[發明專利]一種纖維單胞菌DA8菌株及其獲得方法和應用

無效

• 申請號: 201010253158.1
• 申請日: 2010-08-13
• 公開（公告）號: CN102010836A
• 公開（公告）日: 2011-04-13
• 發明（設計）人: 董政娥;丁若垚;郁崇文;張興群
• 申請（專利權）人: 東華大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;D01C1/04;D06M16/00;C12S11/00;C12R1/01;D06M101/06
• 代理公司: 上海泰能知識產權代理事務所 31233
• 代理人: 黃志達;謝文凱

技術領域

本發明屬于纖維單胞菌菌株及其應用領域，特別涉及一種纖維單胞菌DA8菌株及其獲得方法和應用。?

背景技術

亞麻紡織品由于其具有“綠色保健”的特點，倍受消費者青睞，是國際市場上最受歡迎的紡織商品之一。世界上共有20多個國家和地區種植纖維亞麻。2004年我國纖維亞麻的種植面積已經達到了16萬畝，居世界第一位。黑龍江省是我國纖維用亞麻主要生產基地，種植面積和產量約占全國的70％以上。然而我國亞麻纖維年產量僅有4-5萬噸，缺口在50％以上。亞麻脫膠技術存在的不足使得纖維質量不佳，長麻率和梳成率較低、強度弱、可紡性差是目前制約亞麻紡織不能紡高支紗和生產高檔產品的關鍵問題之一。?

目前，生產上普遍采用傳統的亞麻溫水漚麻、雨露漚麻及天然水漚麻等方法，均利用天然微生物及其酶對亞麻的果膠、半纖維素和木質素等膠質進行降解，菌株混雜，難以進行有效的控制，導致脫膠時間長(溫水漚麻約為4d；雨露漚麻為15-20d；天然水漚麻5-7d)、綜合長麻率低、質量不穩定(束纖維強力低)和環境污染重等諸多問題，嚴重制約著亞麻產業的大力發展。盡管20世紀以來，不同的亞麻脫膠菌種如黑曲霉、真菌等被分離、純化并用于亞麻脫膠。盡管將微生物及其產生的酶類應用于亞麻脫膠不僅可以提高纖維的產量和品質，耗能少、使用安全，可減輕對環境的污染，具有良好的前景，但是其產業化一直未能實現。盡管纖維單胞菌株及其水解酶被用于紫杉烷轉化(CN200710012698.9)、分解木質纖維素(CN200910085651.4)和植物性纖維分解劑(CN200610071920.8)，但卻未見其在亞麻等麻類纖維膠質分解中的應用報道。?

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種纖維單胞菌DA8菌株及其獲得方法和應用，本發明所篩選的纖維單胞菌菌種具有產酶量大，酶系齊全，無毒性及培養條件粗放等優點；采用該復合脫膠酶液進行亞麻脫膠不僅大大縮短了脫膠周期，降低了成本，而且纖維分裂度提高，脫膠效率達95％；本發明的脫膠方法與現有的溫水脫膠所需設備基本相同，因此特別適用于老企業在現有設備基礎上進行工藝改進。?

本發明的一種纖維單胞菌DA8菌株(CGMCC?No.3840)，其特征在于：該菌株具有產果膠酶和半纖維素酶能力，具有亞麻脫膠活性。?

本發明的一種纖維單胞菌DA8菌株的獲得方法，包括：?

(1)從東海舟山海域取樣腐爛海草，先將海草與富集培養基按1g∶20ml的比例于富集培養基中室溫靜置培養30天，然后取0.1ml富集培養基涂布于分離培養基，37℃靜置培養1～4天，獲得自野生型脫膠優勢菌株；?

其中，富集培養基配方為：亞麻粉5g，無菌水200ml，pH自然；分離培養基配方為：亞麻粉5g，(NH₄)₂SO₄?5g，K₂HPO₄?1g，MgSO₄?0.5g，KCl?0.5g，FeSO₄?0.01，瓊脂20g，水1000mL，用NaOH將pH調節到9；?

(2)將步驟(1)中得到的菌株接種到果膠營養培養基中，28℃培養72h，帶菌落形成后，加入0.2％剛果紅水溶液染色4h，倒去表面剩余剛果紅溶液，加入少量蒸餾水蕩去薄層表面剛果紅，對光即可見明顯的絳紅色水解圈，在菌落周圍出現絳紅色水解圈者即為果膠分解菌(測量果膠瓊脂平板上菌周圍的透明圈直徑和菌落直徑，水解圈與菌落直徑之比大者一般有較高果膠酶活力)；?

然后將果膠分解菌接種到半纖維素營養培養基中，28℃培養72h，即可見水解圈(測量水解圈和菌苔大小，并計算二者大小之比，水解圈與菌落直徑之比大者一般有較高半纖維素酶活力)；?

(3)通過透明圈法從上述培養基中選擇出具有產果膠酶和半纖維素酶能力的菌株。所述步驟(2)中的果膠營養培養基，其組分包括：?

果膠?????????????????2g?

NANO3????????????????3g?

K2HPO4???????????????0.5g?

MgSO4????????????????1g?

瓊脂?????????????????20g?

水???????????????????1000mL?

pH???????????????????自然，7.0-7.2?

半纖維素營養培養基，其組分包括：?

半纖維素(自制)????????20g?