[發明專利]青蒿中青蒿素含量的微芯片檢測裝置及其方法無效
| 申請號: | 201010202735.4 | 申請日: | 2010-06-18 |
| 公開(公告)號: | CN101881750A | 公開(公告)日: | 2010-11-10 |
| 發明(設計)人: | 徐溢;盛靜;王昌瑞;周小華;季金茍;張梅 | 申請(專利權)人: | 重慶大學 |
| 主分類號: | G01N27/447 | 分類號: | G01N27/447 |
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| 地址: | 400044 *** | 國省代碼: | 重慶;85 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 青蒿 青蒿素 含量 芯片 檢測 裝置 及其 方法 | ||
一.技術領域
本發明屬于青蒿原料中青蒿素含量檢測技術領域,具體涉及青蒿原料中青蒿素含量的微芯片檢測裝置及檢測方法。
二.背景技術
青蒿素是從青蒿中提取出來的含有過氧橋的倍半萜內酯類化合物,被世界衛生組織譽為世界上唯一有效的抗瘧藥物。雖然從1983年起就有了青蒿素的化學合成方法,但青蒿素有多個手性碳原子,合成步驟復雜、產率低、成本高,從而很難在工業合成上得到推廣。目前從天然植物青蒿中提取分離青蒿素仍是其主要來源。尋求準確、簡便、快速的青蒿素定量檢測方法,對于優化提取工藝條件、研究青蒿素藥理藥效,特別是藥材現場收購均具有重要意義。
現有青蒿原料中青蒿素含量的檢測裝置及其檢測方法,如專利號為ZL?200610095017.5的“一種青蒿中青蒿素含量的測定方法”專利,公開的是一種不完全提取待測青蒿中的青蒿素,采用紫外分光光度分析法測取青蒿素含量數據M(mg/g),代入通過與對青蒿素完全提取后采用液相色譜法測取的青蒿素含量數據的對應關系所建立的線性模型,經計算得到所測青蒿中青蒿素的實際含量X(mg/g)。該專利的主要缺點是:利用青蒿素的紫外性質,需用堿溶液將青蒿素于50℃水浴中衍生30min,產生具有紫外吸收的化合物(a、β-不飽和酮酸鹽)后,用紫外分光光度計在波長292nm進行紫外檢測。該法操作步驟繁瑣、費時,經過堿衍生化處理后青蒿素結構受到破壞,產生含量損失。用索氏提取方法完全提取原料中的青蒿素,使用提取溶劑量較大,并耗時長達30h。而且紫外分光光度計體積較大。又如2006年3月《分析測試學報》第25卷第2期109~111頁“高效毛細管電泳電導法測定青蒿素的含量”一文,采用的毛細管電泳儀主要包括高壓電源、分離長度為50cm的石英毛細管柱、毛細管電泳數據站;采用的方法是:以石油醚為提取溶劑,將青蒿原料用一定量的活性炭脫色,并浸泡10min后用超聲振蕩30min,重復提取3次后得到青蒿素提取液。每次檢測前依次用0.1mol/L的NaOH、二次蒸餾水、緩沖溶液沖洗毛細管5min,每兩次進樣之間沖洗毛細管3min。采用重力進樣,進樣高度20cm,進樣時間15s。以Tris-H3BO2為電泳介質,在15kV高壓,pH9.0的堿性條件下柱端電導法檢測青蒿素含量。以峰高(Y)與質量濃度(ρ,mg/L)建立線性回歸方Y=202+102ρ,從而計算出青蒿素含量。該毛細管電泳儀的主要缺點是:毛細管電泳儀為體積較大的商品化儀器,結構較為復雜,不便于攜帶,而且儀器昂貴。該方法的主要缺點是:提取青蒿素操作復雜,而且樣品分離時間較長,檢測速度較慢,使用體積較大的毛細管電泳儀整體成本較高。
三.發明內容
本發明的目的是針對現有青蒿原料中青蒿素含量檢測裝置及檢測方法的不足,提供一種青蒿中青蒿素含量的微芯片檢測裝置及其方法,具有高效、簡便、成本低廉,適用于青蒿素快速分析檢測等特點。
本發明的機理:電導檢測是一種通用型的電化學檢測方式,只要可改變溶液電導率的物質就可被檢測,適用性廣,靈敏度較高,檢出限可達到10-6mol/L。微流控芯片分析系統具有分析樣品量少、分析時間短的優點,在微型化、集成化和便攜化方面的巨大優勢。使用微流控芯片電導法檢測青蒿素不僅可以避免青蒿素衍生過程,簡化操作步驟,可在0.5小時內完成青蒿素的含量測定,極大地縮短了青蒿素的檢測時間。而且通過檢測技術與分析芯片的集成可使儀器在微型化和集成化方面更具優勢。本發明以氯仿、乙酸乙酯、正己烷中的一種有機溶劑為特定提取溶劑,在微小型玻璃提取裝置中,對青蒿原料中的青蒿素進行快速、高效提取。然后將提取液通過微孔濾膜直接進樣至自行制作的集成電導檢測的微芯片檢測裝置中,對青蒿素提取液進行無衍生、在線快速分析檢測。
實現本發明目的的技術方案是:一種青蒿中青蒿素含量的微芯片檢測裝置,主要包括電源、微流控芯片、檢測電路、數據采集電路和計算機。
所述的電源為市購型號為XCDY的微流控芯片小型智能高壓電源,輸入電壓為市電220V,輸出電壓為0~8000KV可調,電流為0~500μAk可調。電源通過同軸電纜與兩根鉑電極針連接,用以供給微管道中的青蒿素提取液的分離電壓。
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