[發明專利]基于多種益生菌發酵培養物的微生物復合制劑的制備方法

無效

• 申請號: 201010145967.0
• 申請日: 2010-04-02
• 公開（公告）號: CN101805698A
• 公開（公告）日: 2010-08-18
• 發明（設計）人: 孫世璋;袁歆
• 申請（專利權）人: 孫世璋;袁歆
• 主分類號: C12N1/00
• 分類號: C12N1/00;C12N1/18;C12N1/20;C12R1/865;C12R1/125;C12R1/23;C12R1/38;C12R1/01
• 代理公司: 江陰市同盛專利事務所 32210
• 代理人: 唐紉蘭

1.一種基于多種益生菌發酵培養物的微生物復合制劑的制備方法，其特征在于所述多種益生菌包括啤酒酵母菌、枯草芽孢桿菌、嗜酸乳桿、沼澤紅假單胞菌和菌糞腸球菌，所述制備方法包括培養基的制備和發酵工藝：

一、培養基的制備

a)用于啤酒酵母菌發酵的培養基

用于啤酒酵母發酵菌的培養基，包含以下重量配比的原料：蜂蜜50-200份、紅糖300-900份、磷酸二氫鉀1-5份、磷酸氫二鉀1-5份、硫酸亞鐵80-160份、硫酸錳5-20份、硫酸銅3-10份、硫酸鋅8-20份、硼酸8-40份、鉬酸銨0.5-1份和水5000-8000份；

b)用于嗜酸乳桿菌、沼澤紅假單胞菌和糞腸球菌發酵的培養基

用于嗜酸乳桿菌、沼澤紅假單胞菌和糞腸球菌發酵的培養基包含以下重量配比的原料：蜂蜜50-200份、紅糖300-900份、磷酸二氫鉀1-5份、磷酸氫二鉀1-5份、硫酸亞鐵80-160份、硫酸錳5-20份、硫酸銅3-10份、硫酸鋅8-20份、硼酸8-40份、鉬酸銨0.5-1份和水5000-8000份；

c)用于啤酒酵母、嗜酸乳桿菌、沼澤紅假單胞菌和糞腸球菌發酵后混合，再加入枯草芽孢桿菌菌種混合均勻后，再次發酵的培養基

用于啤酒酵母、嗜酸乳桿菌、沼澤紅假單胞菌和糞腸球菌發酵后混合，再加入枯草芽孢桿菌菌種混合均勻后，再次發酵的培養基包含以下重量配比的原料：腐植酸鈉3-8份，紅糖50-90份，蜂蜜10-30份和水3000-5000份，

二、發酵工藝

a)啤酒酵母發酵

按所述配方將蜂蜜、紅糖、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、硫酸亞鐵、硫酸錳、硫酸銅、硫酸鋅、硼酸、鉬酸銨和水置入發酵罐中，85℃-95℃滅菌30-40分鐘后待溫度降至30-35℃時，加入啤酒酵母菌種，充分攪拌40-60分鐘，將溫度控制在30-40℃，發酵36-48小時，得啤酒酵母菌培養物，所述啤酒酵母菌種的加入量占其培養基總量的重量百分比為0.1％-0.5％；

b)嗜酸乳桿菌、沼澤紅假單胞菌和糞腸球菌的發酵

按所述配方將蜂蜜、紅糖、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、硫酸亞鐵、硫酸錳、硫酸銅、硫酸鋅、硼酸、鉬酸銨和水置入發酵罐中，85℃-95℃滅菌30-40分鐘后待溫度降至30-35℃時，加入嗜酸乳桿菌、沼澤紅假單胞菌和糞腸球菌，充分攪拌40-60分鐘，將溫度控制在25-35℃，發酵36-48小時，得嗜酸乳桿菌培養物、沼澤紅假單胞菌培養物和糞腸球菌培養物，所述嗜酸乳桿菌、沼澤紅假單胞菌和糞腸球菌的加入量占其培養基總量的重量百分比分別為0.05％-0.4％、0.01％-0.2％和0.1％-0.5％；

c)枯草芽孢桿菌的發酵

按所述配方將腐植酸鈉、紅糖、蜂蜜和水置入發酵罐中，加入碳酸氫鈉調節pH為7-7.5，加熱至溫度為85-95℃滅菌30-40分鐘，后待溫度降至30-35℃時，加入所述發酵工藝a)和b)的培養物的混合物，再加入枯草芽孢桿菌菌種，攪拌后溫度控制在30-40℃，將發酵罐中大氣壓抽負壓至0.1-0.3個大氣壓，發酵72-96小時得到成品，其中所述枯草芽孢桿菌的加入量占所述用于啤酒酵母、嗜酸乳桿菌、沼澤紅假單胞菌和糞腸球菌發酵后混合，再加入枯草芽孢桿菌菌種混合均勻后，再次發酵的培養基總量的重量百分比分別為0.01％-0.05％，

所述糞腸球菌、枯草芽孢桿菌、嗜酸乳桿菌、沼澤紅假單胞菌和啤酒酵母五種益生菌發酵的菌種的重量配比為：1∶0.8-2.5∶0.8-1.2∶0.8-3.5∶1.5-3.0。