[發明專利]一種快速定量線蟲存活率的方法及試劑盒

有效

• 申請號: 201010138624.1
• 申請日: 2010-04-03
• 公開（公告）號: CN102213672A
• 公開（公告）日: 2011-10-12
• 發明（設計）人: 李紅玉;周婷;支德娟
• 申請（專利權）人: 李紅玉
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01N1/30
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種快速定量線蟲存活率的方法，采用染料對線蟲進行染色，由于活線蟲著色，死線蟲不著色，且光吸收值與活線蟲的數量成正比，從而直接可反映線蟲的存活率，其特征在于該方法應用的染料是紅四氮唑（2,3,5-Triphenyltetrazolium?chloride，TTC），分子式為C₁₉H₁₅ClN₄。

2.根據權利要求1所述的一種快速定量線蟲存活率的方法，其特征在于該方法中的線蟲是自由生活的種類，或者是寄生生活的種類，優選秀麗隱桿線蟲（Caenorhabditis?elegans）。

3.根據權利要求1至2中任意一項所述的一種快速定量線蟲存活率的方法，其特征在于該方法中的線蟲是處于任一發育階段的線蟲，自由生活的線蟲是選自一期幼體線蟲至成蟲的任一發育階段線蟲，寄生生活的是自由生活時期的幼體線蟲。

4.根據權利要求1至3中任意一項所述的一種快速定量線蟲存活率的方法，其特征在于染色溫度為4℃～35℃、染料濃度為0.1%～20%、染色時間為5min～45min。

5.根據權利要求1至4中任意一項所述的一種快速定量線蟲存活率的方法，其特征在于應用的線蟲數量為15～1500條。

6.根據權利要求1至5任意一項所述的一種快速定量線蟲存活率的方法，其特征在于該方法采用二甲基亞砜（DMSO）或甲醇將在線蟲體內顯色的染料溶出。

7.根據權利要求1至5任意一項所述的一種快速定量線蟲存活率的方法，其特征在于染色后還可以采用甘油作為透明劑，然后采用酶標儀直接測定吸光值。

8.根據權利要求1至7任意一項所述的一種快速定量線蟲存活率的方法，其特征在于該方法在新藥篩選、農藥篩選、環境評價及水質評價領域應用。

9.一種快速定量線蟲存活率的試劑盒，其特征在于該試劑盒含有染料紅四氮唑（2,3,5-Triphenyltetrazolium?chloride，TTC），分子式為C₁₉H₁₅ClN₄。

10.一種快速定量線蟲存活率的試劑盒，其特征在于該試劑盒可以含有線蟲，其中的線蟲是自由生活的種類，或者是寄生生活的種類，優選秀麗隱桿線蟲（Caenorhabditis?elegans）。

11.根據權利要求9至10中任意一項所述的一種快速定量線蟲存活率的試劑盒，其特征在于該試劑盒中的線蟲是處于任一發育階段的線蟲，自由生活的線蟲是選自一期幼體線蟲至成蟲的任一發育階段線蟲，寄生生活的是自由生活時期的幼體線蟲。

12.根據權利要求9至11中任意一項所述的一種快速定量線蟲存活率的試劑盒，其特征在于染色溫度為4℃～35℃、染料濃度為0.1%～20%、染色時間為5min～45min。

13.根據權利要求9至12中任意一項所述的一種快速定量線蟲存活率的試劑盒，其特征在于應用的線蟲數量為15～1500條。

14.根據權利要求9至13任意一項所述的一種快速定量線蟲存活率的試劑盒，其特征在于該試劑盒含有二甲基亞砜（DMSO）或甲醇。

15.根據權利要求9至14任意一項所述的一種快速定量線蟲存活率的試劑盒，其特征在于該試劑盒含有甘油。

16.根據權利要求9至15任意一項所述的一種快速定量線蟲存活率的試劑盒，其特征在于該試劑盒在新藥篩選、農藥篩選、環境評價及水質評價領域應用。