[發(fā)明專利]基于多種益生菌發(fā)酵培養(yǎng)物的微生物復合制劑的制備方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201010145967.0
• 申請日: 2010-04-02
• 公開（公告）號: CN101805698A
• 公開（公告）日: 2010-08-18
• 發(fā)明（設計）人: 孫世璋;袁歆
• 申請（專利權）人: 孫世璋;袁歆
• 主分類號: C12N1/00
• 分類號: C12N1/00;C12N1/18;C12N1/20;C12R1/865;C12R1/125;C12R1/23;C12R1/38;C12R1/01
• 代理公司: 江陰市同盛專利事務所 32210
• 代理人: 唐紉蘭

(一)技術領域

本發(fā)明涉及一種微生物復合制劑。具體地說是涉及一種基于多種益生菌的發(fā)酵培養(yǎng)物的復合微生物制劑及其應用。屬于微生物制劑領域。

(二)背景技術

由于農藥、化肥、抗生素和激素的大量使用給生態(tài)環(huán)境和農產品品質帶來了日趨嚴重的影響。為此，需采用微生物制劑來改良生態(tài)環(huán)境。目前，已經上市的微生物制劑，大多是單一菌或簡單的復合菌制劑，因而其功能都較為單一，用于種植業(yè)和養(yǎng)殖業(yè)時僅能針對肥料或飼料的一項或幾項指標進行改良；在很多復合菌制劑的制備過程中，部分企業(yè)盲目的認為加入的菌的種類越多越好，而將互相拮抗菌放在了一起；有的由于菌種選用不當，或使用的培養(yǎng)基營養(yǎng)成分不均衡或，酸堿度、溫度等關鍵性參數設定存在偏差，造成活菌含量低，雜菌多，水分含量偏高等問題，影響了產品的質量及其使用效果。

(三)發(fā)明內容

本發(fā)明的目的在于克服上述不足，提供一種功能多、制品中活菌數量高，成品保存期長的基于多種益生菌發(fā)酵培養(yǎng)物的微生物復合制劑的制備方法。

本發(fā)明的目的是這樣實現的：一種基于多種益生菌發(fā)酵培養(yǎng)物的微生物復合制劑的制備方法，所述多種益生菌包括啤酒酵母菌(好氧菌)、枯草芽孢桿菌(厭氧菌)、嗜酸乳桿菌(兼性厭氧菌)、沼澤紅假單胞菌(兼性厭氧菌)和菌糞腸球菌(兼性厭氧菌)，所述制備方法包括培養(yǎng)基的制備和發(fā)酵工藝：

一、培養(yǎng)基的制備

a)用于啤酒酵母菌(好氧菌)發(fā)酵的培養(yǎng)基

用于啤酒酵母發(fā)酵菌的培養(yǎng)基，包含以下重量配比的原料：蜂蜜50-200份、紅糖300-900份、磷酸二氫鉀1-5份、磷酸氫二鉀1-5份、硫酸亞鐵80-160份、硫酸錳5-20份、硫酸銅3-10份、硫酸鋅8-20份、硼酸8-40份、鉬酸銨0.5-1份和水5000-8000份；

b)用于嗜酸乳桿菌、沼澤紅假單胞菌和糞腸球菌(兼性厭氧菌)發(fā)酵的培養(yǎng)基

用于嗜酸乳桿菌、沼澤紅假單胞菌和糞腸球菌發(fā)酵的培養(yǎng)基包含以下重量配比的原料：蜂蜜50-200份、紅糖300-900份、磷酸二氫鉀1-5份、磷酸氫二鉀1-5份、硫酸亞鐵80-160份、硫酸錳5-20份、硫酸銅3-10份、硫酸鋅8-20份、硼酸8-40份、鉬酸銨0.5-1份和水5000-8000份；

c)用于啤酒酵母、嗜酸乳桿菌、沼澤紅假單胞菌和糞腸球菌發(fā)酵后混合，再加入枯草芽孢桿菌菌種混合均勻后，再次發(fā)酵的培養(yǎng)基

用于啤酒酵母、嗜酸乳桿菌、沼澤紅假單胞菌和糞腸球菌發(fā)酵后混合，再加入枯草芽孢桿菌菌種混合均勻后，再次發(fā)酵的培養(yǎng)基包含以下重量配比的原料：腐植酸鈉3-8份，紅糖50-90份，蜂蜜10-30份和水3000-5000份。

二、發(fā)酵工藝

a)啤酒酵母(好氧菌)發(fā)酵

按所述配方將蜂蜜、紅糖、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、硫酸亞鐵、硫酸錳、硫酸銅、硫酸鋅、硼酸、鉬酸銨和水置入發(fā)酵罐中，85℃-95℃滅菌30-40分鐘后待溫度降至30-35℃時，加入啤酒酵母菌種，充分攪拌40-60分鐘，將溫度控制在30-40℃，發(fā)酵36-48小時，得啤酒酵母菌培養(yǎng)物，所述啤酒酵母菌種的加入量占其培養(yǎng)基總量的重量百分比為0.1％-0.5％；

b)嗜酸乳桿菌、沼澤紅假單胞菌和糞腸球菌(兼性厭氧菌)的發(fā)酵

按所述配方將蜂蜜、紅糖、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、硫酸亞鐵、硫酸錳、硫酸銅、硫酸鋅、硼酸、鉬酸銨和水置入發(fā)酵罐中，85℃-95℃滅菌30-40分鐘后待溫度降至30-35℃時，加入嗜酸乳桿菌、沼澤紅假單胞菌和糞腸球菌，充分攪拌40-60分鐘，將溫度控制在25-35℃，發(fā)酵36-48小時，得嗜酸乳桿菌培養(yǎng)物、沼澤紅假單胞菌培養(yǎng)物和糞腸球菌培養(yǎng)物，所述嗜酸乳桿菌、沼澤紅假單胞菌和糞腸球菌的加入量占其培養(yǎng)基總量的重量百分比分別為0.05％-0.4％、0.01％-0.2％和0.1％-0.5％；

c)枯草芽孢桿菌(厭氧菌)的發(fā)酵

按所述配方將腐植酸鈉、紅糖、蜂蜜和水置入發(fā)酵罐中，加入碳酸氫鈉調節(jié)pH為7-7.5，加熱至溫度為85-95℃滅菌30-40分鐘，后待溫度降至30-35℃時，加入所述發(fā)酵工藝a)和b)的培養(yǎng)物的混合物，再加入枯草芽孢桿菌菌種，攪拌后溫度控制在30-40℃，將發(fā)酵罐中大氣壓抽負壓至0.1-0.3個大氣壓，發(fā)酵72-96小時得到成品。其中所述枯草芽孢桿菌的加入量占所述用于啤酒酵母、嗜酸乳桿菌、沼澤紅假單胞菌和糞腸球菌發(fā)酵后混合，再加入枯草芽孢桿菌菌種混合均勻后，再次發(fā)酵的培養(yǎng)基總量的重量百分比分別為0.01％-0.05％。