[發明專利]一種生物樣品中蛋白質組的分析方法

有效

• 申請號: 200910146883.6
• 申請日: 2009-06-11
• 公開（公告）號: CN101685080A
• 公開（公告）日: 2010-03-31
• 發明（設計）人: 高尚先
• 申請（專利權）人: 高尚先
• 主分類號: G01N27/62
• 分類號: G01N27/62;G01N1/28;G01N33/68;G01N33/574
• 代理公司: 北京元中知識產權代理有限責任公司
• 代理人: 王明霞

1.一種生物樣品中蛋白質組的分析方法，其特征在于，包括如下步驟：

（1）生物樣品預處理：在生物樣品中加入1～2倍體積的U9尿素緩沖液，放置5～10分鐘 后加入1～2倍體積的pH?3.55～3.95、30～40mmol/L的醋酸鈉溶液，得到生物樣品預處 理溶液；其中，所述的U9尿素緩沖液中含有9mol/L尿素、2%CHAPS、50mmol/LTris 鹽酸、1%DTT，pH為9.0；

（2）納米磁珠處理：在步驟（1）得到的生物樣品預處理溶液中加入納米磁珠，置于磁鐵上 孵育10～30min后棄去液體，加入1～2倍體積的pH?3.55～3.95、30～40mmol/L的醋酸 鈉溶液，置于磁鐵上孵育1～5min使納米磁珠結合腫瘤標記物，棄去液體；在納米磁珠中 加入質量百分比濃度為5％三氟醋酸溶液，洗脫1～5min，得上清液；

（3）質譜分析：將步驟（2）得到的上清液進行蛋白質譜分析，得到指紋圖譜。

2.根據權利要求1所述的蛋白質組的分析方法，其特征在于，所述的納米磁珠為弱陽離子交 換型納米磁珠。

3.根據權利要求1所述的蛋白質組的分析方法，其特征在于，在步驟（1）和（2）中加入的 醋酸鈉溶液的pH為3.65～3.85。

4.根據權利要求3所述的蛋白質組的分析方法，其特征在于，所述的醋酸鈉溶液的pH為 3.75。

5.根據權利要求1所述的蛋白質組的分析方法，其特征在于，所述的生物樣品包括血清、血 漿、唾液、精液、淋巴液和尿液。

6.根據權利要求1所述的蛋白質組的分析方法，其特征在于，在步驟（2）中，加入pH?3.55～ 3.95的醋酸鈉溶液，置于磁鐵上孵育1～5min使納米磁珠結合腫瘤標記物，棄去液體；重復 1～3次后加入質量百分比濃度為5％三氟醋酸溶液進行洗脫。