[發明專利]細胞保存方法和細胞運輸方法

有效

• 申請號: 200980142214.X
• 申請日: 2009-10-23
• 公開（公告）號: CN102203241B
• 公開（公告）日: 2017-05-03
• 發明（設計）人: 一丁田洋子;田崎剛;福田始弘;鶴田仁志;谷口英樹
• 申請（專利權）人: 可樂麗股份有限公司;公立大學法人橫浜市立大學
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司72001
• 代理人: 孫秀武,高旭軼

1.細胞保存方法，其是使用具有多個微空間的細胞培養容器來保存肝細胞的細胞保存方法，

其中包括，

上述微空間通過微容器形成，

上述微容器的四邊被側壁完全地圍住，

培養工序：使肝細胞粘附于上述多個微容器的表面進行培養，在各上述微容器內形成三維結構體，

保存準備工序：在上述培養后，除去非粘附細胞后將培養基向上述細胞培養容器注入并進行保存的準備，以覆蓋上述多個微容器，

保存工序：將上述細胞培養容器密封，在維持上述三維結構體的狀態下，以使培養基不漏出，保存上述肝細胞，

上述細胞培養容器保持在10℃以上且小于20℃的溫度來保存上述肝細胞，

在上述培養工序中，各上述微容器內的上述三維結構體用上述側壁與其他的上述三維結構體隔離，以使上述三維結構體與相鄰的上述三維結構體不相接，

上述三維結構體是上述肝細胞集聚的球狀細胞團。

2.根據權利要求1所述的細胞保存方法，其特征在于，進行上述培養，以使粘附于上述表面、且在各微空間的空間內形成的三維結構體的細胞群體形成被隔離的細胞數。

3.根據權利要求1所述的細胞保存方法，其特征在于，上述多個微空間的底部面積為0.01~0.1mm²，深度為25~150μm。

4.根據權利要求1所述的細胞保存方法，其特征在于，上述肝細胞的培養為，在使肝細胞粘附并進行培養后，進一步進行培養，使其增殖、鋪展或者聚集。

5.根據權利要求1所述的細胞保存方法，其中，以1×10²~1×10⁶細胞/cm²的細胞接種密度將肝細胞接種在上述多個微空間中。

6.根據權利要求1所述的細胞保存方法，其特征在于，上述細胞團的直徑為30~200μm。

7.根據權利要求1所述的細胞保存方法，其特征在于，上述培養基含有血清、增殖因子和血中成分中的至少一種。

8.根據權利要求1所述的細胞保存方法，其特征在于，使用使氧或二氧化碳透過的膜來密封上述細胞培養容器。

9.細胞運輸方法，其是將肝細胞保存于具有多個微空間的細胞培養容器并運輸的細胞運輸方法，

其中包括，

上述微空間通過微容器形成，

上述微容器的四邊被側壁完全地圍住，

培養工序：使肝細胞粘附于上述多個微容器的表面進行培養，在各上述微容器內形成三維結構體，

保存準備工序：上述培養后，除去非粘附細胞后將培養基向上述細胞培養容器注入并進行保存的準備，以覆蓋上述多個微容器，

保存工序：將上述細胞培養容器密封，在維持上述三維結構體的狀態下，以使培養基不漏出，保存上述肝細胞，

上述細胞培養容器保持在10℃以上且小于20℃的溫度來保存上述肝細胞，

使用車輛、船舶或者航空器中的任一種運輸裝置將密封的上述細胞培養容器進行運輸，

在上述培養工序中，各上述微容器內的上述三維結構體用上述側壁與其他的上述三維結構體隔離，以使上述三維結構體與相鄰的上述三維結構體不相接，

上述三維結構體是上述肝細胞集聚的球狀細胞團。

10.根據權利要求2所述的細胞保存方法，其特征在于，上述多個微空間的底部面積為0.01~0.1mm²，深度為25~150μm。