[發明專利]一種人血清中酶活性穩定的處理方法

有效

• 申請號: 201010148822.6
• 申請日: 2010-04-16
• 公開（公告）號: CN102221490A
• 公開（公告）日: 2011-10-19
• 發明（設計）人: 陳寶榮;邵燕;孫慧穎;胡濱;陳琦;李玲;李月玲
• 申請（專利權）人: 北京航天總醫院
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28;G01N1/42;G01N1/34
• 代理公司: 核工業專利中心 11007
• 代理人: 程旭輝

1.一種人血清中酶活性穩定的處理方法，包括以下步驟：

步驟一，血清收集：收集血液采集當日新鮮人血清，放置在密閉容器中，凍至-20——-80℃以下，在冰柜中保存；

步驟二，不穩定成分去除

(1)將裝有人血清的容器從冰柜取出，在室溫下自然放置4-8小時，至肉眼觀察容器中塊狀冰凍血清完全溶解后，在-20——-80℃以下冷凍2小時以上；

(2)將裝有人血清的容器在2-10℃下放置10小時以上，至肉眼觀察容器中塊狀冰凍血清完全溶解后，再在-20——-80℃以下冷凍2小時以上；

(3)用10——20℃水沖洗裝有人血清容器的外表面，沖至肉眼觀察容器中塊狀冰凍血清完全溶解，使人血清中引起酶活性不穩定的各種蛋白質、凝血因子、離子、代謝物等物質由易變狀態轉化為處于相對穩定的狀態；

步驟三、纖維蛋白等雜質去除，采用濾紙濾除血清中的纖維蛋白絲、各種抗原抗體復合物和蛋白復合顆粒等雜質。

步驟四、無菌處理，經步驟三處理過的人血清在常規無菌條件下使用微孔濾膜進行無菌過濾。

步驟五、分裝保存，包括以下步驟；

(1)選用可密閉、防凍、不易破損的血清存儲容器分裝血清樣本。

(2)對血清存儲容器進行無菌處理。

(3)在無菌狀態下檢查各血清存儲容器是否密閉。

(4)無菌處理后的血清樣本在無菌條件下采用移液裝置進行分裝，分裝過程應控制在3小時以內(實施例)。

(5)密閉各血清存儲容器并確認。

(6)標記。

(7)存儲于-80℃以下冰柜儲存。

步驟六、無菌狀態檢查，分別取分裝過程的開始、中間、最后三支人血清樣品進行血液培養，驗證人血清是否處于無菌狀態；如果三支人血清樣品均為無菌狀態，則表明血清制備無菌過程合格，操作步驟結束；如果一個或多個人血清樣品未處于無菌狀態，則重復操作步驟四、步驟五和步驟六，直至血清制備無菌過程合格為止。

2.如權利要求1所述的一種人血清中酶活性穩定的處理方法，其特征在于步驟一中新鮮人血清冷凍保存溫度范圍為-20～-80℃。

3.如權利要求1所述的一種人血清中酶活性穩定的處理方法，其特征在于步驟二第(2)步中人血清的放置溫度為2-10℃。

4.如權利要求1所述的一種人血清中酶活性穩定的處理方法，其特征在于步驟三中使用的濾紙為低——高速∮15-30cm定性濾紙。

5.如權利要求1所述的一種人血清中酶活性穩定的處理方法，其特征在于步驟四中使用的微孔濾膜為∮50-2000mm、孔徑0.20-0.80um的微孔濾膜無菌過濾。