[發明專利]抗肝炎天然藥物復方制劑及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201010180152.6
• 申請日: 2010-05-21
• 公開（公告）號: CN102018751A
• 公開（公告）日: 2011-04-20
• 發明（設計）人: 吳力克;張娟;明智強
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第三軍醫大學第一附屬醫院
• 主分類號: A61K36/484
• 分類號: A61K36/484;A61P1/16;A61P31/14;A61P31/20;C12P1/00;C12R1/01;C12R1/225;C12R1/885
• 代理公司: 北京同恒源知識產權代理有限公司 11275
• 代理人: 趙榮之

1.抗肝炎天然藥物復方制劑，其特征在于：由甘草和螺旋藻按質量比為1～6∶1～6制成。

2.根據權利要求1所述抗肝炎天然藥物復方制劑，其特征在于：由甘草和螺旋藻按質量比為4∶1制成。

3.權利要求1或2所述抗肝炎天然藥物復方制劑的制備方法，其特征在于：包括以下步驟：

A、甘草發酵液的制備

A1、將甘草進行細粉化處理，制得甘草細粉體；

A2、將步驟A1所得的甘草細粉體進行高壓蒸氣爆碎處理，制得甘草氣爆細粉體；

A3、將步驟A2所得的甘草氣爆細粉體與來自微生物的木質素降解酶系粗酶液和纖維素降解酶系粗酶液進行共酶解反應，制得甘草酶解細粉體；

A4、將步驟A3所得的甘草酶解細粉體進行超微粉化處理，制得甘草超微粉體；

A5、將步驟A4所得的甘草超微粉體加水提取，提取液濾過，濾液濃縮，加入發酵輔助營養成分和水，制得甘草發酵原液；

A6、將步驟A5所得的甘草發酵原液接種嗜甘草乳桿菌進行厭氧液體深層發酵，制得甘草發酵液；

B、螺旋藻發酵液的制備

B1、將螺旋藻進行細粉化處理，制得螺旋藻細粉體；

B2、將步驟B1所得的螺旋藻細粉體進行超微粉化處理，制得螺旋藻超微粉體；

B3、在步驟B2所得的螺旋藻超微粉體中加入發酵輔助營養成分和水，制得螺旋藻發酵原液；

B4、將步驟B3所得的螺旋藻發酵原液接種嗜螺旋藻雙歧桿菌進行厭氧液體深層發酵，制得螺旋藻發酵液；

C、抗肝炎天然藥物復方制劑的制備

將步驟A所得的甘草發酵液和步驟B所得的螺旋藻發酵液混合，離心去除菌體，超聲去除上清液殘留菌體，合并上清液和藥泥，高溫滅酶，干燥，即得抗肝炎天然藥物復方制劑。

4.根據權利要求3所述抗肝炎天然藥物復方制劑的制備方法，其特征在于：所述木質素降解酶系粗酶液來自保藏號為CCTCC?No.M207024的云芝(Polystictus?versicolor)ODK-CY₁，所述纖維素降解酶系粗酶液來自保藏號為CCTCC?No.M207025的綠色木霉(Trichoderma?viride)ODK-TL₁；所述嗜甘草乳桿菌為保藏號為CCTCC?No.M207026的植物乳桿菌(Lactobacillus?plantarum)ODK-LR₁；所述嗜螺旋藻雙歧桿菌為保藏號為CCTCC?No.M207027的長雙歧桿菌(Bifidobacterium?longum)ODK-BS₁。

5.根據權利要求4所述抗肝炎天然藥物復方制劑的制備方法，其特征在于：所述步驟A甘草發酵液的制備方法為：

A1、將甘草機械粉碎過100目篩，制得平均粒徑為100～150μm的甘草細粉體；

A2、將步驟A1所得的甘草細粉體進行高壓蒸氣爆碎處理：氣爆溫度為115～131℃，氣爆時間為5～15分鐘，制得甘草氣爆細粉體；

A3、將步驟A2所得的甘草氣爆細粉體與來自微生物的木質素降解酶系粗酶液和纖維素降解酶系粗酶液進行共酶解反應：木質素降解酶系粗酶液與纖維素降解酶系粗酶液的體積比為1～2∶1～2，酶解溫度為25～31℃，酶解時間為24～72小時，制得甘草酶解細粉體；

A4、將步驟A3所得的甘草酶解細粉體深低溫冷凍至玻璃點后進行氣流粉碎，制得平均粒徑為5～25μm的甘草超微粉體；

A5、將步驟A4所得的甘草超微粉體加水煎煮1～3次，每次加6～10倍量水煎煮20～60分鐘，首次煎煮前加水浸泡20～40分鐘，合并提取液，分級過濾至300目，濾液濃縮至原體積的1/2，再加入多價蛋白胨和水，調節甘草煎濾液濃度為100～300mL/L、多價蛋白胨濃度為5～20g/L，制得甘草發酵原液；

A6、將步驟A5所得的甘草發酵原液接種嗜甘草乳桿菌進行厭氧液體深層發酵：發酵菌種種齡為24～48小時，接種量為5～15mL/L，發酵溫度為28～40℃，初始pH值為5.0～7.0，發酵時間為48～96小時，制得甘草發酵液。