[發(fā)明專利]木聚糖酶、編碼木聚糖酶的核酸以及制備和應(yīng)用它們的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010268914.8
• 申請日: 2003-06-16
• 公開（公告）號: CN101967490A
• 公開（公告）日: 2011-02-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: B·斯蒂爾;W·卡倫;S·希利;G·黑爾伍德;D·吳;D·布盧姆;A·埃斯特拉利安
• 申請（專利權(quán)）人: 先正達(dá)公司
• 主分類號: C12N15/56
• 分類號: C12N15/56;C12N15/63;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;C12N9/42;C12N15/113;C12N11/00;C12N5/20;C12N9/96;C12Q1/68;C12Q1/34;C07
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 趙蓉民;陸惠中

1.分離出的、合成的或重組的核酸，包括

(a)，編碼具有木聚糖酶活性的多肽的核酸，其中該核酸由SEQ?ID?NO：189組成；

(b)，編碼具有木聚糖酶活性的多肽的核酸，其中所述多肽由SEQ?ID?NO：190的氨基酸序列組成；或

(c)，(a)或(b)的核酸，其編碼木聚糖酶但是缺少信號序列或碳水化合物結(jié)合模塊。

2.表達(dá)序列盒、載體或克隆載體，包含含有權(quán)利要求1的核酸序列的核酸。

3.轉(zhuǎn)化的細(xì)胞，其包含：

(a)權(quán)利要求1的核酸序列；

(b)權(quán)利要求2的表達(dá)序列盒、載體或克隆載體；或

(c)編碼權(quán)利要求7的多肽的核酸。

4.下列(a)-(c)中任一項在制備轉(zhuǎn)基因非人動物或轉(zhuǎn)基因植物或轉(zhuǎn)基因種子中的用途，

(a)權(quán)利要求1的核酸序列；

(b)權(quán)利要求2的表達(dá)序列盒、載體或克隆載體；或

(c)編碼權(quán)利要求7的多肽的核酸。

5.在細(xì)胞中抑制木聚糖酶mRNA轉(zhuǎn)錄體的翻譯的方法，包括給予所述細(xì)胞或在所述細(xì)胞中表達(dá)反義寡核苷酸，所述反義寡核苷酸含有與權(quán)利要求1的核酸序列互補(bǔ)的核酸序列，或者能夠在嚴(yán)緊性條件下與權(quán)利要求1的核酸序列雜交的核酸序列。

6.在細(xì)胞中抑制木聚糖酶表達(dá)的方法，包括給予所述細(xì)胞或在所述細(xì)胞中表達(dá)雙鏈抑制性RNA，其中所述的RNA含有權(quán)利要求1的核酸序列的子序列。

7.分離出的、合成的或重組的多肽，其具有木聚糖酶活性，其中該多肽的由如下序列組成

(a)，SEQ?ID?NO：190的氨基酸序列；

(b)，由具有權(quán)利要求1所述的序列的核酸編碼的氨基酸序列；或

(c)，(a)或(b)的多肽，但其缺少信號序列或碳水化合物結(jié)合模塊。

8.蛋白制劑，包含：

(a)由權(quán)利要求1的核酸序列編碼的多肽；

(b)權(quán)利要求2的表達(dá)序列盒、載體或克隆載體；或

(c)權(quán)利要求7所述的多肽。

9.同型二聚體，包括由權(quán)利要求1的核酸序列編碼的多肽；或權(quán)利要求7所述的多肽。

10.固定化的多肽，其中所述的多肽包括：

(a)由權(quán)利要求1的核酸序列編碼的多肽；或

(b)權(quán)利要求7所述的多肽。

11.陣列、微陣列、生物芯片或芯片，包含在權(quán)利要求10中所示的固定化的多肽，或者固定化的核酸，所述核酸包括權(quán)利要求1的核酸序列。

12.分離出的、合成的或重組的抗體，其可與下述的多肽特異結(jié)合：

(a)由權(quán)利要求1的核酸序列編碼的多肽；或

(b)權(quán)利要求7所述的多肽。

13.雜交瘤，其包含可與下述的多肽特異結(jié)合的抗體：

(a)由權(quán)利要求1的核酸序列編碼的多肽；或

(b)權(quán)利要求7所述的多肽。

14.制備抗木聚糖酶抗體的方法，包括給予非人動物：(a)權(quán)利要求1的核酸或其子序列，其量足以產(chǎn)生體液免疫反應(yīng)，由此制備抗木聚糖酶抗體；或(b)權(quán)利要求7所述的多肽，其量足以產(chǎn)生體液免疫反應(yīng)，由此產(chǎn)生抗木聚糖酶抗體。

15.產(chǎn)生重組多肽的方法，包括步驟：(a)提供與啟動子有效連接的核酸，其中所述的核酸包括權(quán)利要求1的核酸序列；和(b)在允許表達(dá)多肽的條件下表達(dá)步驟(a)的核酸，由此產(chǎn)生重組的多肽。

16.鑒定具有木聚糖酶活性的多肽的方法，包括步驟：

(a)提供權(quán)利要求7所述的多肽，或由權(quán)利要求1的核酸序列編碼的多肽；

(b)提供木聚糖酶底物；和

(c)將所述多肽與步驟(b)的底物接觸，檢測底物量的減少或反應(yīng)產(chǎn)物量的增加，其中所述的底物量的減少或反應(yīng)產(chǎn)物量的增加檢測出具有木聚糖酶活性的多肽。