[發明專利]抗-HEPCIDIN-25選擇性抗體及其用途

有效

• 申請號: 200980129864.0
• 申請日: 2009-07-29
• 公開（公告）號: CN102112489A
• 公開（公告）日: 2011-06-29
• 發明（設計）人: D·D·M·梁;欒鵬;唐鷹;D·R·威徹;P·P·亞齊
• 申請（專利權）人: 伊萊利利公司
• 主分類號: C07K16/26
• 分類號: C07K16/26;G01N33/577;A61K39/395;A61P7/06
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 黃革生;史文靜

本發明屬于醫藥領域，特別是抗人hepcidin-25的抗體的領域。更特別的，本發明涉及一些疾病的治療，例如貧血，通過向需要其的患者施用抗hepcidin-25選擇性抗體。本發明還涉及檢測hepcidin-25和/或診斷以升高的hepcidin-25水平為特征的疾病病況的方法和試劑盒，。

人hepcidin，是主要由肝細胞表達的多肽，被認為是重要的鐵調控蛋白，其負調控腸的鐵吸收、巨噬細胞的鐵再循環和從肝鐵儲藏中的鐵移動。過量產生hepcidin表現出在貧血和/或慢性疾病貧血的病理生理學中扮演主要角色。

目前，貧血和/或慢性疾病貧血的合適且有效的療法是有限的。尤其是促紅細胞生成素施用僅對所有患者的約50％有效，并與不理想的副作用相關聯。此外，由于污染、感染和鐵過載，輸血也是不理想的。

人hepcidin編碼為84個氨基酸的前原肽(prepropeptide)，含有典型的N端24個氨基酸的內質網靶向信號序列和35個氨基酸的原區(proregion)，所述原區具有共同的弗林蛋白酶(furin)切割位點，其后緊接著C端25個氨基酸的生物學活性鐵調控激素(hepcidin-25，SEQ?IDNO：1)。各種N端截短形式的hepcidin，例如hepcidin-20(例如，對于人，SEQ?ID?NO：1的氨基酸6-25)和hepcidin-22(例如，對于人，SEQ?IDNO：1的氨基酸4-25)也是已知在體內形成的。然而，即使不是唯一，hepcidin-25被認為是與人中的hepcidin生理學最相關的形式。選擇性調控hepcidin-25而非其前體或截短形式的濃度的療法是特別理想的。特別的是，選擇性結合hepcidin-25而非其前體或截短形式的抗體將為與升高的hepcidin-25水平相關的病癥的治療或診斷提供多種優勢。例如，與非選擇性的hepcidin抗體相比，高親和力的hepcidin-25選擇性抗體將降低副作用的風險，且有效治療所需的臨床劑量較低，因為治療性抗體將不結合hepcidin的生理學相關形式。盡管之前已報道過針對hepcidin的非人多克隆和單克隆抗體(參見例如，美國專利申請公開2006/0019339、2007/0224186和2008/0213277)，本領域仍然極其需要選擇性結合hepcidin-25的單克隆抗體。因此，本發明的一個方面是提供了與人hepcidin-25選擇性的結合在hepcidin-25的氨基酸1-7(含端點)中的抗體。此類抗體可用于在人中增加血清鐵水平、網織紅細胞計數、紅細胞計數、血紅蛋白和/或血細胞比容，用于治療疾病、病況或病癥，例如貧血。

另外，對hepcidin的現有免疫測定不區分活性的、生理學相關的hepcidin-25與無活性的、生理學不相關的hepcidin種類(參見例如，Kemna，E.H.等人，Haematologica，93(1)：90-7(2008)；Roe?M.A.等人，Br?J?Nutr.，97：544-9(2007)；和Luukkonen?S.和Punnonen?K.，Clin?Chem?Lab?Med.，44：1361-2(2006))。目前，目前可獲得的選擇性測定hepcidin-25的唯一方法涉及LC/MS(液相色譜/質譜)或類似的繁瑣方法，所述方法需要分離不同類型的hepcidin(參見例如，Gutierrez，J.A.等人，BioTechniques，38：S13-S17(2005)；Murphy等人，Blood，110：1048-54(2007)和Kemna，E.H.等人，Clin.Chem.，53：620-8(2007))。雖然這些測定可以是準確和精準的，它們的復雜性、昂貴和需要高水平的操作專家妨礙了它們的常規應用。因此，出于在檢測或測量hepcidin-25的免疫測定中的應用，還極其需要以高親和力選擇性結合人hepcidin-25的抗體。因此，本發明的另一個方面提供了在相對簡單但仍高敏感、強效且選擇性的免疫測定中使用hepcidin-25選擇性抗體的方法，用于在哺乳動物組織和生物學流體中檢測和測量hepcidin-25。