem?cells.Stem?Cells?and?Development，2008，17：399-411)。

干細胞是一類具有自我更新、高度增殖和多向分化潛能的細胞群體。胚胎干細胞(ES細胞或ESCs)是由早期胚胎內細胞團(ICM)或原始生殖細胞(PGCs)分離而來的多能干細胞。由于胚胎干細胞的獨特生物學特性，使干細胞在細胞替代治療、組織器官修復與重建、基因治療以及發育生物學模型、新藥開發和毒理實驗等，幾乎所有的生命科學和生物醫藥領域均具有重要的意義。

近年來，一些著名的研究(Sesndel等，Generation?of?functional?multipotent?adult?stem?cells?from?GPR125⁺?germline?progenitors.Nature；2007，449：346-350；Bukovsky等，Generation?of?pluripotent?stem?cells?from?adult?human?testis.Nature，456，344-349)發現從胚胎期動物生殖嵴的原始生殖細胞或雄性的睪丸可以得到類似于ES細胞的多能性分化潛能的雄性生殖干細胞(mGSCs)。一般認為，這些雄性生殖干細胞(mGSCs)來源于原始生殖細胞(primordial?germ?cells，PGCs)，終生存在于性分化后的睪丸中，包括性分化后到精子發生過程中，具有自我增殖和分化潛能的細胞總稱；不同于精原干細胞(SSCs)，mGSCs可以分化為機體所有的類型細胞，精原干細胞指未分化的A型精原細胞，一般認為其只有向精子分化的潛能(Ko等，2009)。但也有人認為目前生殖干細胞的起源并不清楚(Yu等，Pluripotent?stem?cell?lines.Genes?&?Dev，2008，22：1987-1997)。