[發明專利]一種鄰苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制備方法

在審

• 申請號: 200910204820.1
• 申請日: 2009-10-14
• 公開（公告）號: CN102040651A
• 公開（公告）日: 2011-05-04
• 發明（設計）人: 姚永波;師洪天;于新影;任均為
• 申請（專利權）人: 北京和誠先鋒醫藥技術有限公司
• 主分類號: C07K5/072
• 分類號: C07K5/072
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

一、技術領域

本發明涉及一種鄰苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制備方法。

二、技術背景

N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(式1)用于腸外營養，為接受腸外營養的病人提供谷氨酰胺，補充氨基酸溶液。

N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺具有促進正氮平衡、調節肌蛋白合成作用，作為腸外營養的重要組成成分，可以防止因長期應用腸外營養而引起的小腸黏膜通透性增強和萎縮，并可增強免疫功能和防止菌血癥的發生，用于那些需要補充谷氨酰胺的病人，包括那些處于分解代謝和高代謝狀況的病人。

目前，有關N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制備方法，報道很多。

CN1392156中，涉及到的N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的合成方法，是N-端保護的丙氨酸與三苯基磷、六氯乙烷在有機溶劑中反應形成活潑酯，而后與谷氨酰胺對接，酸化，脫保護得到產物。該方法所用的三苯基磷、六氯乙烷均為劇毒物質，操作繁瑣，不易工業化生產。

DE3206784和CN1683391中，提供的二肽N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的合成方法為，光氣與丙氨酸反應生成混酐，而后與谷氨酰胺對接，脫保護得到；或者N-端保護的氨基酸10mmol，與三苯基氧磷、三光氣在有機溶劑中反應形成活性酯；而后對接脫保護得到產物。光氣和三光氣劇毒，反應活性好，工業生產上難以控制，而且副產物多，收率低。

JP6234715與CN1786019中，用D-2-鹵-丙酰氯與L-谷氨酰胺反應生成中間產物D-2-鹵-丙酰-L-谷氨酰胺，氨水反應后得到產物。原料為光學鹵代氨基酸試劑，價格昂貴，不易工業化生產。

以上工藝均未采用鄰苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺脫保護基得到N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的方法，是因為鄰苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的制備困難。

CN1651456中采用了氯甲酸乙酯與鄰苯二甲酰丙氨酸反應反應后，再與L-谷氨酰胺縮合對接成鄰苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺，脫除保護基即制得N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。該方法縮合對接成鄰苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的過程中，副產物較多，收率低。

本發明采用最為簡潔的方法，直接通過鄰苯二甲酰-L-丙氨酰氯與L-谷氨酰胺反應制得鄰苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。通過控制pH值等工藝條件，所得產品收率高，純度好。

三、發明內容

本發明采用廉價的鄰苯二甲酰丙氨酰氯為原料，在弱堿性水溶液中，加入L-谷氨酰胺，攪拌下滴加酰氯的甲苯溶液，控制pH在9.5-11.5，加畢，無機酸調pH小于4，過濾，得到鄰苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。

具體步驟如下所述：

在弱堿性水溶液中，加入L-谷氨酰胺，攪拌，滴加鄰苯二甲酰丙氨酰氯的甲苯溶液和氫氧化鉀水溶液，控制pH在9.5-11.5，優選于10-11，更優選于10-10.5，滴畢，反應半小時，分出有機相，水溶液中用濃鹽酸調節pH值小于4，析出大量白色固體，攪拌，過濾得固體，95％乙醇重結晶得到鄰苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺，收率81％，HPLC＞99％。

四、實施方式

實施例1

在pH為10的碳酸鉀120mL水溶液中，加入10g的L-谷氨酰胺，攪拌下，滴加20g鄰苯二甲酰丙氨酰氯的甲苯溶液200mL，同時滴加20％的氫氧化鉀水溶液，控制pH值在10-10.5。滴加完畢，繼續反應半小時后，分液去掉甲苯層，水層用大約9mL濃鹽酸調節pH值到3-4，析出大量白色固體，繼續攪拌1小時，過濾得固體，用95％乙醇60mL重結晶得到鄰苯二甲酰-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺18.5g，收率81.1％，HPLC純度99.5％。

參考例1

將實施例二中的產物100g，水200mL，50％水合聯氨60g，加熱回流反應1小時。反應完畢冷卻至室溫，10％鹽酸調pH至4-5，析出固體，過濾。將濾液加入2g活性炭，攪拌半小時，過濾，濃縮，向殘留物中，加乙醇400mL，劇烈攪拌，得到白色固體，過濾即得到粗品。95％乙醇300mL重結晶，得到產品N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺61.2g。收率90％，HPLC純度99.9％。含量99.8％(HPLC外標法)，[α]_D²⁰＝+10.5°(C＝0.05，H₂O)。