[發明專利]利用染色體加倍改良萬壽菊基因型的方法

無效

• 申請號: 201010103440.1
• 申請日: 2010-01-27
• 公開（公告）號: CN101766119A
• 公開（公告）日: 2010-07-07
• 發明（設計）人: 何燕紅;郭冬;胡燕;葉要妹;包滿珠
• 申請（專利權）人: 華中農業大學
• 主分類號: A01H1/08
• 分類號: A01H1/08;A01C1/00;A01G31/02;C12Q1/68
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務所 42001
• 代理人: 王敏鋒

1.一種利用染色體加倍改良萬壽菊基因型的方法，其特征在于，采用秋水仙素溶液處理萬壽菊雄性不育兩用系的種子或莖尖，使其染色體數目加倍，實現基因型改良，其步驟如下：A、萬壽菊種子染色體加倍：

①催芽處理：將萬壽菊雄性不育兩用系的飽滿種子放入墊有用清水潤濕的濾紙的培養皿中催芽處理，培養溫度為25℃，得到萌動的種子；

②秋水仙素加倍處理：將步驟①的萌動種子用0.05％濃度的秋水仙素溶液浸泡，浸泡時間為3～6小時，在浸泡過程中不斷攪拌，實現染色體加倍的目的；

③清水沖洗解除處理：倒出秋水仙素溶液，將處理過的萬壽菊種子放入三角瓶中，用紗布綁扎瓶口，將三角瓶放在流水下沖洗30分鐘；

④栽培管理：將步驟③水洗后的萬壽菊種子播于盛有栽培基質的穴盤中，一穴一粒，兩個月后移栽到盛有盆土的瓦盆中，所述的栽培基質為泥炭和珍珠巖按重量份的比例為3∶1混合，盆土為園土+腐葉土+黃沙按重量份的比例為3∶2∶1配制；

⑤染色體倍性鑒定：秋水仙素加倍處理的萬壽菊植株開花后分別用形態鑒定法、氣孔鑒定法和流式細胞儀鑒定法確定萬壽菊染色體數目的倍性。或

B、萬壽菊莖尖染色體加倍：

①催芽處理：選取萬壽菊雄性不育兩用系的飽滿種子放在墊有清水潤濕的濾紙的培養皿中，于25℃下培養，待種子萌動后，播種到穴盤，穴盤的栽培基質為泥炭和珍珠巖，按重量份的比例為3∶1混合；

②秋水仙素加倍處理：待萬壽菊的兩片子葉剛剛展開，立即用脫脂棉球包裹幼苗的生長點，每隔4小時用0.025％濃度的秋水仙素溶液滴定莖尖，連續處理2天，處理過程中在所述穴盤上方覆蓋遮陽網，以保持脫脂棉球濕潤；

③流水淋洗解除處理：步驟②處理2天后，摘除脫脂棉球，用清水淋洗萬壽菊植株的生長點，以解除秋水仙素處理；

④栽培管理：兩個月后，將秋水仙素處理莖尖的植株移栽到瓦盆中，盆土的栽培基質為園土+腐葉土+黃沙，按重量份的比例為3∶2∶1配制；

⑤染色體數目倍性鑒定：秋水仙素加倍處理的萬壽菊植株開花后分別用形態鑒定法、氣孔鑒定法和流式細胞儀鑒定法確定萬壽菊的染色體加倍情況。

2.權利1所述的方法在萬壽菊基因型改良上的應用。