[發(fā)明專利]高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜測定蜂膠中氯霉素殘留量的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010181330.7
• 申請(qǐng)日: 2010-05-24
• 公開（公告）號(hào): CN101865886A
• 公開（公告）日: 2010-10-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周萍;錢志來;陳建清;毛增亮
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 杭州蜂之語蜂業(yè)股份有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/72;G01N30/06
• 代理公司: 杭州天欣專利事務(wù)所 33209
• 代理人: 陳紅

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種測定蜂膠中氯霉素殘留量的方法，尤其是涉及一種高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜測定蜂膠中氯霉素殘留量的方法，主要用于對(duì)蜂膠中氯霉素藥物殘留量進(jìn)行檢查，同時(shí)也適用于對(duì)蜂王漿、蜂蜜中氯霉素藥物殘留量進(jìn)行檢查。

背景技術(shù)

氯霉素(Chloramphenicol)是由委內(nèi)瑞拉鏈絲菌產(chǎn)生的抗生素，為廣譜抑菌劑。由于其對(duì)血液系統(tǒng)的毒性較大，被歐盟、日本、美國等國禁止用于動(dòng)物源性食品。

氯霉素檢測方法主要有LC/MS/MS法、GC/MS法、GC法、ELISA法、HPLC法和CHARM?II法等，如SN/T?2063-2008中的進(jìn)出口蜂王漿中氯霉素殘留量的檢測方法和農(nóng)業(yè)部781號(hào)公告-2-2006中的動(dòng)物源食品中氯霉素殘留量的測定高效液相色譜均屬于LC/MS/MS法，如農(nóng)業(yè)部781號(hào)公告-10-2006中的蜂蜜中氯霉素殘留量的測定氣相色譜法和GB/T?22338-2008中的動(dòng)物源性食品中氯霉素類藥物殘留量測定均屬于GC/MS法，如農(nóng)業(yè)部1025號(hào)公告-21-2008中的動(dòng)物源食品中氯霉素殘留檢測氣相色譜法屬于GC法，如SN/T?2058-2008中的進(jìn)出口蜂王漿中氯霉素殘留量測定方法屬于ELISA法，如由吳華、黃鴻和歐劍峰等發(fā)表在四川化工2009年第12卷第3期第40-42頁上的高效液相色譜法測定蜂蜜中氯霉素殘留量的研究和由潘瑩宇、許茜和康學(xué)軍等發(fā)表在色譜2005年第23卷第6期第577-580頁上的高效液相色譜-熒光檢測法測定牛奶中氯霉素的殘留量均屬于HPLC法，如SN/T1966-2007上的水產(chǎn)品中氯霉素殘留檢測方法屬于CHARM?II法。

由上可知，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜方法作為確證方法已經(jīng)廣泛被國內(nèi)外政府監(jiān)督檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)運(yùn)用，其在靈敏度、準(zhǔn)確度、檢測效率上所具有的獨(dú)特優(yōu)勢，已成為目前最優(yōu)越性的殘留檢測儀器設(shè)備，用于檢測動(dòng)物源性食品中氯霉素殘留量時(shí)，其檢測限可以達(dá)到0.1μg/kg，相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道已經(jīng)很多。但是，由于不同種類的樣品成分不一樣，樣品凈化程度也不同，在使用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜方法時(shí)，并非所有的樣品都能夠達(dá)到0.1μg/kg這個(gè)檢出限，例如使用已有的可以測定氯霉素殘留量的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜方法測定蜂膠中氯霉素殘留量時(shí)，其檢測限遠(yuǎn)達(dá)不到0.1μg/kg，這是因?yàn)榉淠z中的成分有近千種，國內(nèi)還沒有理想的方法作為蜂膠中氯霉素殘留量檢測標(biāo)準(zhǔn)，國內(nèi)也未見蜂膠中氯霉素殘留量檢測的相關(guān)文獻(xiàn)。

綜上所述，目前還沒有一種方法簡單、準(zhǔn)確，檢測成本低，檢測效率高，檢測限能達(dá)0.1μg/kg的用于測定蜂膠中氯霉素殘留限量的方法，在蜂膠檢測中難以滿足國外對(duì)蜂膠中氯霉素殘留限量的要求。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述不足，而提供一種方法簡單，檢測成本低，檢測效率高，檢測限能達(dá)0.1μg/kg的高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜測定蜂膠中氯霉素殘留量的方法。

本發(fā)明解決上述問題所采用的技術(shù)方案是：該高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜測定蜂膠中氯霉素殘留量的方法的特點(diǎn)在于：該方法所用到的原料包括純度大于99.0％的氯霉素標(biāo)準(zhǔn)品，濃度為100mg/l的D5-氯霉素標(biāo)準(zhǔn)品，為農(nóng)殘級(jí)的乙酸乙酯，為分析純的氫氧化鈉，為優(yōu)級(jí)純的正己烷，為液相色譜純的乙腈，蜂膠樣品；

該方法所用到的設(shè)備包括三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀，配有二元泵、在線脫氣機(jī)、自動(dòng)進(jìn)樣器、數(shù)據(jù)處理軟件的高效液相色譜儀；所述三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀中的離子源溫度為600℃，輔助加熱氣為55.00psi，干燥氣為65.00psi，氣簾氣為25.00psi，碰撞氣為5.00psi，電噴霧電壓為-4100.00V，離子化法為負(fù)離子模式；所述高效液相色譜儀為Agilent?1200series，色譜柱為Hypersil?ODS2，色譜柱的規(guī)格為4.6mm×150mm，5μm，柱溫為30℃，進(jìn)樣量為20μl；