[發明專利]性傳播疾病檢測試劑盒

無效

• 申請號: 200910216463.0
• 申請日: 2009-12-01
• 公開（公告）號: CN102080123A
• 公開（公告）日: 2011-06-01
• 發明（設計）人: 應斌武;劉嘉銘;鄒秀和;黃進;王蘭蘭
• 申請（專利權）人: 四川大學華西醫院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11
• 代理公司: 北京律誠同業知識產權代理有限公司 11006
• 代理人: 李高峽

技術領域

本發明涉及一種性傳播疾病的檢測技術，特別是檢測人生殖器分泌物病原體的檢測方法，試劑盒以及相應的引物。

背景技術

性傳播疾病(sexually?transmitted?disease?STD)既是人類最古老的疾病之一，也是世界上發病最廣泛的傳染病。STD是一類主要通過已感染者與未感染者之間的性接觸而傳播的疾病，它的概念已從過去經典的5種病原體導致的疾病擴展為與性行為接觸密切相關的20余種病原體引起的傳染病。近年來，STD發病率呈現上升趨勢，由1980年全國僅報告48例STD感染者到2000年全國報告感染者859040例，STD在我國迅速蔓延。STD可引起男、女泌尿生殖道感染，造成不孕不育甚至癌變。目前STD的流行已對人群健康構成了嚴重威脅。此外，大約有50％的STD患者無癥狀，若因診斷延誤導致治療不及時不僅會成為重要傳染源進一步加速STD的傳播，而且會導致一系列并發癥和后遺癥的發生，嚴重危害人群健康。多種STD病原體混合感染率是目前STD防治工作的新挑戰，據估計目前STD病原體混合感染率高達28.8％。淋球菌(NG)，沙眼衣原體(CT)和解脲支原體(UU)是泌尿生殖系統STD中的最主要病原體，同時也是最易產生混合感染的3種病原體。快速有效地檢測NG，CT和UU病原體的攜帶者是積極干預STD傳播及治療STD患者的前提。

目前淋球菌(NG)，沙眼衣原體(CT)和解脲支原體(UU)的病原學檢測方法包括培養法和非培養法。培養法敏感、特異，是金標準，但其耗時過長、對標本的采集與運送要求高使其不能滿足臨床和疾病控制的需要。非培養法(如檢測NG感染常用的涂片革蘭氏染色和CT感染常用的ELISA法)簡便但敏感性低，易受干擾。因此開發并普及新的檢測方法意義重大。

近年來發展起來的熒光定量PCR(Fluorescence?Quantitative?PCR，FQ-PCR)技術已經在基因表達水平分析病原體的定性和定量檢測等方面得到廣泛運用，并以其特異度高，靈敏度高，精確，快速的優勢成為STD病原體非培養法臨床檢測的重要方法之一。但是，目前的NG，CT和UU檢測熒光定量PCR試劑盒均為一病一盒，一次只能檢測一種病原體，不利于混合感染的檢測，此外，FQ-PCR技術對檢測設備要求和操作人員要求高，不利于在中國廣大基層醫療機構中的普及和推廣，同時，檢測一種性病病原體就需要做一次PCR試驗，這一方面增加了醫務人員的工作量，同時加大了標本被污染的可能性，另一方面也極大的增加了成本。因此，利用PCR技術高效精確的優勢，開發更加經濟、簡便而又擁有高特異度和靈敏度的淋球菌(NG)，沙眼衣原體(CT)和解脲支原體(UU)快速檢測手段，有利于降低檢測費用和檢測周期，使之更好的用于臨床的普及推廣及流行病學調查。

近年來產生的多重PCR技術(Multiplex?PCR?US2002/037238)正在被用于臨床檢驗領域，如：Multiple?PCR?primer?group?for?human?HNF-1alpha?gene?amplification，KR?80909/2001；RHD?and?ABO?genotyping?by?multiplex?PCR，WO2006/032897；檢測乳腺癌易感基因突變的多重PCR試劑盒及其制備方法，CN101200766等。其中，該技術在檢測STD感染方面的應用包括：Rapid?one?step?detection?of?pathofenic?bacteria?in?urine?with?sexually?transmitted?disease(STD)and?prostatitis?patient?by?multiplex?PCR?assay(mPCR)，Sang?Rok?Lee，The?Journal?of?Microbiology，October2007，p.453-459；Multiplex?PCR-RLB檢測常見性病病原體的實驗研究，中國學位論文文摘數據庫；單管多重PCR技術快速檢測四種性傳播疾病的病原菌，唐文志，現代檢驗醫學雜志-2008.23(6).-16-19等。

國內外未見一種檢測淋球菌(NG)、沙眼衣原體(CT)和解脲支原體(UU)的銀染試劑盒。同時，未見采用多重PCR技術同時檢測淋球菌(NG)、沙眼衣原體(CT)和解脲支原體(UU)三種病原體DNA并使用銀染法進行分離檢測的方法。

鑒于目前性傳播疾病的高發態勢，迫切需要開發一種檢測效率高，成本低廉，便于基層衛生部門使用的檢測方法和試劑盒。

發明內容