[發明專利]用于石房蛤毒素的快速檢測的微流控芯片及其制備方法

有效

• 申請號: 200910247557.4
• 申請日: 2009-12-30
• 公開（公告）號: CN101839913A
• 公開（公告）日: 2010-09-22
• 發明（設計）人: 隋國棟;劉思秀;張金玲;趙望;劉超
• 申請（專利權）人: 復旦大學
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/544;G01N33/552;G01N33/52;G01N1/28
• 代理公司: 上海正旦專利代理有限公司 31200
• 代理人: 陸飛;盛志范

1.一種用于石房蛤毒素快速檢測的微流控芯片，其特征在于該芯片以光學透明材料為基材，依次由樣品通道層，閥門控制層及基片層構成；其中，樣品通道層中有樣品富集及免疫分析模塊，該樣品富集及免疫分析模塊由一個或幾個并聯或串聯的納升體積的免疫色譜柱微分析室組成，每個分析室通過聚合填料鍵合固定了石房蛤毒素抗體蛋白，以便發生免疫反應；閥門控制層含有氣壓控制閥門，控制樣品通道層相關孔道的開關。

2.根據權利要求1所述的微流控芯片，其特征在于所述光學透明材料選自無機材料：石英、玻璃，硬質高分子聚合物：聚碳酸脂、聚甲基丙烯酸甲酯、聚對本二甲酸乙二醇脂、聚苯乙烯或聚丙烯，彈性聚合物：聚二甲基硅氧烷；模具材料為硅片。

3.根據權利要求1所述的微流控芯片，其特征在于免疫色譜柱為整體柱或聚合填料灌柱，聚合填料為硅膠填料或其它有機聚合物。

4.根據權利要求1所述的微流控芯片，其特征在于免疫分析模塊的鍵合物為二抗或抗原，免疫分析信號由標記的反應物實現，標記物為各種染料或熒光。

5.一種如權利要求1所述的微流控芯片的制備方法，其特征在于采用模塑法，具體步驟如下：

(1)基片準備：將硅片放入Piranha溶液去氧化后用氮氣吹干，用SU-82050系列經旋涂機甩涂，在恒溫加熱板上軟烘；

(2)曝光和烘焙：將設計好的樣品通道層，閥門控制層的硅片模板分別放置在甩涂好的基片上，應用紫外曝光機曝光，之后在加熱板上烘焙；

(3)顯影：將硅片放入顯影液中顯影，之后分別用異丙醇和去離子水清洗干凈，并用氮氣吹干；

(4)硬烘：在熱板上緩慢加熱固定；

(5)澆注：聚二甲基硅氧烷單體及固化劑按質量配比5∶1至20∶1混合均勻，分別倒在相應的硅片模具上，在烘箱內固化，剝離；

(6)鍵合：將兩層聚二甲基硅氧烷芯片校準鍵合形成微通道腔，再與基片層鍵合。

6.如權利要求1所述微流控芯片的在分析檢測石房蛤毒素中的應用，其特征在于具體步驟如下：

樣品溶液由所述微流控芯片的進樣口進入芯片，芯片微分析室中的石房蛤毒素抗體蛋白或抗原與樣品中的石房蛤毒素發生特異性免疫反應，免疫分析信號由標記的抗原實現，經過多次洗滌之后，免疫標記信號產生的變化如熒光強度的變化被信號采集模塊采集分析；信號采集模塊由紫外LED和熒光光敏器件陣列組成，抗體/藻類毒素間的特異性結合導致的光學信號都可被光敏器件陣列采集并傳至到微處理器中和數據庫相比較，來分析樣品所含石房蛤毒素的濃度。