[發(fā)明專利]紫芝菌絲體多糖精制物、其制備方法和用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200910197330.3
• 申請日: 2009-10-16
• 公開（公告）號: CN102040749A
• 公開（公告）日: 2011-05-04
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 楊義芳;金雋迪;楊國紅
• 申請（專利權(quán)）人: 上海醫(yī)藥工業(yè)研究院
• 主分類號: C08L5/00
• 分類號: C08L5/00;C08K5/07;C08B37/00;A61K31/715;A61P35/00;A61P37/04
• 代理公司: 北京市金杜律師事務(wù)所 11256
• 代理人: 鄭立柱;謝燕軍

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種紫芝菌絲體多糖精制物、其制備方法和其在醫(yī)藥領(lǐng)域的用途。

背景技術(shù)

食藥用真菌具有抗腫瘤抗病毒、降血脂、延緩衰老、護肝排毒、促進核酸和蛋白質(zhì)生物合成等多種功效，在中國有悠久的使用歷史。國內(nèi)外大量研究表明，真菌多糖是從真菌子實體、菌絲體、發(fā)酵液中分離得到的，為真菌類藥物的藥效部位，是能夠控制細胞分裂分化，調(diào)節(jié)細胞生長衰老的一類活性多糖。

紫芝(Ganoderma?Sinense?Zhao，Xu?et?Zhang)是一種高等真菌，屬擔(dān)子菌綱，多孔菌目，多孔菌科，靈芝屬。有利關(guān)節(jié)，保神，益精氣，堅筋骨，好顏色，療虛勞等滋補強壯的功效。國內(nèi)外對同屬異種的赤芝(常作靈芝)研究較多，但對紫芝的研究較少。紫芝含有多糖、蛋白質(zhì)、氨基酸等大分子物質(zhì)，也含生物堿、三萜類、甾醇、香豆素、酚類等小分子物質(zhì)。目前研究發(fā)現(xiàn)，紫芝提取物(以多糖為主)具有抗腫瘤、抗輻射、升高白細胞的作用。

對紫芝多糖研究尚處于起步階段，紫芝粗多糖一般含量較低(低于40％)，且其組分復(fù)雜，且由于紫芝子實體資源稀少，市場上少見紫芝產(chǎn)品。

紫芝野生資源貧乏，人工栽培受到自然因素、管理因素的制約致使原料質(zhì)量不可控，目前也并不能規(guī)模化生產(chǎn)，從而從資源角度影響了紫芝的開發(fā)。目前液體深層發(fā)酵技術(shù)已經(jīng)在生物領(lǐng)域有較為成熟的應(yīng)用，其生產(chǎn)菌絲體不受外界環(huán)境影響，產(chǎn)量大，且品質(zhì)與天然相當(dāng)甚至由于天然。利用深層發(fā)酵產(chǎn)生紫芝菌絲體工藝可解決其資源問題，并且達到質(zhì)量可控，最后實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。

從紫芝液體深層發(fā)酵得到的菌絲體中提取得到多糖，經(jīng)藥理實驗證明其有明顯的抗腫瘤作用。中國專利200710045369.4“一種紫芝發(fā)酵方法及制得的紫芝菌絲體”公開了一種紫芝液體深層發(fā)酵產(chǎn)生菌絲體的方法，中國專利200710045368.x“紫芝菌絲體胞內(nèi)多糖及其制備方法和應(yīng)用”公開了一種從紫芝液體深層發(fā)酵產(chǎn)生的菌絲體中提取制備得到粗多糖的方法。上述專利涉及的該菌絲體用水提醇沉法提取得到的粗多糖含量在39～75％。其藥理實驗的劑量均為40mg/kg/day(給藥方式：口服喂藥)，對小鼠H22肝癌和Lewis肺癌的抑制率分別在45～55％和40～50％。楊國紅，楊義芳，金雋迪(紫芝液體深層發(fā)酵的抗腫瘤活性部位研究[J].中草藥，2008，39(6)：877-880)對紫芝液體深層發(fā)酵的抗腫瘤活性多糖進行了研究，從紫芝菌絲體中提取得到胞內(nèi)多糖，其藥理實驗的劑量也為40mg/kg/day(給藥方式：口服喂藥)，顯示有明顯的抗腫瘤活性。以上專利和文章均未涉及多糖分子量和多糖單糖組成的研究。

傳統(tǒng)多糖提取方法用水提醇沉法，該法得到的粗多糖含量低，多糖組分復(fù)雜，并同時含有蛋白質(zhì)色素等大分子成分。

鑒于現(xiàn)有技術(shù)的狀況，需要尋找多糖含量高、分子量范圍集中、去除蛋白質(zhì)等雜質(zhì)、具有明顯的抗腫瘤活性且給藥劑量小于常規(guī)方法提取得到的粗多糖的紫芝菌絲體多糖精制物。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種紫芝菌絲體多糖精制物，其多糖含量高、分子量范圍小、去除蛋白質(zhì)等雜質(zhì)、具有明顯的抗腫瘤活性且給藥劑量小于常規(guī)方法提取得到的粗多糖。

本發(fā)明的第一個目的是提供一種紫芝菌絲體多糖精制物，所述多糖精制物含有多糖和單糖，其特征在于，所述多糖的含量大于90％，所述單糖的含量小于5％。

進一步地，所述多糖精制物不含有蛋白質(zhì)。

進一步地，所述多糖精制物中多糖的分子量為10萬-200萬。

對本發(fā)明多糖精制物的結(jié)構(gòu)進行研究得知，其含有的多糖由半乳糖和鼠李糖組成，其摩爾比為15∶1～17.4∶1，優(yōu)選15∶1。

本發(fā)明采用膜技術(shù)和季銨鹽沉淀法縮小紫芝菌絲體多糖的分子量范圍，并去除蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，從而得到多糖精制物。

本發(fā)明的第二個目的是提供上述紫芝菌絲體多糖精制物的制備方法，包括如下步驟：紫芝菌絲體經(jīng)水提醇沉得到粗多糖，粗多糖經(jīng)超濾、濃縮和鹽析，得到紫芝菌絲體多糖精制物。

所得紫芝菌絲體多糖精制物中多糖含量大于90％，不含蛋白質(zhì)。其生產(chǎn)工藝簡單，可行。

作為本發(fā)明的進一步優(yōu)選，所述超濾步驟通過截留分子量為1-5萬的超濾膜進行。更優(yōu)選地，所述超濾膜的截留分子量為3萬。

作為本發(fā)明的進一步優(yōu)選，所述超濾膜由聚酰胺、聚醚砜膜或醋酸纖維素制成。

作為本發(fā)明的進一步優(yōu)選，所述濃縮步驟通過納濾膜進行。優(yōu)選截留分子量為150-300的納濾膜。優(yōu)選由聚酰胺制成的納濾膜。