[發(fā)明專利]水稻紋枯病生防菌枯草芽孢桿菌WJ-1及菌劑與應(yīng)用

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201010175797.0
• 申請(qǐng)日: 2010-05-10
• 公開（公告）號(hào): CN101857848A
• 公開（公告）日: 2010-10-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 謝甲濤;游景茂;姜道宏;付艷蘋;程家森
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;A01N63/02;A01P3/00;C12R1/125
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務(wù)所 42001
• 代理人: 王敏鋒

1.一株分離篩選的對(duì)水稻紋枯病有防治作用的生防菌株，其特征在于，該菌株為枯草芽孢桿菌(Bacillus?subtilis)WJ-1，其保藏號(hào)為CCTCC?NO：M2010069。

2.包含權(quán)利要求1所述生防菌株的對(duì)水稻紋枯病具有防治作用的微生物菌劑。

3.如權(quán)利要求2所述的菌劑，其特征在于，以保藏號(hào)為CCTCC?NO：M2010069的枯草芽孢桿菌WJ-1為菌株通過(guò)發(fā)酵方法生產(chǎn)，其步驟如下：

(1)先將保藏號(hào)為CCTCC?NO：M2010069的枯草芽孢桿菌WJ-1的菌株在PDA平板上于33℃活化1d，再將單菌落接種到含有200ml?PDB的三角瓶中，于180r/min下，33℃振蕩培養(yǎng)48h，得到濃度為1.5×10¹⁰cfu/ml的枯草芽孢桿菌WJ-1的發(fā)酵菌液A；

(2)將所述的發(fā)酵菌液A于4℃，6,000r/min下離心20min，取離心后的上清液，用孔徑為0.22μm的細(xì)菌過(guò)濾器過(guò)濾所述的上清液，得到不含枯草芽孢桿菌WJ-1的發(fā)酵液B，將獲得的沉淀菌體備用；

(3)將沉淀菌體用無(wú)菌水洗滌3次，再用無(wú)菌水懸浮，使枯草芽孢桿菌WJ-1的濃度達(dá)到1.5×10¹⁰cfu/ml，得菌液C；

(4)向所述發(fā)酵菌液A或發(fā)酵液B或菌液C中分別加入吐溫-20，使發(fā)酵菌液A或發(fā)酵液B或菌液C中的吐溫-20的終濃度為0.025％，即得到菌體濃度為1.5×10¹⁰cfu/ml的枯草芽孢桿菌WJ-1發(fā)酵菌液A；不含枯草芽孢桿菌WJ-1的發(fā)酵液B；菌體濃度為1.5×10¹⁰cfu/ml的含枯草芽孢桿菌WJ-1的菌液C；

其中

所述的PDA培養(yǎng)基的組分及配方如下：馬鈴薯200g，葡萄糖20g，瓊脂10g，補(bǔ)充蒸餾水至1000ml，調(diào)pH至7.0，在121℃高壓蒸汽滅菌30min；

所述的PDB培養(yǎng)基的組分及配方如下：馬鈴薯200g，葡萄糖20g，補(bǔ)充蒸餾水至1000ml，調(diào)pH至7.0，在121℃高壓蒸汽滅菌30min。

4.權(quán)利要求1所述的菌株在制備水稻紋枯病生物防治的微生物菌劑中的應(yīng)用。

5.權(quán)利要求2或3所述的微生物菌劑在防治水稻紋枯病中的應(yīng)用。