[發明專利]一種制備S-2-羥基-4-苯基丁酸乙酯的方法

有效

• 申請號: 200910182736.4
• 申請日: 2009-09-04
• 公開（公告）號: CN101665811A
• 公開（公告）日: 2010-03-10
• 發明（設計）人: 陳依軍;吳旭日
• 申請（專利權）人: 陳依軍
• 主分類號: C12P7/62
• 分類號: C12P7/62
• 代理公司: 蘇州創元專利商標事務所有限公司
• 代理人: 陶海鋒

技術領域

本發明涉及一種制備S-2-羥基-4-苯基丁酸乙酯的方法，屬于生物催化不 對稱還原制備醫藥手性中間體技術領域。

背景技術

S-2-羥基-4-苯基丁酸乙酯，分子式為C₁₂H₁₆O₃，英文名為ETHYL (S)-2-HYDROXY-4-PHENYLBUTYRATE，CAS號：125639-64-7。與R-2- 羥基-4-苯基丁酸乙酯相對應，是一種重要的手性化合物。后者是合成眾多血 管緊張素轉化酶抑制劑(ACEI)普利類藥物的關鍵手性中間體；而對S-2-羥基 -4-苯基丁酸乙酯的應用正在進一步研究中。

該類化合物的制備方法主要有拆分法和合成法，其中，拆分法主要包括 化學拆分和生物拆分，但其最大收率一般不超過50％；合成法主要包括化學 合成法和生物合成法，其中化學合成法的收率一般在70～90％，對映體過量 (ee)值為50～82％，其所用催化劑價格昂貴，產物的光學純度也不理想，且一 般需要較高的氫氣壓力，對設備要求較高。生物催化法具有高效、高立體選 擇性、反應條件溫和等優點，近年來得到了研究者的青睞。目前，羥基腈化 酶和脂肪酶是最為普遍和最為常用的生物催化劑，羥基腈化酶是第一個用于 合成光學純度的羥腈類化合物的生物催化劑，但該合成過程的第二步是腈基 水解反應(J.Biotechnol.1994，33：175-182)，劇烈的腈基水解反應會帶來終 產物消旋、降解和其他一些副反應(J.Mol.Catal.B：Enzym.2003，24-25： 89-98)。脂肪酶拆分外消旋體是制備光學純2-羥基-4-苯基丁酸乙酯一個較為 成功的方法(J.Org.Chem.1990，55：812-815)，據報道，來自Psedomonas cepacia中的脂肪酶可在水和有機溶劑組成的兩相體系中選擇性水解2-羥基 -4-苯基丁酸乙酯的外消旋體，并可通過透析過濾的方法獲得單一光學純度的 產物(Enzyme?Microb.Technol.2002，30：673-681)，然而，就其本質而言， 消旋體拆分的最高理論產量是50％。此外，醇脫氫酶選擇性還原2-氧代-4- 苯基丁酸制備其單一光學異構體的方法是一個重要和具有廣泛應用價值的 生物催化手段，例如，Cha等(Biotechnol.Prog.2007，23：606-612)利用 Enterobacter?sp.BK2K中的醇脫氫酶以2-氧代-4-苯基丁酸為底物，偶聯甲 酸脫氫酶進行輔酶NAD⁺循環，制備得到S-2-羥基-4-苯基丁酸，然而，其ee 值只有94％，底物濃度也僅為0.1M，催化效率和產物光學純度不高。

因此，開發一種高效穩定的生物催化制備S-2-羥基-4-苯基丁酸乙酯的方 法，選擇適當的反應條件，最大限度地提高ee值和底物濃度，具有現實的積 極意義。

發明內容

本發明的目的是提供一種制備S-2-羥基-4-苯基丁酸乙酯的方法，以最大 限度地提高ee值和底物濃度。

為達到上述發明目的，本發明采用的技術方案是：一種制備S-2-羥基-4- 苯基丁酸乙酯的方法，包括如下步驟：

(1)在溶劑中加入底物、雙羰基還原酶和由甲酸脫氫酶介導的輔酶循環 再生體系，振蕩反應1～18小時；

其中，所述溶劑為有機溶劑和緩沖液的混合溶液，有機溶劑和緩沖液的 體積比為1∶9～5∶5，所述有機溶劑選自乙醇、四氫呋喃、二甲基亞砜、乙 酸乙酯、甲苯和正己烷中的一種或幾種，所述緩沖液的pH值為4～7.5；

所述底物為：其中R為H或C_1～6的烷基；底 物濃度為0.1～1.5M；

所述雙羰基還原酶的用量為0.5～5U/mL；

(2)將步驟(1)得到的產物進行分離提純，即得到所述S-2-羥基-4-苯基丁 酸乙酯。