[發明專利]一種抑制β淀粉樣蛋白沉積的藥物的篩選方法

無效

• 申請號: 201010169084.3
• 申請日: 2010-05-12
• 公開（公告）號: CN101832919A
• 公開（公告）日: 2010-09-15
• 發明（設計）人: 王振新;王承克;劉殿俊
• 申請（專利權）人: 中國科學院長春應用化學研究所
• 主分類號: G01N21/33
• 分類號: G01N21/33;C12Q1/02
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 馮瓊;李玉秋

1.抑制β淀粉樣蛋白沉積的藥物的篩選方法，其特征在于，使用無機納米粒子為探針，將其耦合到β淀粉樣蛋白上，在待測藥物作用下測定無機納米粒子的紫外可見光譜的變化。

2.根據權利要求1所述的篩選方法，其特征在于，所述無機納米粒子為金納米粒子、銀納米粒子或量子點。

3.根據權利要求1所述的篩選方法，其特征在于，所述β淀粉樣蛋白為β淀粉樣蛋白單體、β淀粉樣蛋白寡聚體、淀粉樣蛋白沉淀、β淀粉樣蛋白的任一條或多條連續或不連續的多肽片段。

4.根據權利要求1所述的篩選方法，其特征在于，所述無機納米粒子通過鏈霉親和素-生物素作用耦合到所述β淀粉樣蛋白表面。

5.根據權利要求1所述的篩選方法，其特征在于，具體包含以下步驟：

步驟1：將生物素化的淀粉樣蛋白與金屬離子在溶液中孵育，形成生物素化的淀粉樣蛋白與金屬離子的復合物；

步驟2：將鏈霉親和素耦合的金納米粒子與所述生物素化的淀粉樣蛋白與金屬離子的復合物在溶液中混合，加入待測藥物，并設定不加待測藥物的陰性對照；

步驟3：測定步驟2所得混合溶液及其陰性對照的紫外可見光譜，并進行比較。

6.根據權利要求1所述的篩選方法，其特征在于，具體包含以下步驟：

步驟1：將生物素化的淀粉樣蛋白與金屬離子在溶液中孵育，形成生物素化的淀粉樣蛋白與金屬離子的復合物；

步驟2：將所述生物素化的淀粉樣蛋白與金屬離子的復合物加入到活的神經細胞中進行培養；

步驟3：加入待測藥物繼續培養，并設定不加待測藥物的陰性對照；

步驟4：去除細胞培養液，加入鏈霉親和素耦合的金納米粒子進行培養；

步驟5：去除細胞培養液，測定其紫外可見光譜，并進行比較。

7.根據權利要求6所述的篩選方法，其特征在于，所述步驟5去除細胞培養液后加入緩沖溶液懸浮進行測定。

8.根據權利要求5或6所述的篩選方法，其特征在于，所述金屬離子終濃度為1-50μmol/l。

9.根據權利要求5或6所述的篩選方法，其特征在于，所述鏈霉親和素耦合的金納米粒子終濃度為2-10nmol/l。

10.根據權利要求5或6所述的篩選方法，其特征在于，所述生物素化的淀粉樣蛋白的終濃度為10-1000μg/ml。

11.根據權利要求5或6所述的篩選方法，其特征在于，所述鏈霉親和素耦合的金納米粒子的制備方法為：

步驟1：將金納米粒子與在氨基酸序列為CALNN的保護劑存在條件下和生物素化的序列為CALNNGKG的多肽反應，得到生物素化的多肽耦合的金納米粒子；

步驟2：使鏈霉親和素與步驟1所得生物素化的多肽耦合的金納米粒子反應，得到鏈霉親和素耦合的金納米粒子。

12.根據權利要求11所述的篩選方法，其特征在于，所述金納米粒子為直徑為10-100nm的金納米粒子。

13.一種用于篩選抑制β淀粉樣蛋白沉積的藥物的組合物，包含鏈霉親和素耦合的無機納米粒子、生物素化的淀粉樣蛋白和金屬離子。

14.根據權利要求13所述的組合物，其特征在于，所述金屬離子為Zn²⁺或Cu²⁺。

15.根據權利要求13所述的組合物，其特征在于，所述無機納米粒子為金納米粒子、銀納米粒子或量子點。