[發明專利]染色質重塑蛋白4A在增強缺氧誘導因子1a穩定性及轉錄活性中的應用

有效

• 申請號: 201010295190.6
• 申請日: 2010-09-28
• 公開（公告）號: CN101974562A
• 公開（公告）日: 2011-02-16
• 發明（設計）人: 石太平;董云巧;李靜;高鵬;鄧唯唯;雄英;馬大龍
• 申請（專利權）人: 北京諾賽基因組研究中心有限公司
• 主分類號: C12N15/85
• 分類號: C12N15/85;C12N15/12;C12Q1/02
• 代理公司: 北京三友知識產權代理有限公司 11127
• 代理人: 丁香蘭

技術領域

本發明涉及染色質重塑蛋白4A(CHMP4A)在促進腫瘤細胞生長中的應用，特別是CHMP4A增強缺氧誘導因子1α(HIF-1α)穩定性及轉錄活性中的應用；以及CHMP4A在篩選能夠抑制腫瘤細胞生長的先導化合物中的應用。?

背景技術

腫瘤缺氧是實體瘤常見現象，缺氧可觸發機體產生一系列應急性保護反應，使得腫瘤細胞適應缺氧微環境。缺氧誘導因子1(hypoxia?inducible?factor?1，HIF-1)是迄今發現與缺氧關系最為密切的轉錄因子，由α亞基和β亞基組成異二聚體(例如參見Ye?Hong等.The?structrure，function，regulation?and?the?relation?to?the?hypoxia?signal?transduct?of?hypoxia?inducible?factor?1.Progress?OfPhysiology?science，2001，32(1)：62-64)。近年來，HIF-1α在腫瘤的發生，侵襲，存活，耐藥性產生中的關鍵調控作用日益受到人們的重視。實驗證明在19種類型的人實質性腫瘤中，有13種出現了HIF-1α的高表達，尤其是在結腸癌，肺癌，前列腺癌中，HIF-1α的高表達占90％以上。而在相應的正常組織中則無表達。其結果顯示HIF-1α的高表達與腫瘤的惡性，臨床分期，浸潤和轉移有明顯的相關性(例如參見Zhong?H等Over-expression?of?hypoxia-inducible?factor?1α?in?common?human?cancers?and?their?metastasis.Cancer?Res，1999，8(59)：5830-5839)。因此，HIF-1α的表達水平的監測有助于腫瘤的早期診斷，判斷腫瘤的惡性程度及患者的預后，并且HIF-1α已成為一個腫瘤治療的重要的靶標。國外已有報道利用HRE-LUC雙螢光素酶報告基因來篩選抑制缺氧誘導因子1α活性的小分子化合物作為新的候選抗癌藥物(例如參見Giovanni?Melillo.Identification?of?Small?Molecule?Inhibitors?of?Hypoxia-inducible?Factor?1Transcriptional?Activation?Pathway.Cancer?Research.，2002，4316-4324.；Chau?NM等Identification?of?novel?small?molecule?inhibitors?of?hypoxia-inducible?factor-1that?differentially?block?hypoxia-inducible?factor-1?activity?and??hypoxia-inducible?factor-1alpha?induction?in?response?to?hypoxic?stress?and?growth?factor.Cancer?Research.2005，65(11)：4918-4928)。但利用此系統來篩選影響缺氧誘導因子1的蛋白多肽未見報道。?

本發明人構建了用于篩選參與腫瘤缺氧反應的相關功能基因的篩選體系，在利用所述篩選體系進行高通量篩選時，令人驚訝地發現染色質重塑蛋白4A能夠增強缺氧誘導因子1α(HIF-1α)穩定性及轉錄活性。?

人染色質重塑蛋白4A與酵母Snf7p蛋白同源，屬于小環狀卷曲(small?coil-coiled)蛋白家族。前期的研究表明該蛋白與細胞內多泡體的形成有關，參與細胞內吞膜受體的降解(例如參見Peck?JW等.Structure?and?function?of?human?Vps20?and?Snf7?proteins.?Biochem?J，2004，377(Pt?3)：693-700.；Tsang?HT等A?systematic?analysis?of?human?CHMPprotein?interactions：additional?MIT?domain-containing?proteins?bind?to?multiple?components?ofthe?human?ESCRT?III?complex.Genomics.2006，88(3)：333-346.)。尚沒有其與細胞缺氧的關系及對缺氧誘導因子1α的蛋白穩定性及轉錄活性的影響報道。?