[發(fā)明專利]兔抗人MARVELD1多肽多克隆抗體及其制備方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201010032464.2 | 申請日： | 2010-01-14 |
| 公開（公告）號： | CN101747415A | 公開（公告）日： | 2010-06-23 |
| 發(fā)明（設計）人： | 李鈺;王山;胡建燃;韓放;史明 | 申請（專利權）人： | 哈爾濱工業(yè)大學 |
| 主分類號： | C07K7/08 | 分類號： | C07K7/08;C07K16/18 |
| 代理公司： | 哈爾濱市哈科專利事務所有限責任公司 23101 | 代理人： | 崔東輝 |
| 地址： | 150001 黑龍*** | 國省代碼： | 黑龍江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 兔抗人 marveld1 多肽 克隆 抗體 及其 制備 方法 | ||
1.一種MARVELD1多肽，其特征在于，氨基酸序列為： ProProProArgGlnProProProGlnAlaArgAlaAlaArgCys。
2.一種兔抗人MARVELD1多肽多克隆抗體的制備方法，其特征在于：步驟 如下：
步驟一：經DNAStar軟件分析后，確定MARVELD1蛋白N末端4-17位14個 氨基酸作為其抗原表位，并在肽鏈羧基末端添加一個半胱氨酸，形成的MARVELD1 多肽的氨基酸序列為：
ProProProArgGlnProProProGlnAlaArgAlaAlaArgCys；
步驟二：用多肽自動合成儀合成MARVELD1多肽，純化后與載體蛋白KLH偶 聯(lián)，形成MARVELD1多肽-KLH復合蛋白；
步驟三：將乳化后的MARVELD1多肽-KLH在兔背部皮下注射，共進行四次免 疫；
步驟四：收集、分離得到含有兔抗人MARVELD1多肽抗體的血清；
步驟五：將MARVELD1多肽與溴化氰活化的Sepharose?4B偶聯(lián)，制備多肽親 和層析柱；
步驟六：將含有兔抗人MARVELD1多肽抗體的血清加入到步驟五制備的層析 柱中，放置于4℃孵育過夜后，洗脫抗體，即得到抗人MARVELD1多肽抗體。
3.根據權利要求2所述的兔抗人MARVELD1多肽多克隆抗體的制備方法，其 特征在于：所述的MARVELD1多肽的純化，采用HPLC對其進行純化，使MARVELD1 多肽的純度達到95％以上。
4.根據權利要求2所述的兔抗人MARVELD1多肽多克隆抗體的制備方法，其 特征在于：所述的免疫次數為四次。
5.根據權利要求2所述的兔抗人MARVELD1多肽多克隆抗體的制備方法，其 特征在于：步驟六采用免疫親和純化的方式對兔抗人MARVELD1多肽多克隆抗體 進行純化。
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