[發(fā)明專利]微生物同步發(fā)酵正十六烷生產(chǎn)十六碳二元酸的方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 200910256589.0 | 申請(qǐng)日： | 2009-12-30 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN102115768A | 公開（公告）日： | 2011-07-06 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 曹務(wù)波;陳遠(yuǎn)童;曹荀梅子 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 曹務(wù)波 |
| 主分類號(hào)： | C12P7/44 | 分類號(hào)： | C12P7/44;C12R1/74 |
| 代理公司： | 濟(jì)南舜源專利事務(wù)所有限公司 37205 | 代理人： | 辛向東 |
| 地址： | 265200 山*** | 國(guó)省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 微生物 同步 發(fā)酵 十六 生產(chǎn) 二元酸 方法 | ||
1.一種微生物同步發(fā)酵正十六烷生產(chǎn)十六碳二羧酸方法，其特征在于所用的微生物為熱帶假絲酵母(Candida?tropicalis)ly-6，該菌種已在中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心保藏，保藏號(hào)為：CCTCC?NO：M209224。
2.如權(quán)利要求1所述微生物同步發(fā)酵正十六烷生產(chǎn)十六碳二羧酸方法，其特征在于以熱帶假絲酵母(Candida?tropicalis)ly-6為發(fā)酵種子，在以正十六烷為基質(zhì)的培養(yǎng)基中同步發(fā)酵，生產(chǎn)α，ω-十六碳二元酸。
3.如權(quán)利要求2所述微生物同步發(fā)酵正十六烷生產(chǎn)十六碳二羧酸方法，其特征在于所說的發(fā)酵種子是由熱帶假絲酵母(Candida?tropicalis)ly-6菌株經(jīng)斜面培養(yǎng)、液體種子培養(yǎng)基培養(yǎng)，獲得一級(jí)種子罐的種子；所使用的固體斜面培養(yǎng)基為10個(gè)巴林糖度的麥芽汁加2％瓊脂制成；麥芽汁液體培養(yǎng)基為10個(gè)巴林的麥芽汁；液體種子培養(yǎng)基包含：KH2PO46-8克/升，蔗糖20-40克/升，酵母膏2-4克/升，玉米漿2-4克/升，尿素2-4克/升，消泡劑400PPM，自來水配置，PH值5左右。
4.如權(quán)利要求2所述微生物同步發(fā)酵正十六烷生產(chǎn)十六碳二羧酸方法，其特征在于所說的同步發(fā)酵過程如下：
發(fā)酵培養(yǎng)基的主要組分為：堿金屬磷酸鹽4-10克/升，氯化鈉0.5-2.0克/升，尿素0.5-2.0克/升，丙烯酸0.5-2.0毫升/升，表面活性劑吐溫600.1-2.0克/升；其中堿金屬磷酸鹽可從KH2PO4、NaH2PO4、K2HPO4和Na2HPO4中選一種；
發(fā)酵基質(zhì)正烷烴和發(fā)酵培養(yǎng)基在混合發(fā)酵液中的用量比例為：含有10-40％(v/v)的正烷烴和90-60％(v/v)發(fā)酵培養(yǎng)基。
具體發(fā)酵過程如下：
將前述制備的發(fā)酵種子，按發(fā)酵培養(yǎng)基量的15-25％(V/V)的用量，接入PH值為6.5-8.5含有10-40％(v/v)的正烷烴和90-60％(v/v)發(fā)酵培養(yǎng)基的混合液中，在24-34℃下通氣發(fā)酵48-164小時(shí)；發(fā)酵28小時(shí)以前，PH控制在7.1以下，28-60小時(shí)PH控制在7.5以下，60-120小時(shí)，PH控制在8.0以下，120小時(shí)后PH控制在8.5以下，在60、90、120小時(shí)，分別補(bǔ)加正十六烷，使發(fā)酵液中正烷烴濃度始終≥5％(V/V)。
5.如權(quán)利要求2所述微生物同步發(fā)酵正十六烷生產(chǎn)十六碳二羧酸方法，其特征在于所說的同步發(fā)酵過程如下：
發(fā)酵培養(yǎng)基的主要組分為：堿金屬磷酸鹽4-10克/升，氯化鈉0.5-2.0克/升，尿素0.5-2.0克/升，丙烯酸0.5-2.0毫升/升，表面活性劑吐溫600.1-2.0克/升以及一些其他公知的營(yíng)養(yǎng)源；其中堿金屬磷酸鹽可從KH2PO4、NaH2PO4、K2HPO4和Na2HPO4中選一種；
發(fā)酵基質(zhì)正烷烴和發(fā)酵培養(yǎng)基在混合發(fā)酵液中的用量比例為：15-25％(v/v)的正烷烴和75-85％(V/V)發(fā)酵培養(yǎng)基。
具體發(fā)酵過程如下：
將前述制備的發(fā)酵種子，按發(fā)酵培養(yǎng)基量的15-25％(V/V)的用量，接入PH值為6.5-8.5含有15-25％(v/v)的正烷烴和85-75％(v/v)發(fā)酵培養(yǎng)基的混合液中，26-32℃下通氣發(fā)酵48-164小時(shí)；發(fā)酵28小時(shí)以前，PH控制在7.1以下，28-60小時(shí)PH控制在7.5以下，60-120小時(shí)，PH控制在8.0以下，120小時(shí)后PH控制在8.5以下，在60、90、120小時(shí)，分別補(bǔ)加正十六烷，使發(fā)酵液中正烷烴濃度始終≥5％(V/V)。
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