[發(fā)明專利]鯊肌醇產(chǎn)生細胞和使用該細胞的鯊肌醇制造方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200980143271.X
• 申請日: 2009-10-30
• 公開（公告）號: CN102203238A
• 公開（公告）日: 2011-09-28
• 發(fā)明（設計）人: 吉田健一;蘆田均
• 申請（專利權）人: 國立大學法人神戶大學
• 主分類號: C12N1/21
• 分類號: C12N1/21;C12N1/15;C12N1/19;C12N5/10;C12N15/09;C12P19/02;C12R1/125
• 代理公司: 北京集佳知識產(chǎn)權代理有限公司 11227
• 代理人: 苗堃;金世煜

1.一種鯊肌醇產(chǎn)生細胞，至少具有鯊肌醇脫氫酶活性的蛋白質的功能發(fā)生缺損或降低。

2.根據(jù)權利要求1所述的細胞，具有2-酮肌肉肌醇脫氫酶活性的蛋白質的功能和肌醇代謝類基因簇的阻遏蛋白質的功能發(fā)生缺損或降低。

3.根據(jù)權利要求1或2所述的細胞，具有鯊肌醇脫氫酶活性的蛋白質的功能發(fā)生缺損或降低是通過人為破壞編碼具有鯊肌醇脫氫酶活性的蛋白質的基因所致。

4.根據(jù)權利要求1～3中任一項所述的細胞，鯊肌醇脫氫酶活性是將鯊肌醇的2位羥基脫氫的活性。

5.根據(jù)權利要求1～4中任一項所述的細胞，具有鯊肌醇脫氫酶活性的蛋白質是由選自以下的(a)～(c)中的任意一個DNA編碼的蛋白質：

(a)由序列號1表示的堿基序列構成的DNA；

(b)由在序列號1表示的堿基序列中取代、缺失、插入和/或添加了一個以上的核苷酸的堿基序列構成，且編碼具有鯊肌醇脫氫酶活性的蛋白質的DNA；

(c)與由序列號1表示的堿基序列構成的DNA在嚴緊條件下雜交，且編碼具有鯊肌醇脫氫酶活性的蛋白質的DNA。

6.根據(jù)權利要求1～5中任一項所述的細胞，具有鯊肌醇脫氫酶活性的蛋白質是選自以下的(a)～(c)中的任意一個蛋白質：

(a)由序列號2表示的氨基酸序列構成的蛋白質；

(b)由在序列號2表示的氨基酸序列中缺失、取代、插入和/或添加了一個以上的氨基酸的氨基酸序列構成，且具有鯊肌醇脫氫酶活性的蛋白質；

(c)由與序列號2表示的氨基酸序列具有40％以上的同源性的氨基酸序列構成，且具有鯊肌醇脫氫酶活性的蛋白質。

7.根據(jù)權利要求1～6中任一項所述的細胞，具有鯊肌醇脫氫酶活性的蛋白質依賴于NAD⁺發(fā)揮作用。

8.根據(jù)權利要求1～7中任一項所述的細胞，具有2-酮肌肉肌醇酮還原酶活性的蛋白質發(fā)揮作用。

9.根據(jù)權利要求8所述的細胞，具有2-酮肌肉肌醇酮還原酶活性的蛋白質是由選自以下的(a)～(c)中的任意一個DNA編碼的蛋白質：

(a)由序列號3表示的堿基序列構成的DNA；

(b)由在序列號3表示的堿基序列中取代、缺失、插入和/或添加了1個以上的核苷酸的堿基序列構成，且編碼具有2-酮肌肉肌醇酮還原酶活性的蛋白質的DNA；

(c)與由序列號3表示的堿基序列構成的DNA在嚴緊條件下雜交，且編碼具有2-酮肌肉肌醇酮還原酶活性的蛋白質的DNA。

10.根據(jù)權利要求8所述的細胞，具有2-酮肌肉肌醇酮還原酶活性的蛋白質是選自以下(a)～(c)中的任意一個蛋白質：

(a)由序列號4表示的氨基酸序列構成的蛋白質；

(b)由在序列號4表示的氨基酸序列中缺失、取代、插入和/或添加了一個以上的氨基酸的氨基酸序列構成，且具有2-酮肌肉肌醇酮還原酶活性的蛋白質；

(c)由與序列號4表示的氨基酸序列具有40％以上的同源性的氨基酸序列構成，且具有2-酮肌肉肌醇酮還原酶活性的蛋白質。

11.根據(jù)權利要求1～10中任一項所述的細胞，所述細胞是屬于芽孢桿菌屬的菌。

12.根據(jù)權利要求1～11中任一項所述的細胞，所述細胞是保藏編號為FERM?ABP-11185的枯草桿菌TM030株，國內(nèi)保藏編號：FERM?P-21700、國內(nèi)保藏日：2008年10月8日。

13.根據(jù)權利要求1～12中任一項所述的細胞，具有青蟹肌糖異構酶活性的蛋白質的功能也降低或缺損了。

14.一種鯊肌醇制造方法，包括在肌肉肌醇的存在下培養(yǎng)權利要求1～13中任一項所述的細胞的工序。

15.根據(jù)權利要求14所述的鯊肌醇制造方法，其還包括從進行所述培養(yǎng)的工序中獲得的培養(yǎng)濾液中除去細胞的工序，和從除去了細胞的培養(yǎng)濾液中分離鯊肌醇的工序。