[發明專利]用于防止細胞粘附的肽和組合物及其使用方法

有效

• 申請號: 200980153314.2
• 申請日: 2009-12-28
• 公開（公告）號: CN102272147B
• 公開（公告）日: 2017-09-12
• 發明（設計）人: 阿米爾·茲洛特金
• 申請（專利權）人: 特爾哈肖梅爾醫學研究基礎設施和服務有限公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435
• 代理公司: 北京律盟知識產權代理有限責任公司11287
• 代理人: 章蕾

技術領域

本發明涉及經分離肽和其在防止細胞粘附中的用途。

背景技術

微生物可以在環境中自由游動的個別細胞(作為浮游生物)的形式生存并增殖，或其可以包圍在與各種表面和界面緊密相連的自生成聚合基質中的高度組織化多細胞群落形式生長。后一種微生物生活方式稱作生物膜。生物膜形成代表一種古老的受保護的生長模式，其使得微生物能在有害環境中存活并且使得微生物能分散并定植于新生態位中[霍爾-斯圖德利(Hall-Stoodley)等人，自然微生物學綜述(Nat Rev Microbiol.)(2004)2(2)：95-108]。

生物膜的組成復雜，并且不同微生物物種以及甚至在不同環境條件下的相同物種都各不相同。但是，生物膜形成代表微生物在環境中的正常生活方式，并且所有微生物均可產生生物膜。先前研究揭示，細菌生物膜形成的進展經過多個蛋白質譜不同的發展階段[索爾(Sauer)等人，細菌學雜志(JBacteriol.)(2002)184(4)：1140-54]，首先附著至表面上，隨后移入并分裂以形成微菌落，且最后成熟，其中涉及基質聚合物的表達。各生物膜階段內的細菌所表現的表型和所具有的特性與那些以浮游方式生長的同類細菌顯著不同[索爾等人，細菌學雜志(2004)186(21)：7312-26]。

生物膜是人類全身性感染(例如醫院內感染)的主要病因。在體內，生物膜可與各組織(例如內耳、牙齒、牙齦、肺、心臟瓣膜和泌尿生殖道)相關聯。估計有65％的人類細菌感染具有生物膜性質。此外，在形成生物膜后，微生物往往改變其特性(有時顯著改變)，從而使得通常可在懸浮培養物中殺滅生物的抗生素劑量在相同微生物呈附著或聚集生物膜形式時對所述生物完全無效(美國專利第7189351號)。

關于引入體內的產品(例如接觸鏡、中心靜脈導管、機械心臟瓣膜和起搏器)或提供進入體內的路徑的產品的一個重要問題是微生物感染和常發的生物膜形成。由于這些感染用抗生素難以治療，因此經常需要移除裝置，這對患者是創傷性的并且會增加醫療成本。因此，對于所述醫療設備，業內很久以前就開始尋找能使那些醫療設備和裝置抗微生物的手段和方法。

PCT申請案第WO 06/006172號揭示抗類淀粉試劑(例如芳香族化合物)用于抑制預存在生物膜形成或使其崩解的用途。此申請案揭示預防阿茲海默氏癥(Alzheimers)中形成類淀粉原纖維的化合物可抵抗生物膜中形成原纖維，并且斷定具有芳香族臂(aromatic arm)的氨基酸可有效抵抗生物膜。然而，此分析僅限于全長序列。

發明內容

本發明提供從包括哺乳動物和非哺乳動物在內的動物分離的天然或合成肽，其可干擾寬范圍微生物中處于初始階段的生物膜的形成。

本文所述的所有肽都顯示專門防止微生物基質粘附和所得生物膜形成的活性。其沒有通常觀察到的抗生素肽和次級代謝產物顯示的致死性殺細菌性活性，從而通過強烈的微生物“生物潛力”為快速天然選擇提供強選擇性壓力。另一方面，對微生物定植的寬范圍抑制可拮抗細菌存活的基本機制。因此，所述機制的適應性修飾由于其生命力而具有低可能性。

謝爾(Sher)等人(毒素(Toxicon)45：865-879，2005)使用生物信息學方法鑒別出由水螅表達的推定生物活性蛋白質和多肽，其可為其種間信息素系統(allomonal system)的組份。水螅顯示表達屬于射線狀孔蛋白(actinoporin)家族的刺胞動物磷脂酶A2毒素和溶細胞素的直接同源物，并且表達與類毒蛇磷脂酶、富半胱氨酸分泌性蛋白質(CRISP)、類前動力蛋白多肽和毒性脫氧核糖核酸酶類似的蛋白質。

到目前為止還沒有鑒別出在從天然來源分離的肽中負責細胞毒性活性的特定序列。

除非另有說明，否則本文所用所有技術和科學術語都具有與本發明所屬領域技術人員通常所了解的含義相同的含義。盡管在本發明的實踐或測試中可使用與本文所述方法和材料類似或等效者，但下文仍對適宜方法和材料加以闡述。倘若出現矛盾，則以本專利說明書(包括定義)為準。另外，材料、方法和實例僅為闡釋性而非限制性。

本文所用術語“包含”和“包括”或其語法變體打算用來指明所述特征、整體、步驟或組份，但不打算排除增加一個或一個以上額外特征、整體、步驟、組份或其群組。此術語涵蓋術語“由......組成”和“基本由......組成”。