[發(fā)明專利]用低劑量MPTP建立雄性獼猴慢性帕金森病模型的方法

無效

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• 申請日: 2010-01-28
• 公開（公告）號: CN101779609A
• 公開（公告）日: 2010-07-21
• 發(fā)明（設計）人: 胡新天;馬原野;李燕皎;晏婷;牛海晨
• 申請（專利權）人: 中國科學院昆明動物研究所;昆明亞靈生物科技有限公司
• 主分類號: A01K67/027
• 分類號: A01K67/027
• 代理公司: 昆明科陽知識產權代理事務所 53111
• 代理人: 李行健

技術領域

本發(fā)明屬生命科學技術領域，具體涉及一種建立帕金森病靈長類動物模型的方法。

背景技術：

帕金森病(PD)是僅次于阿爾茨海默病的第二大中樞神經系統退行性疾病。該病一般在50歲至65歲開始發(fā)病，發(fā)病率隨年齡增長而逐漸增加，60歲發(fā)病率約為1‰，70歲發(fā)病率達3‰至5‰。帕金森病早期主要表現包括靜止性震顫、肌強直、行動緩慢、動作啟動困難以及姿勢異常等。靜止性震顫即患者的手或臂不受控制地發(fā)抖，在休息時出現或情緒緊張時加重；其他早期癥狀包括開始活動時感到困難，其后雙臂和雙腿經常震顫，上肢不能作精細運動，乃致日常生活不能自理，如穿衣、洗漱感覺困難。帕金森病還常伴有抑郁、焦慮、肢體酸痛不適、多汗、流涎等。因此，帕金森病給家庭社會帶來沉重的負擔。

當基底節(jié)中多巴胺(dopamine，DA)含量減少70％時，才開始出現臨床癥狀。因此，去醫(yī)院就診的帕金森病患者腦內已出現不可逆的損傷。要在疾病早期進行診斷，建立一個合適的動物模型顯得猶為重要。幾十年來，研究者建立了多種多樣的帕金森病動物模型。從最早的利血平模型、甲基苯丙胺模型到6-羥多巴模型和1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氫吡啶模型(MPTP模型)。最近發(fā)現系統的給予農藥殺蟲劑魚藤酮能在大鼠模型上產生明確的PD癥狀。

利血平和甲基苯丙胺都是通過耗竭腦內單胺類神經遞質使動物出現骨骼肌僵硬、震顫、舔毛等與帕金森癥相似的癥狀。這兩種模型都屬于急性損傷模型，不能完全復制原發(fā)性帕金森病的病理變化。并且實驗對象為嚙齒類動物，不能為人類帕金森病提供很好的信息。

6-OHDA與DA有很強的化學相似性，因此能在兒茶酚胺能神經元內特異性聚集，對大鼠、小鼠、貓和靈長類動物均有神經毒性。6-OHDA(8～12μg)注射于紋狀體或內側前腦束，可以造成大鼠的運動平衡障礙，如軀體彎曲、運動不能、肌強直等。隨著病程延長，動物會出現吞咽和呼吸困難。6-OHDA單側損毀制備的PD動物模型在病理、生化方面的表現同人類PD有不少相似之處，如黑質DA能神經元變性、死亡、缺失，膠質細胞增生，黑質和紋狀體TH活性及DA含量降低。另一優(yōu)點是在系統注射DA受體激動劑L-DOPA或促DA釋放藥物后，可導致不對稱的、能夠定量化的異常運動行為。因此，藥物誘發(fā)的旋轉行為的量化是評價抗PD藥物療效穩(wěn)定可靠的指標。缺點是該模型仍屬急性損傷模型，不能模擬PD慢性進行性病程特點，不能用于長期神經保護研究中。病理方面也與人類PD有一定差異，如無細胞內包涵體Lewy小體。而且6-OHDA不能透過血腦屏障，只能通過腦內直接給藥才能造成黑質神經元的損傷。這樣，為在靈長類上的應用增加了一定的難度。

魚藤酮是一種從植物中提取的天然有機殺蟲劑，具有高親脂性，容易透過血腦屏障，對腦組織線粒體復合酶I具有很強的抑制作用。制備模型的神經毒素來源于自然環(huán)境，其慢性暴露的制作方式能較好地模擬PD發(fā)病過程，在病理、生化、發(fā)病機制、行為改變等方面均能較好地模擬人類PD的相關特征。由于產生類似Lewy小體的α-synuclein陽性包涵體，它成為研究Lewy小體形成的分子機制的有效工具。該模型對研究環(huán)境因素與PD病因及發(fā)病機制之間的關系具有獨特的價值。其慢性、進行性病程特征還特別適合PD的神經保護治療研究。缺點是魚藤酮因為其親脂性，可以進入所有細胞中，并不選擇性的累積在DA能神經元中。同時，制備過程費時、費力，不同動物個體的制備效果不一(有些動物無明顯毒性效應)。