[發明專利]SPIO@SiO2-WGA腸壁靶向造影劑的制備方法

無效

• 申請號: 201010152528.2
• 申請日: 2010-04-20
• 公開（公告）號: CN101843907A
• 公開（公告）日: 2010-09-29
• 發明（設計）人: 陳高祥;程學軍;陸慶;王平翠;劉睿;許建榮;金彩虹;何丹農
• 申請（專利權）人: 上海納米技術及應用國家工程研究中心有限公司
• 主分類號: A61K49/06
• 分類號: A61K49/06
• 代理公司: 上海上大專利事務所(普通合伙) 31205
• 代理人: 陸聰明

技術領域

本發明涉及一種超順磁性四氧化三鐵(SPIO：superparamagnetic?iron?oxide)磁共振納米造影劑的制備方法，特別涉及一種SPIO@SiO2-WGA腸壁靶向造影劑的制備方法。

背景技術

磁共振成像技術在腫瘤疾病的診斷中有著非常重要的作用，廣泛應用于臨床檢測。其成像效果很大一方面取決于其使用的造影劑，好的造影劑或具有特異靶向的造影劑能提高診斷信號對比度，從而更早地發現腫瘤。而按目前的醫療水平，早期癌癥病人約有80％～90％以上可以治愈。因此，開發性能優異的磁共振造影劑，從而提早發現腫瘤，是惡性治療腫瘤的關鍵。

隨著造影劑制備理論和技術、材料臨床基礎研究以及磁共振成像的不斷發展和完善和發展，部分磁共振造影劑在臨床上獲得較廣泛應用，且發展迅猛。用于疾病診斷的磁共振造影劑材料主要包括以下幾類：(1)陽性造影劑：常規診斷劑量的順磁性造影劑如常規劑量的含釓造影劑，使病灶組織的信號增強，如Gd-DTPA、Gd-DTPA-BMA等。(2)陰性造影劑：是病灶組織的信號減弱，超順磁性四氧化三鐵造影劑就屬于此類，如Feridex(菲立磁)、Resovist等。超順磁性造影劑相比含釓造影劑具有組織特異性高、更安全的特點，已成為近年來磁共振造影劑的研究熱點。

腸壁的損傷是很多腸道疾病如腸炎腸癌的診斷依據之一，但目前臨床上的磁共振造影劑對粘膜損傷成像效果差，很難在腸粘膜局部損失的情況下實現清晰的造影成像。麥胚凝集素(Wheat?germ?agglutinin，WGA)是從谷物中提取出來的、能與糖結合的蛋白質，在細胞識別和粘著反應中起重要作用，主要是促進細胞間的粘著。麥胚凝集素凝集素具有一個以上同糖結合的位點，因此能夠參與細胞的識別和粘著，將細胞及與WGA修飾的藥物相聯接。采用WGA修飾經SiO2包裹的超順磁性四氧化三鐵，實現腸粘膜細胞與陰性造影劑的連接，對提高腸道疾病如腸炎腸癌的診斷精度具有重要的意義。

對專利文獻調研發現，目前已有不少關于超順磁性氧化鐵的專利，如專利《采用超順磁性硅殼納米顆粒靜電吸附分離蛋白質的方法》(公開號：CN1876673)制備了二氧化硅包裹的Fe3O4球及表面氨基化的二氧化硅包裹的Fe₃O₄球，表面分別帶正電和負電，前者可實現對目標堿性蛋白質(細胞色素C)的分離提取，后者可實現對目標酸性蛋白質(牛血清白蛋白)的分離提取。專利《一種兩親超順磁性磁共振造影劑及其制備方法》(公開號：CN101518656)制備了一種多元醇分子包覆的MnFe₂O₄納米粒子。專利《氨基硅烷偶聯劑與葡聚糖共修飾的超順磁性納米顆粒及其制備方法》(公開號：CN101554574)公開了一種氨基硅烷偶聯劑與葡聚糖共修飾的超順磁性納米顆粒及其制備方法，該超順磁性納米顆粒具有核殼型結構，其內核為磁性四氧化三鐵，內核表面為葡聚糖包覆層，葡聚糖包覆層外表面連接氨基硅烷偶聯劑。總結目前已有的專利，但大多數專利僅涉及到超順磁性粒子的制備、二氧化硅包裹及表面氨基化和聚合物表面修飾，很少有專利涉及到超順磁性氧化鐵表面包裹蛋白質實現功能化。

發明內容

本發明的目的在于針對現有技術的磁共振造影劑對腸壁的吸附性不好、成像效果不佳等不足，提供一種WGA包裹的SPIO@SiO2磁共振納米造影劑的制備方法。

為達到上述目的，本發明采用如下技術方案：

一種SPIO@SiO2-WGA腸壁靶向造影劑的制備方法，其特征在于該方法的具體步驟為：

a.超順磁性四氧化三鐵水溶性轉化：配置質量百分比濃度為3～4％的十六烷基三甲基溴化胺水溶液；攪拌下，將超順磁性四氧化三鐵氯仿溶液加入到上述的十六烷基三甲基溴化胺溶液中，攪拌均勻后去除氯仿，得到SPIO@CTAB溶液；其中十六烷基三甲基溴化胺的質量和鐵元素質量比例為：30∶1～40∶1；

b.CTAB包裹超順磁性四氧化三鐵的表面氨基化：將步驟a所得SPIO@CTAB溶液用去離子水稀釋10～13倍后，加入氨水使反應在pH為9～14的條件下進行，攪拌下加熱至40-70℃，將正硅酸乙酯緩慢加入到上述反應液中，加入速度為1ml/h～2ml/h，攪拌反應1小時后，再緩慢加入氨丙基三乙氧基硅，攪拌反應4小時后停止；調節反應液的pH為5～7，在13000r/min的轉速下離心10min，沉淀用pH＝6.0的磷酸鹽緩沖溶液離心洗滌，最后得到SPIO@SiO₂的磷酸鹽緩沖溶液；其中正硅酸乙酯、氨丙基三乙氧基硅和溶液中鐵元素的質量比為：96∶25∶1；