[發明專利]苔蘚植物作為植物外植體消毒劑的用途、及該消毒劑組合物及其制備方法和使用方法

無效

• 申請號: 200910166556.7
• 申請日: 2009-08-26
• 公開（公告）號: CN101632392A
• 公開（公告）日: 2010-01-27
• 發明（設計）人: 孫晶;胡蓓蕾;鄒明;鄔偉;孔慧梅;劉佳明
• 申請（專利權）人: 溫州醫學院附屬第二醫院
• 主分類號: A01N65/00
• 分類號: A01N65/00;A01P1/00;A61L2/18;A61L101/56
• 代理公司: 北京匯澤知識產權代理有限公司
• 代理人: 張若華

技術領域

本發明涉及植物組培技術的消毒，具體涉及將苔蘚植物用于植物外植體消 毒劑的新用途，及該消毒劑組合物及其制備方法和使用方法。

背景技術

植物組織培養中的污染主要是由外植體帶菌、接種操作污染、培養室污染 等原因造成；后兩者可以通過熟練操作過程和提高培養室潔凈度而避免，而外 植體帶菌就需要選擇適合的消毒方式，嚴格消毒處理，再經無菌操作接種到無 菌培養基上。依據傳統的表面滅菌處理技術，采來的外植體除去不用的部分之 后，還需對其進行以下幾個步驟的處理：(1)外植體表面滅菌從室外帶回來的 材料，要除去一些不必要的部分，洗去泥土，然后用洗潔劑浸泡、沖洗，必要 時可用軟刷刷洗或用脫脂棉球擦洗材料表面，然后剪成適宜的大小，通過表面 滅菌可清除許多雜菌。(2)植物材料浸入70％的酒精處理。(3)用消毒劑處理， 常用的表面滅菌劑有酒精、升汞、雙氧水以及次氯化物。(4)無菌水漂洗。外 植體的徹底消毒是組織培養成功的關鍵因素之一。外植體消毒劑的選擇上應該 既考慮到有效減少或阻止植物組織培養基的微生物污染，又要兼顧植物組織正 常生長或發育。

中國專利CN1561695A公開了一種植物組培消毒方法，采用次氯酸鈉和氯化 汞作為植物材料消毒劑，但是，氯化汞是劇毒物質，污染環境、消毒后難以除 去殘余汞對外植體的殺傷作用；次氯酸鹽對組織也有毒害作用。實踐中出現的問 題是，消毒時間長了植物材料死亡，消毒時間短了植物材料表面細菌不能殺死， 致使植物材料污染死亡。中國專利CN101461329A公開了一種外植體的表面滅菌 方法，采用的次氯酸鈉、氯化汞、溴水作為消毒劑，但這種消毒劑對于具有內 生菌的植物材料消毒效果較差，其蝴蝶蘭組培的污染率多達50％，紅掌組培的污 染率更高達65％。中國專利CN101138317A公開了組織內帶菌外植體消毒的處理方 法，外植體消毒仍然采用常規的酒精浸泡和次氯酸鈉消毒，在組織培養基中加 入羧芐青霉素、硫酸鏈霉素和制菌霉素，防治組培污染，但是它不是針對植物 外植體本身消毒，而是針對組培培養基，而且，抗生素會造成植物毒害或改變 培養植物的行為。中國專利CN1871889A公開了一種植物內生菌脫除方法，在采 集植物組織之前對植株進行農藥連續噴施三次后，開始采外植體進行組培，操 作不便且對于隨機采集珍貴物種組培不適合，亦難以推廣。

苔蘚植物是一群小型的多細胞高等植物，多適生于陰濕的環境中，不被細 菌、真菌或病毒所感染，具有不易腐爛，不易霉變，不被昆蟲和一些動物所侵 害等特點。存放在標本館里的苔蘚植物標本，不像其它高等植物那樣易受寄生 微生物(細菌、真菌等)的侵蝕，不需經過特別處理就可以長期存放。苔蘚植物 作為簡單的陸生植物，形態學上防御屏障幾乎沒有，為適應其生存環境，發展 了所謂的“化學屏障”，即能夠合成具有抗微生物活性的次生代謝產物以保護自 身，抵抗微生物的侵害。在民間，苔蘚被廣泛用于治療外傷、燒傷、感染、肺 結核、燙傷和肺炎等癥。苔蘚具有抗病原微生物的作用，可以在陰暗、暖濕的 環境生活，免受自然界各種病菌的感染，主要原因就是苔蘚內的多種抗菌活性 成分，對眾多細菌、真菌、病毒同時具有抑制作用，是少有的天然來源的抗真 菌化合物，可謂一種天然的廣譜抗菌物質。目前還未見有將苔蘚植物用于植物 組培消毒的相關研究和報道。

發明內容

本發明要解決的是現有的用于植物組培的消毒劑殺菌效果不理想或容易使 植物本身受到毒害的技術問題，而首次將苔蘚植物用作植物外植體消毒的消毒 劑，并提供這種消毒劑組合物，該組合物含有苔蘚植物殺菌抑菌活性成分，用 于植物外植體消毒，降低植物組培微生物污染，具有安全無毒、殺菌性能好的 優點，本發明還提供了這種消毒劑組合物的制備方法和使用方法。

為解決上述技術問題，本發明采取的技術方案是：一種用于植物外植體的 消毒劑組合物，其特征在于，該組合物包括活性成分、滲透劑、穩定劑和助溶 劑，所述活性成分為苔蘚植物，其中各組分重量比為：

苔蘚植物：85-100重量份，

滲透劑：2-5重量份，

穩定劑：5-10重量份，

助溶劑：0.5-1重量份。

所述苔蘚植物的重量為苔蘚植物經烘干、研磨制得的干粉的重量。