[發明專利]蛋白分離應用中的溫度響應型聚合物顆粒

有效

• 申請號: 200980136852.0
• 申請日: 2009-09-22
• 公開（公告）號: CN102164945A
• 公開（公告）日: 2011-08-24
• 發明（設計）人: B·W·伍恩頓;M·T·W·赫恩;P·馬哈詹;K·德西爾瓦;W·R·杰克森
• 申請（專利權）人: 聯邦科學及工業研究組織;蒙納什大學
• 主分類號: C07K1/18
• 分類號: C07K1/18;B01D15/08;C08B37/12;B01D15/04;C08B15/10;C08F226/00
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 關立新;林毅斌

本申請要求了澳大利亞專利申請2008221604的優先權，其全部披露內容通過引用結合在此。

技術領域

本發明涉及一種用于從含有蛋白的溶液中分離蛋白的方法。本發明還涉及一種用于色譜分離蛋白的方法。此外，本發明還涉及用溫度響應型共聚物功能化的交聯的羥基聚合物顆粒、以及制備此類顆粒的方法。

發明背景

色譜法是一種用于分離分子混合物的技術。它涉及將混合物溶解在一種溶劑或多種溶劑的組合（一種所謂的流動相）中以形成一個溶液并且隨后使該溶液穿過一種固體（所謂的固定相）。流動相和固定相的正確組合允許了這些分子被分離（通過允許各分子與固定相優選地或選擇性地相互作用到一個不同的程度）。這種不同的相互作用允許了分子被分離并且從而被分開、分析或鑒定。色譜法流動相和固定相兩者都被改變以適合?(i)?被分離的分子的類型，(ii)?分離的規模（例如分析的、制備的或工業的），以及?(iii)?被分離的分子的所希望的功能性（例如生物活性）。流動相的例子包括乙腈、水、水性鹽溶液、甲醇、或它們的混合物，而通常的固定相包括離子交換、疏水性相互作用或親和性相互作用樹脂。出于分析型目的，并且還有為了以制備的和商業的規模來分離有價值的分子，在藥物和食品行業中廣泛地使用色譜法。

“聰明的”或“智能的”聚合物是響應于外部的物理的、化學的或電學的刺激在它們的結構和功能上經歷快速、可逆變化的材料。在“聰明聚合物”體系中，溫度是最廣泛研究的刺激因素，并且聚(N-異丙基丙烯酰胺)（PolyNIPAAm）是一種通常的并且廣泛研究的溫度響應型聚合物。

溫度響應型材料在離子交換色譜法（作為一種通用的分離工具）中具有潛力，其中所結合的目標生物分子的洗脫可以通過一種溫和的物理變化來誘導，例如在溫度上的調節。這些聰明的聚合物色譜體系在有價值的組分（特別是來自農業食品、藥物的、化學的、以及水以及其他復合原料）的有成本效益的、以環境友好的方式的分離中作出了保證。

PolyNIPAAm以及相關聚合物已經被用于分離領域中以產生溫度響應型固定相用于離子色譜法（Kobayashi?et?al.,?Analytical?Chemistry,?2003,?75?(13),?3244-3249；Sakamoto?et?al,?Journal?of?Chromatography?A,?2004,1030,?247–253；Ayano?et?al.,?Journal?of?Separation?Science,?2006,?29,?738-749）、尺寸排阻（Hosoya?et?al.,?Macromolecules,?1994,?27,?3973-3976；Adrados?et?al.,Journal?of?Chromatography?A?2001,?930?(1-2),?73-78）、疏水性相互作用（Kanazawa,?et?al.,?Analytical?Chemistry,?2000,?72,?5961-5966）、以及基于親和性的色譜分離法（Hoffman?and?Stayton,?Macromolecular?Symposia,?2004,?207,?139-151），它們使用了一系列不同的支撐材料。