[發(fā)明專利]一種用于植物激素前處理的分散液液微萃取法

有效

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• 申請日: 2010-01-18
• 公開（公告）號: CN101762417A
• 公開（公告）日: 2010-06-30
• 發(fā)明（設計）人: 張?zhí)m;盧巧梅;陳麗惠;陳國南
• 申請（專利權）人: 福州大學
• 主分類號: G01N1/34
• 分類號: G01N1/34;G01N1/40;G01N30/74
• 代理公司: 福州元創(chuàng)專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

技術領域

本發(fā)明屬于分析化學領域，更具體涉及一種用于植物激素前處理的分散液液微萃取方法。

背景技術

植物激素是指一些在植物體內合成，對生長發(fā)育能產生顯著作用的微量有機物。生長素(Auxin)是最早發(fā)現(xiàn)的一種植物激素，能調控植物體的伸長生長、頂端優(yōu)勢、果實發(fā)育等多種生理過程。建立植物生長素的靈敏、快速、準確的分析方法，對于闡明生長素在植物生長過程中的作用和功能是非常重要的。然而，植物體內激素含量低(通常在0.1-50ng/g鮮重范圍內)，并存在許多植物激素類似物和次級代謝物，給植物激素的鑒別和定量帶來困難。因此，尋找有效、快速的前處理方法一直是植物激素檢測的瓶頸和研究熱點。

植物激素檢測的前處理，目前多采用傳統(tǒng)的液液萃取(liquid-liquid?extraction，LLE)法和固相萃取(solid-phase?extraction，SPE)法。其中，LLE法操作繁瑣、耗時、使用大量高毒有機溶劑，成本高，回收率較低，且不易實現(xiàn)自動化。SPE技術以高效、可靠以及溶劑用量少等優(yōu)勢逐漸取代了經典的LLE技術，成為植物激素分析的主流前處理方法。然而，SPE仍存在商品柱價格昂貴，過柱時間長等不足。2007年，固相微萃取法(solid-phase?microextraction，SPME)首次被用于植物激素的預處理，此方法集采樣、萃取、濃縮于一體，具有簡單、快速、環(huán)境友好等特點，但SPME存在萃取頭昂貴，使用壽命短，易交叉污染等局限性。因此，發(fā)展高效、穩(wěn)定、低成本且環(huán)境友好的樣品前處理新技術仍是亟待解決的問題。

分散液液微萃取(Dispersive?Liquid-liquid?Microextraction，DLLME)于2006年首次提出，是一種新型的樣品預處理技術。DLLME結合了LLE和SPME的特點，所需有機溶劑少，操作單快速，集萃取、純化、濃縮于一體，回收率高，富集效果好。目前，DLLME已能與多種儀器如氣相色譜、氣相色譜-質譜、液相色譜、液相色譜-質譜、原子吸收光譜等聯(lián)用，成功用于水樣、土壤、尿樣和水果中不同物質的測定，分析對象涉及農藥殘留、臨床藥物、痕量金屬等。將DLLME用于植物激素的前處理，具有富集能力高，操作簡單，有機溶劑用量少和萃取時間短等優(yōu)點，是一種簡單可靠、環(huán)境友好的樣品預處理技術。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的是提供一種植物激素的前處理新方法，用于凈化和富集樣品，該方法富集能力高，操作簡單，有機溶劑用量少和萃取時間短。

本發(fā)明用于植物激素前處理的分散液液微萃取方法，處理步驟包括：

1)首先在10mL帶塞的尖底離心管中，加入5.0mL待測樣品溶液和0.375g?NaCl，所述待測樣品溶液的pH為4.0；

2)預先將50.0μL萃取劑三氯甲烷和1.0mL分散劑丙酮混勻；

3)用2.0mL注射器吸取步驟(2)的混合液，迅速注射入步驟(1)裝有待測樣品溶液和0.375g?NaCl的尖底離心管中，輕輕振蕩，形成乳濁體系；

4)將離心試管以4500r/min離心3min；

5)用微量液相進樣針吸取離心管底部的有機相直接進行HPLC分析。

本發(fā)明的顯著優(yōu)點是：

本方法能夠有效地對植物樣品進行凈化、濃縮，減少植物基質對檢測信號的干擾；

本方法富集效果好，處理后的樣品用高效液相色譜-熒光檢測法分離測定，待測物質的檢測限降低了兩個數量級；

此方法未經過柱，減少了樣品中待測物的損失；

植物樣品中的IAA不穩(wěn)定，易分解，本方法操作時間短，有利于減少IAA的分解；

此方法消耗有機溶劑少，是一種環(huán)境友好的前處理技術；

該方法裝置簡單，成本低；

該方法可與氣相色譜、液相色譜和原子吸收分光光譜等儀器聯(lián)用，適用范圍廣；

該方法無交叉污染問題。

附圖說明

圖1是結合本發(fā)明的DLLME裝置的流程圖。其中，1、2.0mL注射器，2、具塞尖形離心試管，3、微量液相進樣針；(A)將萃取劑和分散劑混合后注入樣品溶液；(B)萃取劑迅速被分散成細小液滴，形成乳濁體系；(C)經離心分離，有機相沉積于具塞尖形離心管底部；(D)用微量進樣針吸取離心管底部有機相進行儀器分析。

具體實施方式

本發(fā)明采用的DLLME(分散液液微萃取)裝置包括：具塞尖形離心試管、2.0mL注射器和微量液相進樣針。

處理步驟包括：