[發明專利]血漿多肽的制備方法有效
| 申請號: | 200910162646.9 | 申請日: | 2009-08-17 |
| 公開(公告)號: | CN101613734A | 公開(公告)日: | 2009-12-30 |
| 發明(設計)人: | 張吉越 | 申請(專利權)人: | 張吉越 |
| 主分類號: | C12P21/06 | 分類號: | C12P21/06 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 血漿 多肽 制備 方法 | ||
技術領域
本發明涉及生物工程技術領域,尤其是以動物血液為原料制備血漿多肽的方法。
技術背景
動物血液是一種寶貴蛋白資源,具有很高的營養價值,其用途廣泛,適用于飼料、食品、保健品等,市場需求量大,前景廣闊,產品價值高。目前國外內對血粉的研究較多,血粉的傳統利用方法有蒸煮法、熱變性處理法及噴霧干燥法等,較為現代的方法有酸水解法、發酵法和酶解法。酸水解法是利用酸來水解畜血蛋白,提高了血粉的消化率,但是卻破壞了血粉中的一種必需氨基酸一一色氨酸;發酵法是將特定的微生物菌種接入血粉與透氣性好的輔料(如米糠、豆餅粉、菜粕等)組成的混合原料中,讓菌種在堆積原料中自然發酵產酶而達到水解血粉的目的。但是這種方法發酵降解血粉原料不完全。如何更好地開發動物血漿資源,使其豐富的營養得到更充分的利用,同時最大限度地減少對環境的污染,是國內眾多專家關注的焦點。
發明內容
本發明的目的在于克服現有技術的不足,提供一種成本低廉、產品收率高、多肽含量高的血漿多肽的制備方法。
本發明血漿多肽的制備方法包括以下幾個步驟:
(a)將冷凍結塊的動物血液緩化,用離心機分離成血漿和血球;
(b)將血球原料液用大功率超聲波破碎機進行細胞破壁;
(c)將血漿與破壁血球混合后加水溶解,形成血漿血球混合溶液;
(d)將血漿血球混合溶液加熱到80~100℃,保溫20~50分鐘滅菌;
(e)將經過滅菌的血漿血球混合溶液溫度降到37~40℃,加入胰蛋白酶,保溫酶解2~4小時;
(f)將經過胰蛋白酶酶解后的血漿血球混合溶液加熱到45~50℃,加入堿式蛋白酶,保溫酶解4~6小時;
(g)將經過堿式蛋白酶酶解后的血漿血球混合溶液加熱到55~65℃,加入木瓜蛋白酶,保溫酶解7~9小時;
(h)將經過三種酶解完成后的血漿血球混合溶液加熱到80~100℃,保溫10~40分鐘,使酶失活;
(i)將經過使酶失活處理后得到的血漿血球混合溶液通過分子膜過濾器過濾,得到血漿多肽濃縮液;
(j)將血漿多肽濃縮液在180℃~200℃下進行噴霧干燥,得到血漿多肽粉劑。
步驟(i)所述的通過分子膜過濾器過濾,它包括兩次過濾,第一次經過10000道爾頓的分子膜過濾,第二次經過1000道爾頓的分子膜過濾。
本發明所述的動物血液可以是豬血、牛血、羊血、鴨血和雞血中的一種或幾種。
本發明噴霧干燥時的進風溫度為180~220℃,出風溫度為70~80℃,而且血漿多肽濃縮液在待干燥過程中保持攪拌。
本發明具有如下優點:1、本發明提供的制備方法在常溫常壓下進行;2、血漿多肽的提取效率高:酶解液通過截留分子量為1000道爾頓的分子膜進行分子篩分從而保證產品的肽含量達到80%以上。3、操作簡單,易實現自動化控制。4、本發明環保。工藝徹底摒棄了以往的有機溶劑提純方法,操作過程中對人員和周圍環境不產生危害。5、本工藝大大加強了動物蛋白的消化和轉化率。
具體實施方式
實施例1:一種血漿多肽的制備方法,包括以下幾個步驟:(a)將冷凍結塊的雞血液緩化,用離心機分離成血漿和血球;(b)將血球原料液用大功率超聲波破碎機進行細胞破壁;(c)將血漿與破壁血球混合后加水溶解,形成血漿血球混合溶液;(d)將血漿血球混合溶液加熱到85℃,保溫30分鐘滅菌;(e)將經過滅菌的血漿血球混合溶液溫度降到38℃,加入胰蛋白酶,保溫酶解3小時;(f)將經過胰蛋白酶酶解后的血漿血球混合溶液加熱到48℃,加入堿式蛋白酶,保溫酶解5小時;(g)將經過堿式蛋白酶酶解后的血漿血球混合溶液加熱到60℃,加入木瓜蛋白酶,保溫酶解8小時;(h)將經過三種酶解完成后的血漿血球混合溶液加熱到90℃,保溫20分鐘使酶失活;(i)將經過使酶失活處理后得到的血漿血球混合溶液通過分子膜過濾器過濾,第一次經過10000道爾頓的分子膜過濾,第二次經過1000道爾頓的分子膜過濾,得到血漿多肽濃縮液;(j)將血漿多肽濃縮液在190℃下進行噴霧干燥,得到血漿多肽粉劑。
實施例2:一種血漿多肽的制備方法,包括以下幾個步驟:(a)將冷凍結塊的豬血液緩化,用離心機分離成血漿和血球;(b)將血球原料液用大功率超聲波破碎機進行細胞破壁;(c)將血漿與破壁血球混合后加水溶解,形成血漿血球混合溶液;(d)將血漿血球混合溶液加熱到90℃,保溫20分鐘滅菌;(e)將經過滅菌的血漿血球混合溶液溫度降到39℃,加入胰蛋白酶,保溫酶解3.5小時;(f)將經過胰蛋白酶酶解后的血漿血球混合溶液加熱到50℃,加入堿式蛋白酶,保溫酶解4小時;(g)將經過堿式蛋白酶酶解后的血漿血球混合溶液加熱到62℃,加入木瓜蛋白酶,保溫酶解7小時;(h)將經過三種酶解完成后的血漿血球混合溶液加熱到85℃,保溫30分鐘使酶失活;(i)將經過使酶失活處理后得到的血漿血球混合溶液通過分子膜過濾器過濾,第一次經過10000道爾頓的分子膜過濾,第二次經過1000道爾頓的分子膜過濾,得到血漿多肽濃縮液;(j)將血漿多肽濃縮液在200℃下進行噴霧干燥,得到血漿多肽粉劑。
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