[發(fā)明專利]一種生殖系統(tǒng)疾病檢測試劑盒

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202011484780.3
• 申請日: 2020-12-15
• 公開（公告）號: CN112710835B
• 公開（公告）日: 2021-09-28
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王陽;金鑫
• 申請（專利權(quán)）人: 廣東創(chuàng)晟控股集團有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/574;G01N33/543;G01N33/535;C07K16/30
• 代理公司: 廣州海藻專利代理事務(wù)所(普通合伙) 44386
• 代理人: 張大保

本發(fā)明涉及一種生殖系統(tǒng)疾病檢測試劑盒,屬于診斷試劑和醫(yī)療器械領(lǐng)域。所述試劑盒包含特異性識別f?PSA的單克隆抗體，其擁有更高的靈敏度，用于PSA異常的前列腺疾病的早期篩查診斷、療效檢測和預(yù)后判斷。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種生殖系統(tǒng)疾病檢測試劑盒,屬于診斷試劑和醫(yī)療器械領(lǐng)域。

背景技術(shù)

前列腺特異性抗原(PSA)是前列腺上皮細胞分泌的一種絲氨酸蛋白酶,是一種糖蛋白,分子量34000,等電點6.9,具有液化精液和提高精子活力的作用。一般存在于精液中,主要是精漿中,在血液中的含量極其微少,正常血清中含量小于4ng/ml,只有在前列腺組織發(fā)生炎癥或是癌變時候,血清中的PSA才會升高。大多數(shù)的分子都隨精液一起排出。由于PSA只具有組織特異性而不具有腫瘤特異性,所以一般用來作為檢驗前列腺發(fā)生病變的標志。

在血清中,大多數(shù)的PSA分子都是以結(jié)合態(tài)存在,只有少量的游離PSA分子。90％-95％的PSA與α-1-抗糜蛋白酶形成穩(wěn)定的共價結(jié)構(gòu)PSA-ACT,而且它們構(gòu)成了免疫檢測PSA復(fù)合物的絕大多數(shù)(≥98％),還有很少量的PSA與絲氨酸蛋白酶抑制劑結(jié)合PSA-AT,與蛋白C抑制劑結(jié)合的PSA-PCI；占據(jù)血液中5％-15％的游離前列腺特異性抗原(f-PSA),在血液中大量抗蛋白酶的作用下很不穩(wěn)定,易失活。

前列腺癌已經(jīng)逐漸成為男性死亡的惡性腫瘤之一,PSA是一種中老年疾病,作為腫瘤標志物,它的測定對于前列腺癌的診斷具有十分重要的意義。當前列腺發(fā)生炎癥時,血清中的含量也會隨之發(fā)生變化。一般來說,正常的t-PSA變化范圍是0-4ng/ml,隨著年齡的增長,血清中可檢測到的t-PSA含量是逐漸升高的。當t-PSA含量大于10ng/ml時,患有前列腺癌的風(fēng)險是很高的。當t-PSA處于4-10ng/ml這個灰色診斷區(qū)域時,由于特異性不強,對于前列腺癌,前列腺增生,前列腺炎的區(qū)別很難界定,所以一般采用f-PSA/t-PSA的比值作為臨床指標來區(qū)分前列腺癌和前列腺增生。

目前PSA的檢測方法目前全部采用免疫學(xué)方法，由于檢測到t-PSA值后還要檢測f-PSA和/或PSA-ACT的量，以計算f-PSA/t-PSA比值來綜合判斷是癌變還是增生，因此在低濃度范圍內(nèi)檢測的精度對于臨床非常重要，但是現(xiàn)有技術(shù)能夠檢測的范圍和精度比較差，嚴重制約了臨床應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容

基于上述發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的首要目的在于提供一種新的f-PSA抗體，具有更高的靈敏度同時不與PSA-ACT和AFP、ACE交叉反應(yīng)，以解決現(xiàn)有f-PSA抗體靈敏度低的問題。

本發(fā)明提供以下技術(shù)方案：

一種抗f-PSA單克隆抗體，由重鏈和輕鏈組成，重鏈和輕鏈分別包括可變區(qū)和恒定區(qū)，其中重鏈可變區(qū)選自SEQ ID NO:1，輕鏈可變區(qū)選自SEQ ID NO:2。

本發(fā)明抗f-PSA單克隆抗體重輕鏈可變區(qū)共有6個互補決定區(qū)。所述抗f-PSA單克隆抗體的重鏈可變區(qū)3個CDR序列分別為SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5；輕鏈可變區(qū)3個CDR序列分別為SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8。

本發(fā)明所述抗f-PSA單克隆抗體的重鏈和輕鏈進一步包含恒定區(qū)，所述抗體輕鏈恒定區(qū)進一步包含鼠源κ、λ鏈序列。所述抗體重鏈恒定區(qū)進一步包含鼠源IgG1、IgG2a、IgG2b或IgG3或IgA或IgM序列。

本發(fā)明的目的在于提供一種新的抗f-PSA單克隆抗體，所述抗體均不與PSA-ACT和AFP、ACE交叉反應(yīng)，用于檢測樣本中f-PSA蛋白存在及含量的抗體。

本發(fā)明的又一目的在于提供一種更靈敏的f-PSA定量檢測試劑盒、其制備方法及應(yīng)用。所述試劑盒包含上述識別f-PSA的抗體，用于PSA異常的前列腺疾病的早期篩查診斷、療效檢測和預(yù)后判斷。