[發明專利]新型脂酶原-牛胰蛋白酶原融合蛋白有效
| 申請號： | 200980161363.0 | 申請日： | 2009-10-26 |
| 公開（公告）號： | CN102482675A | 公開（公告）日： | 2012-05-30 |
| 發明（設計）人： | 納加拉杰·戈文達帕;南迪尼·納塔拉杰;桑賈伊·蒂瓦里;帕薩·哈茲拉;穆克什·巴布阿帕·帕塔勒;戈庫爾·約蒂拉曼;克達納斯·薩斯特里 | 申請（專利權）人： | 拜康有限公司 |
| 主分類號： | C12N15/62 | 分類號： | C12N15/62;C12N15/81;C12N15/57;C12P21/06 |
| 代理公司： | 北京康信知識產權代理有限責任公司 11240 | 代理人： | 李丙林;張英 |
| 地址： | 印度卡*** | 國省代碼： | 印度;IN |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 新型 脂酶原 胰蛋白酶 融合 蛋白 | ||
1.一種融合多肽，包含融合于脂肪酶信號序列的至少一種絲氨酸蛋白酶，所述融合多肽在甲基營養酵母中表達，其中所述融合多肽具有與SEQ?ID?NO：1至少80％同源性的氨基酸序列。
2.一種融合多肽，包含融合于脂肪酶信號序列的至少一種絲氨酸蛋白酶，所述融合多肽在甲基營養酵母中表達，其中所述融合多肽具有與SEQ?ID?NO：2至少80％同源性的核苷酸序列。
3.根據權利要求1或2所述的融合多肽，其中SEQ?ID?1或2的68和69號氨基酸被氨基酸精氨酸和賴氨酸取代。
4.根據權利要求1或2所述的融合多肽，其中68號的氨基酸被酪氨酸取代。
5.權利要求1、2、3或4所述的融合多肽的應用，其中所述多肽能夠使胰島素或胰島素類似物或胰島素衍生物的前體形式轉化為它們對應的活性形式，有至少50％的步驟產率。
6.根據權利要求1或2所述的融合多肽，其中所述甲基營養酵母屬于畢赤酵母屬(Pichia?sp.)。
7.根據權利要求1或2所述的融合多肽，其中所述甲基營養酵母是巴斯德畢赤酵母(Pichia?pastoris)。
8.一種表達融合多肽的方法，所述融合多肽包括由甲基營養酵母生產的融合于脂肪酶信號序列的至少一種絲氨酸蛋白酶，所述融合多肽具有與SEQ?ID?NO?1表示的核苷酸序列或SEQ?ID?NO?2表示的氨基酸序列至少80％同源性的核苷酸序列。
9.根據權利要求8所述的方法，其中所述絲氨酸蛋白酶是胰蛋白酶原。
10.根據權利要求8所述的方法，其中所述甲基營養酵母屬于畢赤酵母屬。
11.根據權利要求8所述的方法，其中所述甲基營養酵母是巴斯德畢赤酵母。
12.一種載體，包括權利要求1、2、3、或4所述的序列。
13.一種轉化細胞，包括可表達形式的根據權利要求9的權利要求1或2所述的序列。
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