[發明專利]水產品中氨芐青霉素和阿莫西林殘留量的高效液相色譜熒光檢測法

無效

• 申請號: 201010516301.1
• 申請日: 2010-10-22
• 公開（公告）號: CN101980012A
• 公開（公告）日: 2011-02-23
• 發明（設計）人: 王萍亞;周勇;黃鸝;薛超波;許鎮堅
• 申請（專利權）人: 舟山市質量技術監督檢測院
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/06
• 代理公司: 舟山固浚專利事務所 33106
• 代理人: 周震海

1.?水產品中氨芐青霉素和阿莫西林殘留量的高效液相色譜熒光檢測法，其特征在于按下列步驟操作：

（1）.制備標準液???購買氨芐青霉素標準品，含氨芐青霉素(C₁₆H₁₈N₃NaO₄S)不少于96.5%；阿莫西林標準品,含阿莫西林(C₁₆H₁₉N₃O₅S)不少于98.5%;

制備混合標準儲備溶液：準確稱取氨芐青霉素10.0mg、阿莫西林10.0mg加水溶解并稀釋至濃度均為1.0mg/ml的儲備液,本溶液于0℃～4℃保存，一周內有效;

?制備混合標準中間溶液：準確移取混合標準儲備溶液100μL，用水定容至100mL，配成每升含氨芐青霉素1.0mg、阿莫西林1.0mg的混合標準中間溶液;

?制備混合標準工作溶液：以混合標準中間溶液配制氨芐青霉素標準使用濃度系列：0.1、1.0、5.0、20.0、50.0μg/L；以混合標準中間溶液配制阿莫西林標準使用濃度系列：1.0、5.0、20.0、50.0、100.0μg/L。此標準工作液臨用時現配;

???（2）.抽樣???本發明提供的檢測方法，從原始樣品中任意抽取樣品，經高速組織搗碎機搗碎。

四分法縮分出不少于500g樣品，混勻，均分成兩份。裝入清潔容器，加封，標明標記。-18℃以下冷凍保存；

（3）.提取???稱取5g樣品（精確至0.01g）置于50mL聚丙烯離心管中，加入1.68g磷酸二氫鈉，加適量水溶解，定容至500mL制備成提取液30mL，以10000r/min均質3min，再于室溫下以3000?r/min離心10min，上清液移入離心管中，殘留物用20mL提取液同上法均質、離心所得二次上清液，合并二次上清液于離心管中，加入濃度為750?mg/ml三氯乙酸0.5mL，振搖5min，3000?r/min離心10min，上清液做備用液；

（4）.凈化???固相萃取小柱預先依次用5mL甲醇、5mL蒸餾水、加入濃度為200?mg/ml三氯乙酸5mL潤洗，將備用液過柱，控制速度在20滴/min，依次用濃度為200?mg/ml三氯乙酸5mL和蒸餾水洗滌，真空抽干，再用5mL乙腈洗脫，真空抽干,收集洗脫液于離心管中；

（5）.衍生???洗脫液在40℃下氮氣吹干，加0.5mL水溶解或準確量取0.5mL的標準工作液加入濃度為200?mg/ml三氯乙酸0.1mL和7%甲醛溶液0.1mL,旋渦混勻20s，密封，置于沸水浴中加熱30?min。取出,冷卻至室溫,用20%乙腈水溶液定容至1mL；

（6）.過濾???經0.45μm微孔濾膜過濾，供液相色譜測定。