[發(fā)明專利]一種中壓柱快速分離油茶餅粕中黃酮苷的制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010229218.6
• 申請(qǐng)日: 2010-07-19
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101899070A
• 公開(kāi)（公告）日: 2010-12-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王成章;陳虹霞;葉建中;周昊;原姣姣
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院林產(chǎn)化學(xué)工業(yè)研究所
• 主分類(lèi)號(hào): C07H1/08
• 分類(lèi)號(hào): C07H1/08;C07H17/07
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種中壓柱快速分離油茶餅粕中黃酮苷的制備方法，其特征在于由以下步驟組成：

第一步，脫脂：

油茶籽脫殼，籽破碎，采用石油醚、乙醚、正己烷、戊烷和正戊烷等有機(jī)溶劑脫脂，茶籽質(zhì)量與有機(jī)溶劑的體積比例為1∶15-35g/mL，溫度30℃-80℃，提取1-3h，提取1-4次，過(guò)濾后得到濾渣，得到脫脂的油茶籽粕；

第二步，提取：

將油茶籽粕以1g原料加入15-30mL的不同濃度醇-水溶液提取1-4次，提取溫度60-80℃，提取時(shí)間1-3h，提取后，過(guò)濾，合并濾液，真空濃縮得到油茶粕黃酮苷粗提取物；

第三步，萃取：

將提取物得到的浸膏用正丁醇等有機(jī)溶劑萃取2-5次，將水層濃縮，得到粗提物；

第四步，中壓柱純化：

將油茶粕黃酮苷粗提取物與中壓柱填料按質(zhì)量比1∶15-50吸附，洗脫劑為氯仿、正丁醇、乙酸乙酯、甲醇、乙醇和水中的一種或幾種的混合溶液，中壓柱柱長(zhǎng)20-300cm，柱直徑2-30cm，柱壓為3-20MPa，檢測(cè)波長(zhǎng)220-360nm，流速2-200mL/min，富集黃酮苷部位，室溫真空回收溶劑，經(jīng)HPLC分析，制備得到90％以上黃酮苷混合物；

第五步，HPLC制備分離：

以中壓制備得到的90％以上的黃酮苷混合物為原料，采用高效液相進(jìn)行制備，得到兩種黃酮苷單體，分別為山奈酚3-O-[2-O-β-D-半乳糖-6-O-α-L-鼠李糖]-β-D-葡萄糖苷(Ⅰ)和山奈酚3-O-[2-O-β-D-木糖-6-O-α-L-鼠李糖]-β-D-葡萄糖苷(Ⅱ)，經(jīng)HPLC分析，含量在95％以上。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種中壓柱快速分離油茶餅粕中黃酮苷的制備方法，其特征在于步驟2中的不同濃度的醇-水溶液為乙醇、甲醇和水中的一種或幾種的混合溶液，優(yōu)選60-90％的乙醇水溶液。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種中壓柱快速分離油茶餅粕中黃酮苷的制備方法，其特征在于步驟3中的有機(jī)溶劑為丙酮、乙酸乙酯和正丁醇或它們中的一種或者兩種。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種中壓柱快速分離油茶餅粕中黃酮苷的制備方法，其特征在于中壓柱填料可選擇200-500目的硅膠和氧化鋁中的一種或二種任意比，洗脫劑為氯仿、乙酸乙酯、正丁醇和甲醇中的一種或幾種的混合溶液，優(yōu)選氯仿∶甲醇＝100∶1-30(v/v)混合溶劑。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種中壓柱快速分離油茶餅粕中黃酮苷的制備方法，其特征在于中壓柱填料也可選擇孔徑為60A，40-60μm的ODS?C18、C8和Sephedex?LH-20材料，洗脫劑為甲醇、乙醇和水中的一種或幾種的混合溶液，優(yōu)選5％～50％的甲醇水溶液。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種中壓柱快速分離油茶餅粕中黃酮苷的制備方法，其特征在于高效液相制備的條件為：色譜柱XB-C18(Φ10mm×250mm，5μm)；流動(dòng)相：甲醇∶水＝2∶3(V/V)，紫外270nm，流速：3mL/min。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種中壓柱快速分離油茶餅粕中黃酮苷的制備方法，其特征在于HPLC分析條件為：色譜柱Hypersil?ODS2(Φ4.6mm×200mm，5μm)；流動(dòng)相：甲醇∶水＝4∶6(V/V)，紫外270nm，流速：1mL/min。